Диагностики и лечения инфекционных болезней
Цель занятия: изучить биологические препараты, применяемые для профилактики диагностики и лечения инфекционных болезней сельскохозяйственных животных.
Материалы и оборудование: таблица классификации вакцин, вакцины, сыворотки аллергены, антигены, бактериофаги.
Место проведения занятия: аудитория кафедры эпизоотологии.
Важное место в общем комплексе противоэпизоотических мероприятий занимает специфическая профилактика инфекционных болезней. Для этого используют биологические препараты.
Биологические препараты — средства биологического происхождения, применяемые в профилактических, диагностических и лечебных целях. Промышленность выпускает также и стимулирующие биопрепараты: иммуностимуляторы, кормовые антибиотики, гормоны, витамины.
Средства иммунопрофилактики. К ним относят вакцины, глобулины, сыворотки. Основные показатели хорошего качества всех профилактических препаратов — стерильность или чистота, безвредность, допустимая степень вирулентности, антигенная активность и иммуногенность, эпизоотическая эффективность.
Вакцинаминазывают биологические препараты, получаемые из ослабленных, убитых возбудителей соответствующих болезней, комплекса их антигенов или продуктов жизнедеятельности. Введение таких препаратов вызывает образование специфических антител и стимулирует другие защитные механизмы.
Штаммы микроорганизмов, применяемые для изготовления вакцин, должны быть классифицированы, клонированы и представлять собой однородную популяцию микроорганизмов с характерными морфологическими, биохимическими и антигенными признаками.
Различают вакцины:
Живые вакцины содержат культуру микроорганизмов, сохранивших высокую иммуногенность с генетически закрепленной пониженной вирулентностью.
Их получают методом направленного изменения свойств возбудителя под воздействием внешней среды (вакцины против сибирской язвы, туберкулеза, бруцеллеза) или путем пассажей через организм невосприимчивых животных (вакцины против бешенства, рожи свиней).
Живые вакцины наиболее перспективны для ветеринарной практики, так как иммунитет после их применения образуется, как правило, раньше и характеризуется большей напряженностью и длительностью.
Инактивированные вакцины содержат культуру микроорганизмов определенного вида, обезвреженных действием физико-химических факторов (высокая температура, ультрафиолет, фенол, формалин) и утративших способность к репродуцированию (без грубого разрушения клетки микроорганизма, с сохранением иммуногенных свойств возбудителя). Инактивированные вакцины по иммуногенности уступают живым, поэтому их вводят в больших дозах и многократно. Чтобы повысить иммунологическую эффективность инактивированных вакцин, используют депонирующие вещества (адъюванты), которые по механизму действия на антиген делят на сорбирующие и эмульгирующие.
Анатоксины — вид вакцин, применяемых для активной профилактики токсикоинфекций животных.
Получают методом обезвреживания бактерийных экзотоксинов 0,3-0,4%-м формалином с выдерживанием при 38-40 °С в течение трех-четырех недель. Анатоксины стимулируют синтез антитоксинов, которые, нейтрализуя экзотоксины возбудителя, не оказывают губительного действия на него самого. Широко используют поливалентный анатоксин против клостридиозов овец — инфекционной энтеротоксемии, брадзота, некротического гепатита, злокачественного отека овец и дизентерии ягнят.
Вакцины нового поколения — субъединичные, генно-инженерные — созданы с помощью методов биотехнологии.
По технологии изготовления вирусные вакцины делят на:
- тканевые культуральные - изготовленные из различных тканей животных, организм которых был использован в качестве среды размножения возбудителя
- эмбриональные —.изготовленные из эмбрионов, которые были использованы в качестве среды размножения возбудителей.
В зависимости от примененного инактиватора все вакцины подразделяют на
- феноловые
- формоловые
- спиртовые,
-гретые.
В зависимости от от добавленного адъюванта на
- квасцовые (адсорбированные на алюмокалиевых квасцах),
-гидроокисьалюминиевые
-масляные.
В зависимости от количества антигенов вакцины подразделяют на:
- моновалентные — содержащие один антиген одного штамма (серотипа, биотипа) возбудителя данной болезни;
- поливалентные — содержащие антигены различных серотипов (биотипов, штаммов) возбудителя данной болезни;
- ассоциированные — содержащие антигены возбудителей нескольких заболеваний;
- аутогенные — приготовленные из штамма микроорганизма, выделенного от больного животного, и для него же предназначенные.
Кроме того, выпускают вакцины жидкие и сухие.
Сухие вакцины изготовленные в основном из живых слабоустойчивых штаммов, высушенные в условиях глубокого вакуума после предварительного замораживания (лиофилизация) или другим методом.
Прививки бывают профилактические (плановые) и вынужденные (при угрозе заноса возбудителя инфекции в хозяйство или появлении в хозяйстве инфекционной болезни).
Противопоказаниями против прививок служат: наличие в хозяйстве остроинфекционных болезней, а также переболевших животных (реконвалесцентов), истощенных или животных с повышенной температурой тела; неблагоприятные погодные условия; стресс-факторы; последняя стадия беременности, первые 2 нед. после родов; прививки другой вакциной.
