Устройство светового микроскопа. Сущность и техника иммерсионной микроскопии. Правила работы с микроскопом.
Морфология микроорганизмов изучается с помощью микроскопа (рис. 3 –см. приложение). Разрешающая способность светового микроскопа (способность прибора «видеть» 2 точки раздельно) составляет 0,2 мкм (200 нм).
Рис. 4. Ход лучей в иммерсионной системе светового микроскопа
Особенностью микроскопического исследования в микробиологии является использование иммерсионной (immersio – погружать) системы. При этом виде микроскопии фронтальную линзу иммерсионного объектива с увеличением х90 (на нем имеется выгравированное кольцо черного цвета) погружают в каплю масла (кедрового, касторового или вазелинового), имеющего коэффициент преломления (1,51), близкий к показателю преломления стекла (1,52) во избежание потери света при переходе лучей из предметного стекла в воздушную среду (рис. 4). При микроскопии окрашенных объектов создают яркое освещение с помощью специального осветителя, зеркала, поднятого вверх конденсора и полностью открытой диафрагмы микроскопа. Неокрашенные объекты микроскопируют, ограничивая освещенность препарата, сужая диафрагму и опуская конденсор.
Морфология бактерий
Микробы, изучаемые медицинской микробиологией, принадлежат к неклеточным (доклеточным) формам (вирусы - царство Vira, вироиды, прионы) и клеточным формам (бактерии, архебактерии, грибы, простейшие). Среди клеточных форм микроорганизмов выделяют 3 домена (империи):
- домен Bacteria – прокариоты, истинные бактерии или эубактерии, имеющие аналог ядра в виде нуклеоида и 70S рибосомы в цитоплазме; к этому домену относятся бактерии, риккетсии, микоплазмы, хламидии, спирохеты, актиномицеты, нокардии.
- домен Archaea - прокариоты (архебактерии);
- домен Eukarya – эукариоты, имеющие ядро с оболочкой и ядрышком, митохондрии, эндоплазматический ретикулум, лизосомы, 80-S-рибосомы. Этот домен состоит из царства «Грибы» (Fungi), царства животных (Animalia) с подцарством простейших (Protozoa) и царства растений (Plantae).
У бактерий выделяют три основные формы: шаровидную, палочковидную (вариант – нитевидную), извитую (рис. 5 – см. приложение).
Бактерии шаровидной формы – кокки (coccus - зерно) подразделяются на:
микрококки (отдельно лежащие, как правило, непатогенные виды);
диплококки (парные кокки – возбудители гонореи, менингококковой инфекции, пневмококк);
стрептококки (цепочки кокков – возбудители гнойных заболеваний и сепсиса, скарлатины, ангин, нефритов и т.д.);
стафилококки (в виде виноградных гроздьев – возбудители гнойных инфекций),
тетракокки (образования из четырех кокков – непатогенные виды);
сарцины (пакет из 8-16 кокков – непатогенные представители микрофлоры воздуха).
Палочковидная форма бактерий наиболее распространена. Располагаются в виде одиночных клеток, дипло- или стрептобактерий. Края палочковидных бактерий могут быть закруглены, обрублены, утолщены, заострены.
Извитые формы бактерий-вибрионы (изогнутые палочки в виде запятой – холерный вибрион), спириллы (бактерии в виде короткой спирали); спирохеты с разнообразными изгибами и завитками, Эти формы встречаются значительно реже, чем круглые или палочковидные формы.