Методические указания к изучению гистологических препаратов.

6.1.1. Гипофиз. Окраска – гематоксилином и эозином.

При малом увеличении найти основные части органа: окрашенный более интенсивноаденогипофиз, в состав которого входят передняя доля(I) и средняя доля(II). Задняя доля – нейрогипофиз (III)выглядит на препарате более светлой. Через ножку гипофиза срез проходит крайне редко, поэтому туберальная часть аденогипофиза, прилежащая к ней, обычно не видна на препаратах.

Найти соединительно-тканную капсулу (1). Рассмотреть переднюю долю гипофиза при большом увеличении. Найти в эпителиальных тяжах мелкие клетки с оксифильной цитоплазмой - ацидофильные эндокриноциты (2): соматотропоциты и маммотропоциты(при данной окраске и уровне микроскопии различий между ними не наблюдается, зернистость также не определяется). Дифференцировка двух видов (более крупных размеров) базофильных эндокриноцитов (3) основана на наличии в цитоплазме светлого пятнышка, называемого макула (4), у гонадотропоцитов (3а) и отсутствии его у тиротропоцитов (3б).Цитоплазма мелких хромофобных эндокриноцитов (5), плохо воспринимает кислые и основные красители. Среди них есть: стволовые клетки, адренокортикотропоциты (со слабо базофильной цитоплазмой) и хромофильные эндокриноциты (ацидо- или базофильные), выделившие свои гранулы в кровь.

В промежуточной доле эндокриноциты лежат скоплениями, местами формируя фолликулы, содержащие коллоид (6). Среди эндокринных клеток этой части гипофиза есть адренокортикотропоциты, меланотропоциты и липотропоциты, вырабатывающие соответствующие гормоны, а морфологически близкие хромофобным клеткам.

Нейрогипофиз представлен видоизмененными глиальными клетками–питуицитами (7), имеющимиотростчатую формус плотными каплевидной формы ядрами; нервными и соединительно-тканными волокнами (8) –при данной окраске они не дифференцируются друг от друга;клетками волокнистой соединительной ткани. Большое количество синусоидных капилляров(9) –(фенестрированного типа)– характерно для всех частей гипофиза (это является типичным для эндокринных органов).

При малом увеличении микроскопа нарисовать контуры гипофиза, обозначить его части, затем при большом увеличении нарисовать участок, где контактируют передняя, средняя доли аденогипофиза и нейрогипофиз. Сделать все обозначения. Особо выделить клетки передней доли и их функции (вырабатываемые гормоны), а также гормоны средней доли гипофиза.

 

6.1.2. Надпочечник. Окраска – гематоксилин и эозин.

При малом увеличении найдите соединительно-тканную капсулу (1), корковое вещество (I) и мозговое вещество(II)органа. Мозговое вещество находится в центре среза органа и имеет базофильную окраску. Корковое вещество, окружающее мозговое, образовано тяжами клеток – адренокортикоцитов (2)– с оксифильной цитоплазмой и светлыми округлыми ядрами (в них заметны ядрышки). Эпителиальные тяжи направлены радиально от капсулы к мозговому веществу. По характеру взаиморасположения адренокортикоцитов в коре надпочечника выделяют три зоны: наружную (под капсулой) – клубочковую зону (3), где адренокортикоциты образуют скопления в виде клубочков или арок; среднюю – пучковую зону (4),имеющую вид параллельно идущих тяжей, и внутреннюю – сетчатую зону (5), в которой тяжи, анастомозируя, образуя сеть. Наиболее крупные адренокортикоциты – в пучковой зоне. Обратите внимание на вакуолизированность их цитоплазмы, связанную с содержанием большого количества липидных включений (растворившихся органическими растворителями при приготовлении препарата). Между тяжами адренокортикоцитов (и вокруг «клубочков») проходят синусоидные капилляры (в сетчатой зоне они имеют более широкий диаметр), определяемые по плотным уплощенным ядрам эндотелиоцитов – (6).

Мозговое вещество образовано тяжами и скоплениями крупных нейроэндокринных хромаффинных клеток (7) –названиеклеток связано с появлением в цитоплазме бурого цвета гранул при окраске раствором бихромата калия. Приокраске гематоксилином и эозином их цитоплазма базофильна и зерниста. Для мозгового вещества характерны более широкие по диаметру кровеносные сосуды, чем в корковом веществе.

