Техника и механизм окраски по Грамму (дифференцировка грам-положительных и грамотрицательных бактерий в зависимости от строения клеточной стенки)

Этапы окраски по Граму Происходящие при окраске процессы Микроскопическая картинка
  1. На мазок наносят краситель генцианвиолет (кристаллический фиолетовый) на 1-2 мин     Генцианвиолет проникает в клеточную стенку и фиксируется в пептидогликане
  2. Генцианвиолет сливают, а на мазок наносят раствор Люголя - до почернения мазка (10 - 20 сек)   Молекулы йода способствуют созданию прочной структуры генцианвиолет-пептидогликан
  3. Действие дифференцирующей жидкости - 96° этанол - мазок промывают до прекращения отхождения струек синей краски.   4. Мазок промывают водой.   Спирт вымывает генцианвиолет из тонкослойного пептидогликана грам- бактерий, обесцвечивая их
  5. На мазок наносят раствор фуксина на 2-3 мин Фуксин проникает в обесцвеченные спиртом грам- бактерии, окрашивая их в красный цвет. Цвет грам+ бактерий не изменяется, так как их пептидогликан прочно удерживает генцианвиолет

Таблица 5