Порядок выполнения работы.
На альбомном листе бумаги проведите семь параллельных горизонтальных линий, начало которых необходимо отметить соответствующей буквой (А, В, С и т.д. по группам хромосом).
Затем возьмите фотокариограмму человека. На ней сфотографированы хромосомы в стадии метафазы (метафазная пластинка). С помощью глазных ножниц разрежьте фотографию на несколько фрагментов (2—3— 4), сосчитайте число хромосом в каждом из них и определите их общее число, а затем осторожно вырежьте каждую хромосому. По мере вырезания идентифицируйте хромосомы согласно размерам и форме, подбирайте гомологичные пары. Размещайте их на странице альбома, в соответствии с группой.
Сначала определите хромосомы пар 1 и 2 — наиболее крупные по размерам. Две самые крупные из них – хромосомы 1 пары. Пара 3 хромосом имеет меньшую длину, чем хромосомы пар 1—2, по форме относится к метацентрическим. Пары 1 и 3 почти метацентричны, пара 2 – субметацентрична. Пары хромосом 1—3 образуют группу А.
|
Хромосомы, относящиеся к парам 6—12, составляют группу С. Хромосомы имеют средние размеры, в основном субметацентрические, хотя различие в длине плеч несколько варьирует. Точно идентифицировать отдельные пары в пределах группы затруднительно и делать этого не нужно. На хромосомы пары 8 этой группы похожа по размеру и форме Х-хромосома (хотя приближается к метацентрическим). Поэтому ее нередко первоначально помещают в группу С. Позднее, когда хромосомы в основном будут подобраны, найдите Х-хромосому среди хромосом этой группы и переместите ее в пару 23.
Хромосомы пар 13—15 (группа D) легко найти, так как они имеют средние или крупные размеры и типичную акроцентрическую форму.
Пары 16—18 (группа Е) представлены хромосомами меньших размеров, мета- и субметацентрическими. Среди них легче всего идентифицировать пару 16, так как она метацентрическая. Часто удается различить 17 и 18, так как у последней самый низкий центромерный индекс в группе.
Хромосомы пар 19 и 20 (группа F) короткие, мелкие, по форме ближе к метацентрическим.
Хромосомы пар 21 и 22 (группа G) самые короткие, акроцентрические.
Пара хромосом 23 у женщин представлена двумя Х-хромосомами, одинаковыми по строению. Как уже указывалось, Х-хромосома по размеру соответствует паре хромосом 8, по форме — метацентрическая.
У мужчин пара 23 состоит из хромосом X и У. (У-хромосома выделяется как самостоятельная. Она имеет типичную акроцентрическую форму. По размерам меньше аутосом группы D, но больше G-хромосом. По размеру и форме почти соответствует хромосомам пар 21—22, Отличием служит параллельное расположение длинных плеч хромосомы (сестринские хроматиды плотно прилегают друг к другу).
Подобрав гомологичные пары хромосом, определите, кому принадлежит данный кариотип — мужчине или женщине.
Когда все хромосомы будут вырезаны и разложены на листе, еще раз окончательно проверьте правильность подбора гомологичных пар.
Затем с помощью клея приклейте хромосомы на лист альбома; хромосомы располагайте коротким плечом кверху. Хромосомы, образующие одну группу, объедините (сверху или снизу) фигурной скобкой и укажите их группу (А, Вит.д.). Под парами хромосом подпишите их порядковые номера.
Затем напишите сделанный на основании анализа фотокариограммы вывод. Укажите количество хромосом, нормальный кариотип или нет, мужской или женский и почему.
В выводе следует указать характер хромосомных нарушений: общее количество хромосом, в какой паре хромосом произошло изменение числа хромосом и тип мутации (моносомия, трисомия и т. д.), название болезни или синдрома.
Приложение. Денверская классификация хромосом.
Группа хромосом | Номер хромосомных пар в группе | Центромерный индекс* | Характеристика хромосом |
A | 48-49 38-40 45-48 | Самые крупные метацентрические Самые крупные субметацентрические Крупые метацентрические | |
B | 4,5 | 24-30 | Крупные субметацентрические |
C | 6-12 | 27-42 | Средние субметацентрические |
D | 13, 14, 15 | 14-24 | Средние акроцентричные, спутничные |
E | 16, 17, 18 | 28-43 | Мелкие субметацентрические |
F | 19,20 | 36-46 | Мелкие акроцентрические |
G | 21, 22 | 13-33 | Мелкие акроцентрические, спутничные |
X-хромосома | 38-42 | Средняя субметацентрическая (относится к группе С) | |
Y-хромосома | 0-26 | Мелкая акроцентрическая |
* Центромерный индекс определяется как отношение (в процентах) длины короткого плеча хромосомы (р) к длине всей хромосомы, т.е. к суммарной длине короткого и длинного плеч (р+q).
|