Бактериоскопическое исследование по Цилю-Нильсену
Важным элементом обеспечения качества бактериоскопических исследований является регулярное осуществление внутрилабораторного контроля качества. Контроль качества осуществляется на всех технологических этапах микроскопического исследования:
- оценка качества поступающих проб;
- контроль за соблюдением рецептуры и методики приготовления реагентов и красителей;
- правила и сроки хранения реагентов и красителей;
- наблюдение за неукоснительным соблюдением методических приемов при: приготовлении мазков (включая качество предметных стекол);
- окраска мазков;
- проведение микроскопического исследования;
- регулярный контроль качества используемых химических реактивов и сроков хранения, исправности оборудования;
- периодический контроль результатов бактериоскопии;
- проверка правильности учета и регистрации результатов;
- проверка правильности организации рабочих мест (приема и регистрации материала, приготовления и окраски мазков, микроскопирования); настройки оборудования;
- микроскопирование положительных и отрицательных контрольных образцов;
- своевременность и точность передачи результатов в учреждение, направившее материал для исследования.
При окраске мазков не следует помещать на штатив («рельсы») и окрашивать одновременно более 12 стекол. Соприкосновение стекол боковыми краями может привести к переносу краски и микобактерий с одного стекла на соседние.
В число исследуемых мазков, подлежащих окрашиванию, необходимо ежедневно включать контрольные неокрашенные заведомо положительные и отрицательные мазки. В начале микроскопируют контрольные мазки, затем – мазки от больных.
В процессе окраски мазков при их промывании следует пользоваться дистиллированной водой, не следует пользоваться резиновыми трубками и наконечниками. В окружающей среде и водопроводной воде может находиться большое количество кислотоустойчивых сапрофитов, которые легко размножаются на резиновых поверхностях в условиях повышенной влажности. Они могут попасть на препарат и обусловить ложноположительные результаты анализа.
Окрашенные для исследования мазки непригодны, если при окраске карболовым фуксином:
- в положительном контрольном мазке микобактерии не окрасились в красный цвет;
- в отрицательном контрольном мазке после обесцвечивания видны красные клетки;
- не произошло достаточного обесцвечивания фона.
Получение положительных результатов при исследовании нескольких последовательных препаратов требует тщательного анализа, так как в этих случаях может иметь место контаминация препаратов во время их приготовления, окраски или микроскопировании.
По окончании микроскопического исследования необходимо удалить с препарата иммерсионное масло с помощью ксилола, спиртоэфирной смеси или спирта, поместить препараты в отдельные коробки для положительных и отрицательных мазков, где они сохраняются для последующего контроля качества или перепроверки результатов микроскопии.
Не следует очищать стекла слишком энергично, чтобы не повредить препарат и не удалить с него краску.
Необходимо еженедельно и ежемесячно обобщать и анализировать полученные данные для определения процента положительных результатов и, по возможности, определять причины любых резких отклонений от средних показателей. При получении в процессе микроскопии подряд нескольких положительных результатов необходимо внимательно проанализировать причины этого.
Для осуществления внутреннего контроля качества микроскопии в настоящее время рекомендуется систематический отбор мазков, как положительных, так и отрицательных, для повторного исследования вторым лицом, которое не должно знать результаты первого исследования (исследование слепым методом).