Микробиологическая диагностика лептоспироза
Возбудитель лептоспироза – Leptospira interrogans вызывает нетрасмиссивную природно-очаговую зоонозную инфекцию, протекающую в виде почечной (безжелтушной) или почечно-печеночной (желтушной) формах. Описано более 200 сероваров патогенных лептоспир, объединенных в 23 серогруппы. Наиболее распространены серовары pomona, grippotyphosa, canicola, icterohaemorrhagiae, hebdomadis. Источниками инфекции являются грызуны, дикие и сельскохозяйственные животные. Заражение человека происходит при купании и использовании воды из открытых водоемов, зараженных мочой больных животных, при контакте с инфицированным сырьем, употреблении зараженных лептоспирами продуктов. Методы микробиологической диагностики лептоспироза отражены в схеме 8.
Бактериоскопический метод. Обычно проводится микроскопическое исследование материала с целью обнаружения живых лептоспир с помощью темнопольной микроскопии в препаратах «раздавленной капли». При микроскопии с использованием большого увеличения лептоспиры выглядят в виде тонких спиралевидных микроорганизмов с концами, напоминающими буквы С или S. Лептоспиры обладают поступательным, вращательным, сгибательным движением.
Схема 8. Микробиологическая диагностика лептоспироза
|
| |||
| |||
Бактериологический метод.Для выделения лептоспир применяют жидкие питательные среды (Ферворта-Вольфа, Терских и др.), в состав которых входит инактивированная кроличья сыворотка. Лептоспиры растут медленно (до 10 дней и более), не изменяя внешнего вида среды. Наличие лептоспир в среде подтверждается с помощью метода темнопольной микроскопии.
Биопроба. Ставится на морских свинках или золотистых хомячках. При наличии в материале лептоспиры серовара icterohaemorrhagiae у морских свинок через 5-10 дней появляется желтушная окраска склер и слизистых оболочек и через 48 часов после этого животные погибают. В моче и крови при микроскопии обнаруживают лептоспиры. Хомячки погибают в течение первых дней или месяца. С целью обнаружения лептоспир у зараженных животных проводится темнопольная микроскопия, а также посевы крови и ткани почек для выделения культуры лептоспир.
Серологический метод- постановка реакции микроагглютинации и лизиса лептоспир (РМАЛ - диагностический титр 1:10), РИФ, ИФА, РНГА с целью выявления специфических антител в крови больных.
Генодиагностика– разработана ПЦР для определения специфических фрагментов ДНК лептоспир.