Ориентировочная основа деятельности студентов (ООД) для проведения лабораторной работы: Количественное определение витамина С в продуктах растительного происхождения
Принцип метода: Метод основан на способности витамина С (аскорбиновой кислоты) восстанавливать 2,6 дихлорфенолиндофенол, который в кислой среде имеет красную окраску, а при восстановлении обесцвечивается; в щелочной среде окраска синяя. Для предохранения витамина С от разрушения исследуемый раствор титруют в кислой среде щелочным раствором 2,6–дихлорфенолиндофенола до появления розового окрашивания. Для расчета содержания аскорбиновой кислоты в экстракте из растительных продуктов используют формулу:
Х = ( 0,088 × А × 100 ) : Б
Х – содержание аскорбиновой кислоты в мг на 100 г продукта
0,088 – содержание аскорбиновой кислоты, соответствующее 1 мл 0,001 н
раствора натриевой соли 2,6–дихлорфенолиндофенола, мг
А – результат титрования 0,001н раствором 2,6–дихлорфенолиндофенола, мл
Б - количество продукта, взятое для анализа, г
100 – пересчет на 100 г продукта
Порядок выполнения работы:
1). Получение экстракта из растительного продукта.
Отвешивают на аптекарских весах навеску продукта (1 г, 3 г), навеску растирают в ступке с 20 каплями 10% раствора Hcl. Постепенно приливают дистиллированную воду (15 мл), перемешивают и сливают экстракт в стакан (колбу) для титрования. Ступку и пестик ополаскивают 5 мл воды и также сливают содержимое в стакан (колбу).
2). Экстракт титруют из бюретки 0,001 н раствором 2,6–дихлорфенолиндофенола до появления розовой окраски (или изменения окраски), сохраняющейся в течение 30 с.
Количество раствора 2,6–дихлорфенолиндофенола, пошедшего на титрование и количество продукта, взятого для получения экстракта, вносится в формулу для расчета содержания витамина С. Полученные данные сопоставить с нормативными показателями и сделать вывод.
Клинико-диагностическое значение. Потребность в витамине С у человека составляет 50-100 мг/сут. Количество витамина С, выделяемое с мочой, зависит от потребности в нем организма, возраста, способности слизистой кишечника к всасыванию и др. В среднем, здоровый человек за сутки выделяет 20-40 мг витамина С. При гиповитаминозе, острых и хронических инфекционных заболеваниях уровень витамина С в моче снижается; при цинге – экскреция ниже 10 мг/сут.
Содержание витамина С в некоторых пищевых продуктах
| Продукт | Содержание витамина мг/100 г | Продукт | Содержание витамина мг/100 г |
| Плоды шиповника | Апельсины | ||
| Облепиха | Яблоки | 10-30 | |
| Смородина черная | Картофель свежий | 10-25 | |
| Рябина | Томаты | ||
| Перец красный | Молоко | ||
| Хвоя | Говядина | 0,9 | |
| Лимоны |
Задания для СРС во внеучебное время:
I. Заполнить таблицу(использовать материалы учебника, лекции)
| Витамины | Кофермент | Участие в метаболизме | Суточная потребность | Источники | Проявление недостаточности |
| В1 (тиамин) | |||||
| В2 (рибофлавин) | |||||
| В6 (пиридоксин) | |||||
| РР ( никотинамид) | |||||
| В5 (пантотеновая к-та) | |||||
| В9 (фолиевая кислота) | |||||
| В12 (кобаламин) | |||||
| С (аскорбиновая к-та) | |||||
| А(ретинол) | |||||
| Д3 (холекальциферол) | |||||
| Е(токоферол) | |||||
| К(филлохинон) |
Задания для самоконтроля подготовки к практическому занятию :
1. Витамин В2 является составной частью кофермента:
а) ПФ б) ТДФ в) биотина г) Ко-А д) ФАД
2. Недостаток витамина В1 приводит к снижению интенсивности
а) окислительного декарбоксилирования пирувата
б) орнитинового цикла
в) анаэробного гликолиза
г) β - окисления жирных кислот
д) трансаминирования аминокислот
3. Структурным компонентом кофермента А (HS-КоА) является
а) фолиевая кислота б) пантотеновая кислота
в) аскорбиновая кислота г) никотиновая кислота
4. В структурировании флавиновых коферментов (ФАД, ФМН) принимает
участие витамин
а) В1 б) В2 в) В6 г) В12 д) РР
5. Какой витамин входит в состав коферментов НАД, НАДФ?
