Підготовка матеріалів та інструментів, що використовуються при штучному осіменінні сільськогосподарських тварин
Приготування 0,9 % розчину натрію хлориду. У чисту хімічну колбу наливають 100 мл дистильованої води, відважують і вносять в колбу 0,9 г хімічно. чистого натрію хлориду або беруть одну таблетку його масою 0,9 г і розмішують стерильно скляною паличкою до повного розчинення. Доводять розчин до кипіння, після охолодження розливають в стерильні баночки № 1, № 3, № 4 і закривають притертими кришками.
Розчин готують щодня і використовують для промивання посуду та інструментів після стерилізації їх кип'ятінням, видалення залишків спирту з шприців-катетерів та спермоприймачів, зволоження піхвових дзеркал перед введенням у піхву.
Приготування 2,9 % розчину натрію цитрату. У чисту стерильну колбу наливають 100 мл прокип'яченої і охолодженої до 80°С дистильованої води, відважують 2,9 г хімічно чистого тризаміщеного п’яти водневого натрію цитрату, всипають у колбу і старанно розмішують стерильною скляною паличкою. Фільтрують крізь тонкий ватний або паперовий фільтр у стерильну колбу, закривають нещільно ватно-марлевим тампоном і кип'ятять протягом 5-10 хв або витримують 30 хв в автоклаві при температурі 108°С і тиску 0,4 атм. Розчин слід готувати щодня. Натрію цитрат має слабколужну реакцію і буферні властивості, він нетоксичний для сперміїв, нейтралізує молочну кислоту, яка нагромаджується у спермі. Його використовують при оцінці якості сперми, обробці інструментів та розморожуванні замороженої сперми.
Приготування 1 % розчину натрію бікарбонату. Відважують 1 г натрію бікарбонату і висипають у стерильну скляну колбу. Відмірюють градуйованим циліндром 100 мл прокип'яченої і охолодженої до 40-45°С дистильованої води (при температурі вище 60°С натрію бікарбонат розкладається з виділенням вуглекислого газу і перетворюється на токсичний для сперміїв натрію карбонат)
Вливають воду в колбу з наважкою натрію бікарбонату і розмішують стерильною паличкою до повного розчинення. Закривають корком.
Розчин натрію бікарбонату також має властивості буфера і слаболужну реакцію, тому його використовують для підлуговування сперми та нейтралізації молочної кислоти. Оскільки він нетоксичний для сперміїв, його широко використовують для обробки інструментів та посуду у племоб'єднаннях, на станціях і пунктах штучного осіменіння. Готують розчин щодня і застосовують для обробки спермоприймачів, видалення залишків спирту та води з шприців-катетерів, при оцінці якості сперми, для зволоження піхвових дзеркал.
Приготування розчину соди. Відважують 20-30 г вуглекислої чи двовуглекислої або 10-15 г кальцинованої соди і розчиняють у гарячій воді. Розчин використовують для миття посуду» клейонок, штучних вагін, піхвових дзеркал, різних інструментів, термосів, посудин Дьюара і т. ін. Вимиті в содовому розчині посуд та інструменти обов'язково споліскують чистою гарячою водою.
Приготування 70 % спирту. Готують його з 96 % чи 95 % спирту-ректифікату. Наливають у 500-мілілітровий циліндр спирт-ректифікат, обережно занурюють у нього спиртометр і по верхньому меніску визначають його міцність. За нижче наведеною формулою визначають, скільки такого спирту треба взяти для одержання 100 мл 70 %:
Х=(70 × 100) : М,
де X – кількість спирту-ректифікату, мл; М – міцність спирту-ректифікату, град. Якщо спирт 96 %, то Х= (70 х 100) : 96 = 72,9 мл, або закруглено 73 мл. До 73 мл 96 % спирту доливають 27 мл прокип'яченої дистильованої води. Міцність розведеного водою спирту перевіряють спиртоміром, який повинен плавати, не торкаючись дна циліндра. Якщо вона нижче 70 %, то, не виймаючи спиртомір, доливають ще спирту до позначки на спиртомірі 70. Якщо міцність спирту вища, доливають необхідну кількість води. 70 % спирт використовують для знезаражування шприців-катетерів, мікрошприців, спермоприймачів, баночок та інших предметів. Він викликає слабшу коагуляцію білка, ніж 96 % спирт, тому глибше проникає в протоплазму клітин і швидше спричиняє їх загибель.
Приготування розчину 0,02 % фурациліну та 0,01 % фуразолідону. Ці лікарські препарати погано розчиняються у воді (фурацилін у співвідношенні 1:5000, фуразолідон 1:10000), тому їх готують на 0,9 % розчині натрію хлориду.
Приготування 3 % розчину перекису водню. Робочий розчин перекису водню готують з 30 % водного розчину пергідролю або з таблеток гідропериту, які містять 30-35 % перекису водню. Відмірюють 10 мл 30 % розчину пергідролю і додають до нього 90 мл кип'яченої води або розчиняють 6 пігулок гідропериту масою 1,5 г у 100 мл води. Розчин використовують для промивання препуція у плідників, дезінфекції і дезодорації. Кисень, що виділяється при цьому, а також піна сприяють механічному очищенню від бруду та мікробів.
Приготування розчину хромової суміші (хромпіку). Розчиняють 6 г калію хромату у 1 л дистильованої води і обережно додають 100 мл міцної сірчаної кислоти для витримування у ній протягом 24 год сильно забрудненого жовтком та спермою посуду, після чого його промивають кілька разів проточною та дистильованою водою і висушують.
