по теме 2.9. «Патогенные возбудители воздушно-капельных
Методические указания
бактериальных инфекций»
Тема 2.9.4: «Микобактерии туберкулеза»
1. Таксономия:
Отдел Firmicutes, семейство Mycobacteriaceae,
род Mycobacterium включает более 100 видов патогенных,
условно-патогенных и непатогенных микобактерий.
Возбудителями туберкулеза человека являются следующие виды микобактерий:
· M.tuberculosis – человеческий вид
· M.bovis бычий вид
· M.africanum – африканский вид
Наряду с ними, ряд видов может вызвать поражение легких, лимфоузлов и других органов:
ü M.intracellularae
ü M.avium – птичий вид
ü M.acrofulaceum
ü M.kansasii
ü M.fortuitum
2. M.tuberculosis, M.bovis, M.africanumвызывают у человека туберкулез – хроническую инфекцию, которая в зависимости от входных ворот инфекции и локализации возбудителя в организме имеет различные клинические формы: туберкулез легких, кишечника, почек, костей, кожи, твердых мозговых оболочек, глаз, суставов и других органов.
3. Материал для исследования:мокрота, ликвор, промывные воды бронхов, желудка, экссудат, отделяемое ран, моча, гной, биопсийный и секционный материал и др.
4. Элективные питательные среды и характер роста:
M.tuberculosis растут только на специальных яичных и полусинтетических жидких средах, содержащих набор солей и аминокислот, необходимых для их жизнедеятельности. Элективными для БК являются: свернутая сыворотка, 2-3% глицериновый агар, глицериново-картофельная среда, 4-5% глице-риновый бульон, яичные среды – Петрова, Петраньяни, Дерсе, Гельберга, Виноградова, Левенштейна-Йенсена, Финна, Мордовского и др.
На плотных элективных средах - M.tuberculosisобразуют шероховатые R-формы колонии, возвышающиеся, плотные, с утолщенной или морщинистой поверхностью, с тонкими неровными краями, кремового цвета; или сухие налеты (сливающиеся между собой гладкие S-формы колоний) кремоватого (слабо-желтого) цвета.
Первичный рост появляется на 21-45-60ый день, а пассажные культуры растут быстрее – на 10-14-21ыйдень.
ВОЗ рекомендовала в качестве стандартной использовать среду Левенштейна-Йенсена, т.к. на ней первичный рост появляется через 20-25 дней.
На среде Финна II рост БК появляется на несколько дней раньше, чем на среде Левенштейна-Йенсена, а процент выделения БК на 6-8% выше, чем на среде Левенштейна-Йенсена.
На жидких средах (4-5% глицериновый бульон) БК через 10-15 дней образуют тонкую нежную пленку, которая постепенно утолщается, сморщивается, становится ломкой, приобретает морщинисто-бугристый вид кремовый цвет, а бульон остается прозрачным; пленка по мере роста ползет вверх по стенкам пробирки, частично осаждаясь на дно.
M.bovis - растут на яичных средах без глицерина и дают первичный рост на 30-45-60ый день в виде мелких, гладких, влажных колоний S-формы или R-формы, серого или белого цвета.
M.avium –на яичных средах растут в видеколоний S-формы кремового (или желтого) цвета или в виде приподнимающихся над поверхностью среды «лепешек», или в виде «бубликов».
Рост появляется к концу 1ого месяца, иногда позднее; при пересевах – к 7-10 дню. В жидкой среде дают помутнение.
5. Методы лабораторной диагностики:
1. Бактериологический – основной
2. Микроскопический
3. Биологический
4. Кожно-аллергический
5. Серологический
6. ПЦР - диагностика
6. Тесты идентификации микобактерий:
1. Изучают культуральные свойства выделенной культуры, т.е. характер роста на плотных и жидких элективных средах.
2. Проводят определение содержания ниацина – ниациновый тест (он положительный только у человеческого типа).
3. Определяют никотинамидазную активность.
4. Определяют нитратредуктазную активность (восстановление нитратов).
5. Определяют корд-фактор.
6. Биопроба: определяют вирулентность выделенной культуры на морских свинках и кроликах.
7. Определяют чувствительность выделенной культуры к противотуберку-лезным препаратам методом разведений (абсолютных концентраций) на плотных средах.
7. Средства специфической терапии:
- противотуберкулезные препараты I ряда: изониазиды, стрептомицин, этамбутол, пиразинамид, рифампицин;
- противотуберкулезные препараты II ряда: канамицин, циклосерин, тиоацетазон (тибон), этоксид, этионамид.
Средства специфической профилактики:
-живая вакцина БЦЖ –BCG (Bacille Calmette – Guerin – бациллы Кальметта-Герена);
- живая вакцина БЦЖ-М (щадящая).