Области использования ПЦР
1. Поиск мутаций.
2. Составление генетической карты различных организмов.
3. Оценка функционального значения гетерозиготности, мутаций и рекомбинации.
4. Диагностика инфекционных болезней - идентификация микроорганизмов.
5. Генетическая инженерия: для получения новых сортов растений, новых клонов микроорганизмов, используемых в биотехнологии.
6. Органический синтез.
Виды ПЦР: in vitro, in situ (клетки фиксируются специальными методами на стекле, нуклеотиды мечены флуорохромами, детекция проводится с помощью микроскопических методов, обязательно использование обратной транскриптазы).
II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
1. Изучить этапы проведения ПЦР, зарисовать схему амплификации нуклеиновой кислоты.
2. Решение ситуационных задач: изучить результаты мониторинга количественного варианта ПЦР ВИЧ-инфицированных пациентов и сделать вывод об эффективности антиретровирусной терапии.
3. Сдать отчёт преподавателю и защитить его.
III. Содержание отчёта
Отчёт должен быть представлен на отдельных листах формата А4 или в альбоме.
Отчёт должен содержать следующие пункты:
1. Цель работы.
2. Схему постановки ПЦР.
3. Результаты решения ситуационных задач.
4. Выводы.
Отчёт на листе формата А4 (или в альбоме) сдаётся у конце работы преподавателю.
IV. Контрольные вопросы
1. В каких целях применяются молекулярно-биологические методы в области медицины и биологии?
2. Почему ПЦР считают наиболее специфичным методом идентияикации микроорганизмов среди других методов?
3. Какое оборудование требуется для проведения ПЦР?
Список литературы:
1. Поздеев О.К. Медицинская микробиология: учебное пособие/под ред. В.И. Покровского – 4-е изд.испр. – М.: ГЭОТАР –Медиа, 2006 – 768с.
2. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. Учебник. М.: ООО «Медицинское информационное агенство», 2001. 736 с.
3. Красильников А.П., Романовская Т.Р. Микробиологический словарь-справочник.- Минск, "Асар", 1999 г.
СОДЕРЖАНИЕ
Лабораторное занятие №1.Микроскопический метод, задачи, этапы, характеристика …………………………………………………………………..4
Лабораторное занятие №2. Культуральный метод исследования - задачи, этапы, характеристика…………………………………………………………..10
Лабораторное занятие №3.Определение чувствительности бактерий к антибиотикам…………………………………………………………………….19
Лабораторное занятие №4. Количественное определение микроорганизмов………………………………………………………………...24
Лабораторное занятие №5. Иммунологические методы диагностики инфекционных болезней……………………………………………………...…29
Лабораторное занятие №6. Биологический метод диагностики инфекционных болезней…………………………………………………………………………..37
Лабораторное занятие №7.Диагностика вирусных инфекций……………………………………………………………………..…..40
Лабораторное занятие №8.Экология микроорганизмов природных сред……………………………………………………………………………......44
Лабораторное занятие №9.Молекулярно-биологическиеметоды диагностики инфекционных болезней………………………………………………………...47