Отбор проб для бактериологического исследования
Отбор проб проводят по истечении срока экспозиции, указанного в наставлении по применению каждого конкретного препарата или средства, до начала проветривания помещений; при дезинфекции спецодежды — по окончании цикла обработки (обеззараживания, стирки, ополаскивания и отжима).
Пробы-смывы (отпечатки) или соскобы для исследования берут с 10—20 различных участков поверхности животноводческого помещения (полы, стойла, проходы, стены, перегородки, столбы, кормушки, поилки и др.). При наличии на объекте участков поверхности с механическими загрязнениями пробы материала для исследования берут методом соскобов. При контроле качества дезинфекции других объектов ветеринарного надзора пробы берут с 10—20 различных наименее доступных для дезинфекции участков поверхностей каждого помещения.
Для контроля качества текущей и заключительной дезинфекции при туберкулезе с каждого вида поверхности берут по пять смывов, которые объединяют в одну пробу. Из каждого помещения отбирают не менее 10 объединенных проб, в том числе по три пробы с пола и кормушек.
При заключительной дезинфекции одновременно берут пробы с территории фермы в разных направлениях от углов здания и от центра каждой стены на расстоянии 5,10 и 15 м (с учетом рельефа местности). Всего с прилегающей территории отбирают не менее 24 проб. Поверхностный слой грунта разрыхляют чистым скальпелем или ножом на глубину 3—5 см и отбирают в стерильную посуду 10—20 г исследуемого материала. Если прилегающая территория имеет твердое покрытие, пробы отбирают методом смывов.
Пробы-смывы отбирают стерильными ватно-марлевыми тампонами, смоченными в стерильном нейтрализующем растворе или воде после проведения дезинфекции и последующей экспозиции с участков, подвергаемых контролю. Участки площадью 10x10 см тщательно протирают до полного снятия с поверхности всех имеющихся на ней загрязнений, после чего тампоны помещают в пробирку с нейтрализующей жидкостью. Плотные загрязнения (корочки) снимают с помощью стерильного скальпеля и переносят в эту же пробирку.
Ватные или марлевые тампоны для взятия смывов монтируют на алюминиевой проволоке (или деревянном стержне), пропущенном через резиновую пробку. В пробирки разливают по 10 мл физиологического раствора, закрывают резиновыми пробками с вмонтированными тампонами и автоклавируют при 133,3 Па (1 атм) в течение 30 мин.
Пробы-отпечатки с нанесенной на предметное стекло тонким слоем плотной питательной среды отбирают путем накладывания их на исследуемый объект таким образом, чтобы питательная среда соприкасалась с его поверхностью. Через 2 мин пробы-отпечатки отделяют от контролируемого объекта и помещают в ванны или пробирки, в которых их транспортировали. При взятии проб с труднодоступных или вертикальных поверхностей время контакта слоя питательной среды с объектом сокращается до 30с.
Для нейтрализации хлорактивных препаратов используют раствор тиосульфата натрия (можно гипосульфит); препаратов на основе гид-роксида натрия, гидроксида калия, кальцинированной соды и других щелочных препаратов — уксусную кислоту; формалина, параформа и других формальдегидсодержащих средств — аммиак; препаратов на основе глутарового альдегида — пиросульфит натрия; препаратов на
Основе пероксида водорода и органических кислот – бикарбонат натрия; препаратов из группы четвертичных соединений аммония — алкилсульфат, алкилсульфонат. Концентрация растворов нейтрализаторов должна быть в 10 раз меньше, чем дезинфицирующего препарата.
При использовании для дезинфекции щелочного раствора формальдегида участки сначала увлажняют раствором аммиака, затем дополнительно раствором уксусной кислоты.
При дезинфекции препаратами, для которых нет нейтрализаторов, применяют стерильную водопроводную воду или инактивирующую практически все классы дезинфицирующих препаратов смесь, состоящую из 3 % твина-80 и 0,1 % концентраций сапонина, цистеина и гистидина.
Нейтрализующие растворы готовят в концентрации в 10 раз меньше, чем концентрация использованного дезинфицирующего средства. Раствор делают на стерильной воде в стерильной посуде и разливают в пробирки-или флаконы с соблюдением правил стерильности (растворы уксусной кислоты и бикарбоната натрия можно стерилизовать автокла-вированием). Раствор аммиака стерилизации не подлежит. Готовые пробирки (флаконы) можно хранить в течение пяти дней при комнатной температуре.
Пробы-смывы должны быть доставлены в лабораторию в течение 3—6 ч с момента взятия, пробы-отпечатки — не позднее 2 ч.