а) В1 б) РР в) В6 г) В12 д) В9
6. Укажите суточную потребность в витамине С
а) 10 – 20 мг/сут б) 1 – 2,5 мг/сут
в) 50 –100 мг/сут г) 18 – 25 мг/сут
7. Водорастворимые витамины являются предшественниками
а) сложных белков б) коферментов
в) макроэргических соединений г) фосфолипидов
8. Суточное выделение витамина С с мочой составляет
а) 2 - 5 мг /сут б) 10 – 20 мг/сут
в) 20 – 30 мг/сут г) 50 – 100 мг/сут
9. Антиоксидантными свойствами обладают витамины
а) В1,В2, РР б) В6, В9, В12 в) Д2 , Д3 г) Е, С, Р
10. При недостатке витамина РР снижается скорость процессов
а) декарбоксилирования аминокислот б) цикла мочевинообразования
в) синтеза гликогена г) β - окисления жирных кислот
д) трансаминирования аминокислот
11. Из перечисленных витаминов микрофлорой кишечника синтезируется
а) В2 б) Р в) К г) РР д) С
12. Витамин РР может синтезироваться из незаменимой аминокислоты
а) фенилаланина б) изолейцина в) метионина г) триптофана
13. Признаком авитаминоза В1 является
а) нарушение проницаемости капилляров б) дерматит
в) деменция г) нарушение сумеречного зрения д) полиневрит
14. В реакциях дегидрирования (отщепления протонов и электронов от субстрата)
принимает участие витамин
а) РР б) В6 в) В12 г) А д) В9
15. Биологическая роль аскорбиновой кислоты обусловлена ее участием в реакциях
а) декарбоксилирования б) карбоксилирования
в) гидролиза г) трансаминирования
д) окисления-восстановления
16. Основным признаком недостаточности витаминов С и Р является
а) поражение периферической нервной системы б) остеомаляция, задержка роста
в) появление точечных кровоизлияний г) дерматит, деменция, диарея
д) повышение свертываемости крови
17. Всасыванию β - каротина способствуют
а) углеводы б) жиры в) белки д) микроэлементы
18. Витамин К участвует в синтезе
а) гликозаминогликанов б) коллагена
в) гликогена г) кальцийсвязывающих белков крови
19. Выберите правильные ответы. При авитаминозе А нарушается
а) синтез белковых факторов свертывания крови
б) синтез компонентов соединительной ткани
в) процессы световосприятия
г) кальциево-фосфорный обмен
20. Выберите правильные ответы. Источники витамина Е для человека
а) крупы, злаки б) печень
в) животные жиры г) растительные масла д) цитрусовые
Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время:
1. Назовите основные эндо- и экзогенные причины гипо- и авитаминозов.
2. Перечислите витамины, которые синтезируются микрофлорой кишечника.
3. Перечислите витамины, обеспечивающие процессы анаболизма.
4. От каких витаминов зависит энергообеспечение организма?
5. Функции, каких витаминов связаны с белковым обменом?
6. Укажите витамины, обеспечивающие обмен углеводов.
7. Какие витамины участвуют в обмене липидов?
8. С какими витаминами связаны функции нервной ткани, сердечной мышцы?
9. С какими витаминами связаны реакции детоксикации?
10. Какие витамины являются антиоксидантами?
11. Приведите примеры антивитаминов и объясните механизм их действия.
12. Перечислите факторы, способствующие окислению и разрушению витамина С.
13. Объясните причину кровоточивости десен при недостаточности витамина С.
14. Приведите примеры соединений, являющихся провитамином А.