Порядок выполнения работы.

На альбомном листе бумаги проведите семь параллельных горизонтальных линий, начало которых необходимо отметить соответствующей буквой (А, В, С и т.д. по группам хромосом).

Затем возьмите фотокариограмму человека. На ней сфотографированы хромосомы в стадии метафазы (метафазная пластинка). С помощью глазных ножниц разрежьте фотографию на несколько фрагментов (2—3— 4), сосчитайте число хромосом в каждом из них и опре­делите их общее число, а затем осторожно вырежьте каждую хромосому. По мере вырезания идентифицируйте хромосомы согласно размерам и форме, подбирайте го­мологичные пары. Размещайте их на странице альбома, в соответствии с группой.

Сначала определите хромосомы пар 1 и 2 — наиболее крупные по размерам. Две самые крупные из них – хромосомы 1 пары. Пара 3 хромосом имеет меньшую длину, чем хромосомы пар 1—2, по форме относится к метацентрическим. Пары 1 и 3 почти метацентричны, пара 2 – субметацентрична. Пары хромосом 1—3 образуют группу А.

 
Хромосомы пар 4 и 5 очень сходны по размеру и форме (крупные субметацентрические), поэтому дифференцировать их не нужно, важно отнести их в группу (В). У хромосом этой группы одно плечо намного короче другого.

Хромосомы, относящиеся к парам 6—12, составляют группу С. Хромосомы имеют средние размеры, в основ­ном субметацентрические, хотя различие в длине плеч несколько варьирует. Точно идентифицировать отдельные пары в пределах группы затруднительно и делать этого не нужно. На хромосомы пары 8 этой группы похожа по размеру и форме Х-хромосома (хотя приближается к метацентрическим). Поэтому ее нередко первоначально помещают в группу С. Позднее, когда хромосомы в ос­новном будут подобраны, найдите Х-хромосому среди хромосом этой группы и переместите ее в пару 23.

Хромосомы пар 13—15 (группа D) легко найти, так как они имеют средние или крупные размеры и типичную акроцентрическую форму.

Пары 16—18 (группа Е) представлены хромосомами меньших размеров, мета- и субметацентрическими. Среди них легче всего идентифицировать пару 16, так как она метацентрическая. Часто удается различить 17 и 18, так как у последней самый низкий центромерный индекс в группе.

Хромосомы пар 19 и 20 (группа F) короткие, мелкие, по форме ближе к метацентрическим.

Хромосомы пар 21 и 22 (группа G) самые короткие, акроцентрические.

Пара хромосом 23 у женщин представлена двумя Х-хромосомами, одинаковыми по строению. Как уже ука­зывалось, Х-хромосома по размеру соответствует паре хромосом 8, по форме — метацентрическая.

У мужчин пара 23 состоит из хромосом X и У. (У-хромосома выделяется как самостоятельная. Она имеет типичную акроцентрическую форму. По размерам меньше аутосом группы D, но больше G-хромосом. По размеру и форме почти соответствует хромосомам пар 21—22, Отличием служит параллельное расположение длинных плеч хромосомы (сестринские хроматиды плотно прилегают друг к другу).

 

Подобрав гомологичные пары хромосом, определите, кому принадлежит данный кариотип — мужчине или женщине.

Когда все хромосомы будут вырезаны и разложены на листе, еще раз окон­чательно проверьте правильность подбора гомологичных пар.

Затем с помощью клея приклейте хромосомы на лист альбома; хромосомы располагайте коротким плечом кверху. Хромосомы, образующие одну группу, объеди­ните (сверху или снизу) фигурной скобкой и укажите их группу (А, Вит.д.). Под парами хромосом подпишите их порядковые номера.

Затем напишите сделанный на основании анализа фотокариограммы вывод. Укажите количество хромосом, нормальный кариотип или нет, мужской или женский и почему.

В выводе следует указать характер хромосомных нарушений: общее количество хромосом, в какой паре хромосом произошло изменение числа хромосом и тип мутации (моносомия, трисомия и т. д.), назва­ние болезни или синдрома.

 

Приложение. Денверская классификация хромосом.

 

Группа хромосом Номер хромосомных пар в группе Центромерный индекс* Характеристика хромосом
A 48-49 38-40 45-48 Самые крупные метацентрические Самые крупные субметацентрические Крупые метацентрические
B 4,5 24-30 Крупные субметацентрические
C 6-12 27-42 Средние субметацентрические
D 13, 14, 15 14-24 Средние акроцентричные, спутничные
E 16, 17, 18 28-43 Мелкие субметацентрические
F 19,20 36-46 Мелкие акроцентрические
G 21, 22 13-33 Мелкие акроцентрические, спутничные
X-хромосома 38-42 Средняя субметацентрическая (относится к группе С)
Y-хромосома 0-26 Мелкая акроцентрическая

* Центромерный индекс определяется как отношение (в процентах) длины короткого плеча хромосомы (р) к длине всей хромосомы, т.е. к суммарной длине короткого и длинного плеч (р+q).

 
Пример кариограммы: девочка, норма – 46 хромосом