Клинические признаки токсикозов рыб
Токсическое веществоПризнакиТ-2 токсиконСнижение содержания белка, липидов и холестерина, повышение азота аминокислот и мочевины в сыворотке крови; при остром токсикозе изменение в гематологических показателей не наблюдается, при длительном воздействии малых доз токсина обнаруживается снижение концентрации гемоглобина и гематокритной величины.Дезоксиниваленол(ДОН)Содержание белка в сыворотке не меняется, содержание холестерина имеет тенденцию к повышению.АфлатоксикозРыба становится вялой, не реагирует на внешние раздражители. Наблюдают потемнение покровов тела, ерошение чешуи, вздутие брюшка. При вскрытии полости тела обнаруживают внутриполостную жидкость. Печень с желтовато-белыми узелками или серовато-беловатыми опухолями, сильно увеличена. Опухоли дают метостазы по всей печени и во внутренние органы. Множественные опухоли белого цвета и плотной консистенции чаще встречают в пилорическом отделе желудка, реже-в среднем и заднем отделах кишечника. В паренхиме печени отмечают гиперемию. Наблюдают выпячивание слизистой оболочки ануса, кровенаполнение селезенки, отечность, дряблость и серую окраску почек.ГоссиполВ начальной стадии подавляется рост и изменяются гематологических показателей. При сильных токсикозах отмечают отклонения в печени и почках: гломерулонефрит, некроз печениЮ селезенки и почек. У белого амура в полости тела обнаруживают либо толстый розовый слой стеариноподобного жира, который окружает внутренние органы, либо бледно-желтый экссудат, при накопление которого у отдельных рыб появляется пучеглазие.Продукты окисления жировВ начальной стадии отмечают повышение содержания малинового диальдегтда в мышцах рыб, а также повышение скорости его образования, торможения роста. Повышение гемолиза эритроцитов и активности кислой ДНК-азы в мышцах. При длительном скармливании комбикормов с сильно окисленными жирами наблюдается повышение содержания остаточного азота аминокислот сыворотки, снижение гемоглобина, гематокритного числа и СОЭ, торможение роста рыб.Высокие дозы паприна, гиприна и др. продуктов микробиосинтезаДлительное кормление вызывает снижение обжей резистентности содержание белка, азота, аминокислот и липидов в сыворотке.
Диагностика токсикозов рыб
Диагностика токсикозов состоит из трех этапов: 1 -обследование рыбы (с целью выявления глубины токсикоза), 2 - исследование корма и определение степени его токсичности, 3 - обнаружение и количественное определение токсического агента.
1.Обследование рыбы
Алиментарные токсикозы рыб проявляются, в зависимости от дозы и кратности поступления токсиканта, в острой и хронической формах. Высокие дозы токсиканта вызывают острые токсикозы, сопровождающиеся массовой гибелью рыб. При низких дозах интоксикация сопровождается по истечении определенного срока (около 30-40 дней) нарушением обменных процессов, замедлением роста, снижением резистентности и даже гибелью наиболее ослабленных экземпляров рыб.
Острые токсикозы вызываются дозами, значительно превышающими МДУ (максимально допустимые уровни), и приводят к быстрой гибели рыб в течение 1-3 суток. В зависимости от вида токсиканта клинические признаки могут быть самыми разными, но, как правило, поражаются нервная, опорно-двигательная или кроветворная системы.
Хронические токсикозы проявляются поэтапно. Их проявление сходно с симптомами, наблюдаемыми при неполноценном или несбалансированном кормлении. Болезнь имеет несколько стадий развития.стадия. Видимых клинических признаков заболевания не обнаруживается. Отмечают отклонение показателей обмена веществ от нормы, что проявляется в снижении темпа роста, а иногда в форме катарального воспаления кишечника.стадия. Длительное скармливание недоброкачественных кормов приводит к снижению естественной неспецифической резистентности рыб, изменению гематологических показателей, воспалению ануса, различных отделов кишечника и выделению слизистых тяжей вместе с экскрементами.стадия. При длительном потреблении слаботоксичных кормов болезнь приобретает хроническую форму. При внешнем осмотре рыб выявляют дряблость мышц, симптом "острой спины", изменение окраски тела и плавников, язвы и кровоизлияния различной локализации, опухоли. При патологоанатомическом вскрытии отмечают ожирение печени, гидремию почек, увеличение их объема, наличие опухолей, асцит, энтерит. Хронические токсикозы приводят к снижению воспроизводительной функции, появлению физиологически неполноценного потомства, снижению резистентности. В отдельных случаях рыбы могут сохранять нормальные показатели темпа роста.
