Ацетилметилкарбинол мен ышылдары Нитриттерді нитраттара айналдыру

 

2 сурет. Микробтарды биохимиялы асиеттерін зерттеу схемасы


Мысалы: лактаза ферменті лактозаны ыдыратады, мальтаза – мальтозаны т.б. Ферменттер негізінен зі ыдырататын зата «аза» деген жрнаты жалау арылы аталынады.

 

Экзоферменттер – сырты ортаа бліне отырып оректікзаттарды макромолекулаларын микроб клеткасы игере алатындай арапайым заттара дейін ыдыратады

 

Эндоферменттер –алмасу реакцияларына атынасады.Микробтарды ферменттік рамы траты болады, сондытан трлі микробтарды оларда бар ферменттер тріне арап-а ажырата береді. Ол шін, рине олардаы ферменттер рамын анытау ажет.

 

сер ету механизміне байланысты ферменттерді 6 класа бледі:

1. Тотытыру-алпына келтіру ферменттері – оксидоредуктазы.

 

2. Трансферазалар

 

3. Гидролазалар

4. Лиазалар

5. Липазалар

 

6. Изомеразалар

 

Зардапты микробтарды трін анытау кезінде олардаы сахаролитикалы жне протеолитикалы ферменттерді маызы анарлым зор. Сахаролитикалы жне протеолитикалы ферменттерді анытау шін Гисс ортасына себінді жасайды. Сахаролитикалы ферменттерді арасында бактериялар кмірсуларды жне кп атомды спирттерді ышыл мен газа дейін ыдыратады. Газды тзілгенін аару шін сйы Гисс ортасына алытылар орналастырады. ышыл тзілгеніне ортадаы индикатор арылы кз жеткізеді (Андрадэ индикаторы). Егер микробта фермент жо болса онда олар ортаны біртекті лайлап, кдімгі оректік орта сияты се береді. Ортаны тсі згермейді. Егер антты ыдырату кезінде газ тзілетін болса (ышыл ана емес) онда алытыны ктеріп жібереді.

 

Кмірсулары бар орталарды дайындау.

 

ЕПС-на 1 % андай да бір кмірсу жне 5 % лакмус тнбасын (индикатор) осады. Оны пробиркалара йып 3 кн бойы бумен стерильдейді. Лакмус индикарды орнына Андрадэ индикаторын : 0,5 мл ышыл фуксин, 16 мл кйдіргіш натриді алыпты ерітіндісі жне 100 мл дистмльденген су осады.

 

Гисс ортасы (дайын).

 


2 г нтаты 100 мл дист суа осып толы ерігенше ыздырады, 5 мл йып, 120 0 С-та 20 мин стерилдейді. Нтижесін ызылт ср тсті кгілдір тске айналуына арап шыарады.

 

Протеолитикалы ферменттерді анытау шін зерттеліпотыран сіндіні желатинге (ЕПЖ), кдімгі стке, йытылан ан сарысуына себінді жасайды

 

а) Протеолитикалы асиеттер бар болса,онда желатин ериді

 

(ыдырайды), біра р микробта р трлі (бл асиетін де микроб трін ажыратуа пайдаланады), мысалы, топаланы оздырушысы желатинді еріткенде воронка сияты крініс, стафилококтарда – чулки сияты кріністі круге болады, ал абат-абатымен ерісе, онда ірі таяшалары (Pseudomonasaerogenosa) деп жорамалдауа болады.

 

б) Казеинні (ст белогы) ыдырауын Эйкманны стті агарындаанытауа болады. Ол шін 10 мл ЕПА-на 3 мл майсыздандырылан ст осады да петри аяшасына яды. Соан себінді жасайды. Зерттеліп отыран микробта протеолитикалы асиет бар болса микроб скен жерді айналасында тссіздену аймаын круге болады.

 

Белоктарды ыдырауыны аыры німдері – ккірсутегі, индол, аммияк сияты газдар. Оларды р трлі дістермен аныталады.

 

1. Индолды индикаторлы аазбен анытайды.

 

1 вариант – аазды 12 %-ды ымызды ышылыны ерітіндісімен анытырады. Егер индол тзілетін болса аазды тменгі жаы клгін тске боялады.

 

2вариант – аазды Эрлих ерітіндісімен анытырады. Реакцияа дейін ааз сары тсті, индол тзілетін болса ою ызыл тске боялады.

 

2. Ккіртсутегін сіркеышылды орасын10 %-дыерітіндісіне анытырылан индикатолы аазбен анытайды. Ккіртсутегі тзілген жадайда аазды тменгі жаы ара тске згереді.

3. Аммиякты сінді себілген пробиркаа лакмус аазын бекітуарылы анытайды. Аммияк тзілген жадайда аазды тиенгі жаы кгереді.

Тапсырма:зардапты материалдан бліп алан микроб сіндісінібиохимиялы асиеттерін анытау шін Гисс ортасына себінді жасау.

Зерттеуді нтижесін келесі кестеге толтыру.


 


Газ тзу Глюкоза Сахароза Лактоза Мальтоза Салицин Индол Ккірт Аммиак

сутегі

 

+ - о нтиже; - - теріс нтиже.