Лечебные и диагностические препараты. К средствам специфической терапии относят гипериммунные сыворотки (по механизму действия делят на антитоксические, антибактериальные и противовирусные), сыворотки реконвалесцентов, иммуноглобулины, бактериофаги, антибиотики, пробиотики. Для диагностических целей в ветеринарии используют сыворотки, иммуноглобулины, аллергены, бактериофаги, антигены.
Антибактериальные сыворотки воздействуют непосредственно на возбудителя заболевания, подавляя его жизнедеятельность. Биопромышленность нашей страны выпускает сыворотки против сибирской язвы, рожи свиней, пастереллеза и др.
Антитоксические сыворотки содержат антитела (иммуноглобулины), способные специфически связывать и нейтрализовывать токсины бактериального, растительного и животного происхождения. В ветеринарии применяют антитоксические сыворотки против анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец, столбняка, ботулизма, злокачественного отека и др.
Противовирусные сывороткивысокоэффективны, особенно в начале заболевания. Биопромышленность выпускает сыворотки против болезней крупного рогатого скота (ринотрахеит, вирусная диарея и др.), собак (чума, гепатит, энтерит).
Лечебные, профилактические и диагностические гипериммунные сыворотки обычно получают от лошадей, иногда — от волов, свиней. После окончания гипериммунизации, когда в сыворотке крови животного установлено максимальное содержание специфических антител, у животного берут кровь (чаще на 7-10-й день после последнего введения антигена). Кровь сепарируют, чтобы получить нативную плазму (сыворотку), которую отстаивают и стабилизируют (консервируют), затем концентрируют, стандартизируют, стерилизуют фильтрацией и при необходимости прогревают.
После производственного контроля каждую серию сыворотки проверяют на стерильность, безвредность, специфическую активность.
На бактериальную стерильность контролируют высевами из препарата на специальные питательные среды (МПА, МПБ с глюкозой, МППБ под маслом и агар Сабуро или среду Чапека, чтобы исключить контаминацию грибковой микрофлорой).
Безвредность проверяют на лабораторных животных в соответствии с нормативной документацией по изготовлению сыворотки. Животные должны оставаться здоровыми, без заметной местной и общей реакции в течение 10 дней.
Специфическую активность определяют в реакциях биологической и серологической нейтрализации. Реакцию биологической нейтрализации ставят на восприимчивых лабораторных животных, эмбрионах птиц или культурах клеток. Для серологического тестирования применяют РН, РДП в агаровом геле, РТГА, РСК, РНГА и др. с использованием в качестве контроля заведомо известных позитивных и негативных сывороток (референс-препаратов).
Кроме того, проверяют превентивные свойства лечебных и профилактических сывороток на восприимчивых животных. Чтобы определить активность сыворотки, ее вводят животным внутрибрюшинно, подкожно или внутримышечно. Затем через 20-24ч инъецируют подтитрованную дозу вирулентного контрольного штамма соответствующего микроорганизма. Подопытные животные должны оставаться здоровыми не менее 14 дней, контрольные- погибнуть или заболеть.
Сыворотки реконвалесцентов(противовирусные и антибактериальные) получают от животных, переболевших инфекционной болезнью без осложнений. Сыворотку рекомендуют получать и использовать в условиях одного хозяйства. Кровь от животных-доноров можно брать непосредственно в хозяйстве или на мясокомбинате во время их убоя. Сыворотки реконвалесцентов применяют при парагриппе, вирусной диарее крупного рогатого скота, сальмонеллезе, пастереллезе и т. д.
Лечебные глобулины (против болезни Ауески сельскохозяйственных животных и пушных зверей, сибирской язвы) представляют собой водный раствор α- и β-глобулинов сыворотки крови животных. Иммуноглобулины получают различными методами (риваноловым, спиртовым и путем осаждения сульфатом аммония) из гипериммунных сывороток.
Бактериофаги - вирусы, которые проникают в бактериальную клетку, размножаются в ней и лизируют ее с выходом фаговых частиц в окружающую среду. Бактериофаги способны лизировать только определенные микроорганизмы. Введенный в организм бактериофаг сохраняется в нем 5-7 дней (прием бактериофага не может заменить вакцинацию). В нашей стране выпускают бактериофаги против сальмонеллеза или колибактериоза телят, пуллороза - тифа птиц.
Для идентификации возбудителей болезней в бактериальных культурах и свежем патологическом материале биопромышленность выпускает: сибиреязвенный бактериофаг К—ВИЭВ, «Гамма—МВА», ВНИИВВиМ, лиофилизированные бактериофаги для идентификации возбудителей листериоза, стафилококковые — для типирования штаммов; бруцеллезный бактериофаг.
Диагностические сыворотки используют не только для идентификации возбудителя инфекции, но и для определения его типа и варианта. Производство диагностических сывороток строго регламентировано, что обусловливает их высокое качество и стандартность. В большинстве случаев продуцентами названных сывороток служат лабораторные животные (кролики, морские свинки), петухи и редко — лошади.
Глобулин диагностический (для диагностики бешенства в прямом методе иммунолюминесцентной микроскопии) - это чистая фракция γ-глобулина, выделенного из высокоактивной моноспецифической антирабической сыворотки лошадей и химически связанного с изотиоцианатом флуоресцина.