ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА СИФИЛИСА

Сифилис - инфекционная болезнь, характеризующуюся первичным аффектом (твердый шанкр), высыпаниями на коже и слизистых оболочках с последующим поражением различных органов и систем. Заражение происходит половым путем, реже контактно-бытовым, трансплацентарным путями и через кровь. Заболевания протекают циклически: первичный сифилис, вторичный, третичный. Без лечения может наступить четвертичный сифилис. Иммунитет после перенесенной болезни не развивается.

Бактериоскопический метод Исследуемый материал: - отделяемое твердого шанкра, пунктаты лимфатических узлов, материал из высыпаний кожного покрова

Типы микроскопических препаратов и методы окраски:

1) Микроскопия раздавленной капли в темном поле; 2) Иммунофлюоресценция (РИФ) мазка, окрашенного иммунной антитрепонемной сывороткой, меченной флюорохромом. ; 3) Импрегнация серебром по Морозову; 4) Окраска по Романовскому- Гимзе.

Серодиагностика сифилиса

Цели постановки отдельных серологических реакций при сифилисе

Используемые реакции Цель
1. Скрининг (отборочные) 2. Подтверждающие (диагностические) 3. Контроль эффективности терапии
Реакция микропреципитации ИФА, РПГА, реже РИФ с тканевым штаммом T.pallidum (непрямой метод), и РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем) для выявления антител РПГА с трепонемным эритроцитарным диагностикумом.),

Скрининг (отборочные реакции)

Обследуемые лица доноры, декретируемый контингент -лица подлежащие обязательному обследованию: медицинские работники, работники питания, детских дошкольных учреждений

Реакция микропреципитации

Исследуемый материал сыворотка крови

Диагностический препарат кардиолипиновый антиген – (вытяжка из из сердечной мышцы быка)

Варианты постановки качественный и количественный методы

Подтверждающие (диагностические) реакции

Реакция иммобилизации трепонем (РИБТ)

Исследуемый материал сыворотка крови

Диагностический препарат живые Treponema pallidum (культивируемые в яичках кролика)

Дополнительные ингредиенты комплемент

Принцип метода: при наличии антител в сыворотке крови пациента в присутствии комплемента происходит обездвиживание- иммобилизация трепонем

Оценка результатов производится по препарату "раздавленной" капли. Темнопольной микроскопией определяют процентное соотношение обездвиженных и подвижных трепонем. При иммобилизации от 0 до 20% реакция считается отрицательной; от 21 до 50% - слабоположительной; от 51 до 100% - положительной.

 

Реакция иммунного прилипания (РИП)

Исследуемый материал: сыворотка крови

Диагностический препарат убитые Treponema pallidum

Дополнительные ингредиенты комплемент, эритроциты I (0) группы крови человека

Принцип метода: при наличии антител в сыворотке крови пациента в присутствии комплемента происходит прилипание трепонем к эритроцитам т выпадение их в осадок

РИФ (непрямая) для определения антител

Исследуемый материал: сыворотка крови

Диагностический препарат убитые Treponema pallidum

Дополнительные ингредиенты иммунная ( антитела) сыворотка против Y глобулинов человека, меченая флюорохромом

Принцип метода: при наличии антител в сыворотке крови пациента они связываются с Treponema pallidum, с ними сязываются меченые флюорохромом антитела против Y глобулинов человека в ультрфиолете наблюдаем свечение Treponema pallidum

Реакция Вассермана

Тип реакции Реакция связывания комплемента Исследуемый материал сыворотка крови

Диагностические препараты:

1.Антигены: а) Кардиолипиновый Аг (КЛАГ) неспецифический антиген

б) Ультраозвученный трепонемный Аг ( ТАГ) специфический антиген

Другие ингредиенты реакции: 2. комлемент 3. гемолитическая система: эритроциты барана и атиэритроцитарная гемолитическая сыворотка 4.физиологический раствор

 

антиген испытуемая сыворотка контроли
положительная сыворотка слабоположительная сыворотка отрицательная сыворотка
КЛАГ
ТАГ
Физ. р-р

Результат: Реакция Вассермана положительная, у обследуемого (больного) сифилис