Для диагностики токсикозов исследованию подвергают по 10 рыб из каждой группы. Рыбы исследуемой группы считаются больными, если выявлено не менее 20 % рыб с нарушением обмена веществ. Диагноз устанавливают по среднегрупповым значениям показателей в выборке, а по индивидуальным - с учетом симптоматики заболевших рыб.
Для диагностики стадии течения токсикозов используют различные физиолого-биохимические методы. Для выявления нарушений используют не менее 5-10 физиолого-биохимических показателей (белок, остаточный азот, азот аминокислот, мочевина, липиды, холестерин, глюкоза, мочевая кислота, аспартатаминотрансфераза, холинэстераза сыворотки крови и др.).
. Исследование корма.
Качество кормов оценивают на общую токсичность по выживаемости тест-объектов. При выявлении их токсичности специальными методами определяют наличие в них окисленных жиров, микотоксинов, тяжелых металлов, пестицидов и других загрязнителей (.
Максимально допустимые уровни (МДУ) содержания патогенных факторов в комбикормах
Для карпа (от сеголетков до товарной рыбы) МДУ на продукты окисленных жиров разработаны для хозяйств с низкой естественной кормовой базой. Для всех возрастов карпа недопустимо превышение:
кислотного числа: 50 мг КОН в 1 г жира;
перекисного числа: 1,0 % йода;
альдегидного числа: 1,0 Е г/100 мл/см (в единицах оптической плотности). МДУ микотоксинов:
Т-2-токсин: 0,05 мг/кг корма,
ДОН-токсин: 3,33 мг/кг корма.
Суммарное содержание продуктов микробиосинтеза: паприна (БВК, дрожжи на нефтепарафинах), гаприна (БВК, дрожжи на природном газе), гиприна (гидролизные, кормовые дрожжи) - 5 % массы корма,
Для лососевых рыбМДУ на афлатоксины не разработаны
радужная форель наиболее чувствительна к афлатоксинам;
афлатоксин B1 (0,03 - 0,06 мг/кг корма) вызывает массовую гибель мальков;
концентрации 0,5-1,0 мг/кг корма вызывают образование опухоли печени;
афлатоксины В2, G1 и G2 встречаются в кормах реже и в меньших
концентрациях, чем афлатоксин В1 они также уступают ему в токсичности и канцерогенности;
МДУ на госсипол для рыб не разработаны
доза 0,1 г/кг - вызывает изменения гематологических показателей и нарушает процесс синтеза белка; доза 0,3 г госсипола на 1 кг корма подавляет рост рыб.
Определение токсичности фуражного зерна, продуктов его переработки и комбикормов с использованием рыб-гуппи. При санитарной оценке концентрированных кормов их необходимо исследовать на токсичность, которая может быть обусловлена за счет наличия в кормах химических соединений и микотоксинов. Для этой цели в соответствии с ГОСТ отбирают средние пробы кормов и отправляют в лабораторию на исследование, при котором определяют общую токсичность и присутствие микотоксинов.
Определение общей токсичности.
Исследования проводят по Методике, утвержденной ГУВ МСХ России. Принцип методики основан на извлечении из фуражного зерна, продуктов его переработки, комбикормов ацетоном жиро- и водорастворимых фракций токсических веществ и последующем воздействии этих фракций на аквариумных рыб-гуппи.
Методика позволяет определить токсичность концентрированных кормов в течение суток без учета времени подготовки образцов для тестирования.
Пробу фуражного зерна (ячмень, овес, пшеница, горох, кукуруза, просо) 50 г тщательно измельчают на лабораторной мельнице (отруби и комбикорма экстрагируют без измельчения), помещают в плоскодонную колбу с притертой пробкой, заливают 150 мл ацетона и экстрагируют при встряхивании на шуттель-аппарате в течение двух часов.
Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в фарфоровую чашу и выпаривают под тягой на водяной бане (Т 55-60°) досуха. Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетона и переносят его в химический стакан (емкостью 700-800 мл, диаметром 11-15 см) с 500 мл воды из аквариума комнатной температуры (17-20°). Экстракты из комбикормов, кукурузы, гороха и проса после растворения в воде помещают в бытовой холодильник на 40-45 мин. при Т 6-7°С, по истечении срока экстракты фильтруют через небольшой слой ваты, подогревают до исходной температуры (17-20°).
В воду с экстрактом помещают 5 рыб-гуппи независимо от пола, возраста, за которыми ведут наблюдение, отмечая их гибель через 24 часа (гуппи, вышедшие из опыта, выбраковываются).
Примечание. Если фуражное зерно, продукты его переработки и комбикорм окажутся токсичными, такие партии кормов немедленно исключаются из рациона и проводят дополнительные дифференциальные исследования на хлор- и фосфорорганические соединения, препараты ртути, алкалоиды (по ранее разработанным методикам) и микотоксины.