Приготування паперових фільтрів. (їх використовують для фільтрування розчинів). Розрізають ножицями аркуш фільтрувального паперу на частини (відповідно до розміру наявної лійки). Для цього складають його по діагоналях так, щоб утворився трикутник, розгортають один шар паперу малого трикутника і вставляють фільтр у стерильну скляну лійку. Обрізають зайві краї фільтра так, щоб після вкладання його в лійку краї його були на 0,5 см нижче краю лійки.
Виготовлення ватно-спиртових тампонів. Беруть клаптик гігроскопічної вати, розділяють його на тонкі шари і, підгинаючи краї, роблять круглі плоскі тампони діаметром 6-7 см для знезараження великих предметів (наприклад, штучної вагіни для жеребця), 5-6 см – для бугая і кнура та 3–4 см – для барана. Складають їх на перевернуту кришку тампонниці і заливають 96 % спиртом. Потім виймають тампони, ущільнюють їх дном циліндра, мензурки чи просто відтискають між долонями, відокремлюють один від одного, складають у тампонницю і закривають кришкою. Залишки спирту зливають у банку для відпрацьованого спирту.
Такі тампони використовують для знезараження штучних вагін, спермоприймачів, зовнішньої поверхні шприців-катетерів, термометрів, скляних паличок, пінцетів, піхвових дзеркал, яєчної шкаралупи, рук і т. ін.
Виготовлення марлевих серветок. Розрізають чисту марлю на шматки розміром 20 х 20, 30 х 30, 40 х 40 см, прасують гарячою праскою, складають учетверо і вміщують у стерильну скляну банку з притертою кришкою. Можна також стерилізувати серветки сухим жаром. Використовують їх для загортання стерильних інструментів, видалення з них крапель води, протирання предметних та накривних скелець тощо.
Стерилізація вазеліну. Накладають у скляну банку вазеліну і накривають її кришкою у нахиленому положенні. На дно стерилізатора чи каструлі вмішують ватну або марлеву прокладку, ставлять на неї банку з вазеліном і заливають водою так, щоб рівень води був не нижче рівня вазеліну в банці. Воду доводять до кипіння і кип'ятять 20-30 хв. Виймають банку із стерилізатора і закривають кришкою після її остигання.
Вазелін стерилізують щодня й використовують переважно для змащування штучних вагін. Та оскільки він пошкоджує гумові камери штучних вагін, його останнім часом не використовують для їх змащування. Для цього найчастіше користуються розріджувачами сперми.
Стерилізація посуду та інструментів сухим жаром. Чисті й сухі скляні банки, колби, мензурки, флакони, посуд для розрідження сперми, скляні ампули, палички, піпетки, шприци-катетери в розібраному вигляді загортають у папір, складають у сушильну шафу на металеві решітки, яку вмикають в електромережу. При температурі 130-180°С стерилізують протягом 15-30 хв. Виймають простерилізований посуд та інструменти лише після охолодження шафи.
Стерилізація шприца – катетера кип’ятінням. Відмивши старанно шприц – катетер теплим розчином двовуглекислої соди, і сполоснувши тричі дистильованою водою, розбирають його (знімають поршень), загортають циліндр у марлю і прикріплюють до нього поршень. Кладуть їх у великий стерилізатор, дно якого вистелене шаром вати чи марлі, заливають теплою дистильованою або кип’яченою водою, накривають кришкою, воду доводять до кипіння і кип’ятять 15-20 хв. Коли вода трохи охолоне, стерильним пінцетом виймають із стерилізатора частини шприца, струшують їх від води і кладуть на кришку стерилізатора. Після охолодження шприци складають, видаляють з них воду, промиваючи 3-4 рази 1 % розчином натрію бікарбонату, 0,9 % розчином натрію хлориду або 2,9 % розчином натрію цитрату. Загортають шприци в стерильний папір або марлеву серветку, кладуть на підставку і накривають марлевою серветкою.
Стерилізація автоклавуванням. Застосовують для знезараження чистих штучних вагін (протягом 20 хв. під тиском 0,3-0,5 атм. при температурі 1050С), металевих інструментів та посуди (під тиском 1,5 атм. протягом 30-45хв.)
Стерилізація фламбуванням. Чисто вимиті й сухі піхвові дзеркала, скляні спермоприймачі, 100-мілілітрові широкогорлі баночки, скляні палички, ножиці, пінцети, підставки для інструментів проводять кілька разів над не кіптявим полум’ям спиртової або газової горілки, примусу чи палаючого спиртового тампона ( просоченого 96% спиртом).
Знезараження спиртом. Шприци-катетери та спермоприймачі можна промивати 70 % спиртом-ректифікатом з наступним 5-6 - разовим споліскуванням 1 % розчином натрію гідрокарбонату, 2,9 % розчином натрію цитрату чи 0,9 % розчином натрію хлориду. Пінцети, скляні палички, термометри можна знезаражувати протиранням тампонами, що просочені 96 % спиртом.
Ультрафіолетове опромінення. Застосовують для знезаражування поліетиленових інструментів та матеріалів.
Контрольні питання :
1. Які фізіологічні розчини застосовують для штучного осіменіння тварин?
2. Як готовлять фізіологічні розчини?
3. Порядок приготування дезінфікуючих розчинів?
4. Методи стерилізації матеріалів, інструментів та обладнання для штучного осіменіння тварин?
ТЕМА 2