При малом увеличении зарисуйте сегмент надпочечника, захватывающий корковое и мозговое вещество. Используя малое увеличение, врисуйте в сегмент контуры коркового вещества (и его зон), мозгового вещества, а при большом увеличении найдите и зарисуйте остальные элементы строения органа. Сделайте обозначения. Отметьте функции (вырабатываемые гормоны) адренокортикоцитов всех зон коры и хромаффинных клеток мозгового вещества надпочечника.

 

6.1.3. Щитовидная железа. Окраска – гематоксилином и эозином.

При малом увеличении микроскопа найти структурные элементы стромы органа: соединительно-тканную капсулу (1) и отходящие от неё трабекулы (2), в которых расположены артерии (3) и вены (4) Структурно-функциональной единицей паренхимы органа является тиреоидный фолликул (5). Фолликулы многочисленны (заполняют все пространство между капсулой и трабекулами) и имеют разные размеры. При большом увеличении микроскопа можно рассмотреть, что стенка каждого фолликула представлена одним слоем эпителиальных эндокриноцитов – тироцитов (6). При высокой функциональной активности они призматической формы, при низкой – плоской, при средней – кубической. Полость фолликулов заполнена оксифильно окрашенным коллоидом – тироглобулином (7). На периферии коллоида видны прозрачные полости - зоны резорбции (8).Фолликулы окруженысинусоидными капиллярами (9), выстланными эндотелиоцитами (10).Группы клеток, встречающиеся между фолликулами, могут быть результатом касательного среза фолликула, а также скоплением лимфоцитов. Парафолликулярные нейроэндокринные клетки при данной окраске не определяются (их можно увидеть при окраске нитратом серебра, 4-х окисью осмия).

Сделать рисунок, включающий фрагмент органа: капсулу, трабекулу с сосудами и несколько фолликулов при большом увеличении, сделать все обозначения. Отметить функции (вырабатываемые гормоны). тироцитов и парафолликулярных клеток

 

6.1.4. Околощитовидная железа.Окраска гематоксилином и эозином.

При малом увеличении микроскопа найдитесоединительно-тканную капсулу железы (1), от которой вглубь отходят тонкие прослойки соединительной ткани. Основная масса железы представлена скоплениями или тяжами эпителиальных эндокринных клеток – паратироцитов (2). Рассмотрите их при большом увеличении микроскопа. Среди них найдите главные паратироциты (2а), имеющие светлую базофильную окраску цитоплазмы, и оксифильные паратироциты (2б),имеющие более крупные размеры и ярко окрашенную эозином цитоплазму (часто встречаются на периферии органа под капсулой). Обратите внимание на большое количество синусоидных капилляров (3), расположенных между эндокриноцитами.

Зарисуйте фрагмент железы с соединительно-тканной капсулой при большом увеличении, сделайте обозначения, отметьте функцию паратироцитов.

Схемы и таблицы к занятию

Иерархия органов эндокринной системы: Центральные органы: гипоталамус, гипофиз, эпифиз Периферические органы: Аденогипофиззависимые – щитовидная железа, гонады, кора надпочечников. Аденогипофизнезависимые – околощитовидная, мозговое вещество надпочечников, поджелудочная железа и др.  
Гормоны – определение высокоактивные вещества, вырабатываемые специализированными клетками, выделяемые во внутреннюю среду организма и оказывающие регулирующее влияние на основные функции организма.
Классификация гормонов по химической структуре: 1. Белки и полипептиды (инсулин, гормон роста и др.) Олигопептиды (нейрогормоны – окситоцин, вазопрессин и др.) 2. Производные одной аминокислоты (адреналин, тироксин, мелатонин и др.) 3. Стероиды (тестостерон, альдостерон и др.)  
Клетки-мишени– клетки, которые имеют специфические рецепторы к соответствующему гормону. Рецепторы могут локализоваться: · в цитолемме клетки-мишени (рецепторы адреналина, белковых гормонов), в этом случае эффект проявляется в течение нескольких минут · в цитоплазме или ядре клетки-мишени (рецепторы тироксина, стероидных гормонов), в этом случае эффект отсроченный.
Источники развития Гипоталамус – нервная трубка Гипофиз: эктодерма (эпителий крыши ротовой полости) -передняя и средняя доли; нервная трубка (дно III желудочка)–нейрогипофиз (задняя доля); мезенхима Щитовидная железа: эпителий вентральной стенки глотки на уровне 1-2 пар жаберных карманов – тироциты; нервный гребень – кальцитониноциты (парафолликулярные клетки); мезенхима Околощитовидные железы: эпителий 3-4 пар жаберных карманов; мезенхима Надпочечник: висцеральный листок спланхнотома (утолщение целомического эпителия у корня брыжейки) – корковое вещество; нервный гребень – мозговое вещество; мезенхима.