С перекисью водорода без отгонки

Метод основан на сжигании исследуемого образца в серной кислоте в присутствии перекиси водорода и определении общего азота кипячением минерализованной пробы с 20 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³.

Оборудование и реактивы: весы аналитические класса 2 с пределами измерения от 0 до 200 г; электроплитка бытовая или газовые горелки; колбы мерные вместимостью 500 и 200 см³; бюретки вместимостью 25 и 50 см³ с делениями на 0,1 см³; капельницы; часы механические; цилиндры мерные вместимостью 100 и 50 см³; колбы конические, вместимостью 250 и 500 см³; колбы круглодонные длинногорлые (Кьельдаля) вместимостью от 100 до 250 см³; вода дистиллированная; кислота серная концентрированная плотностью 1840 кг/ м³ и раствор 0,05 моль/ дм³ (0,1 н); натрия гидроксид, раствор 150 г/ дм³ (15 %-ный); индикатор смешанный (Таширо) смешивают равные объемы спиртовых растворов метилового красного 2,0 г/ дм³ (0,2 %-ного) и метиленового синего 1,0 г/ дм³ (0,1 %-ного).

Проведение испытаний. Предварительно определяют количество гидроксида натрия в 20 см³ раствора 0,1 моль/ дм³ после кипячения по отношению к серной кислоте 0,05 моль/ дм³ и к добавляемым реактивам. Это количество условно называют «рабочим титром щелочи» и обозначают .

Установка «рабочего титра» 20 см³ 0,1 моль/ дм³ раствора гидроксида натрия и проверка реактивов. В коническую колбу вместимостью 500 см³ наливают 100 см³ дистиллированной воды, добавляют 1,5 см³ концентрированной серной кислоты и 5 капель смешанного индикатора. Содержимое колбы осторожно нейтрализуют раствором гидроксида натрия 150 г/ дм³ до переходной окраски и подкисляют несколькими см³ раствора серной кислоты 0,05 моль/ дм³, затем вновь нейтрализуют раствором гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³.

В колбу приливают из бюретки 20 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³, ставят на горящую плитку и кипятят 15 минут, считая с момента закипания, быстро охлаждают под краном или погружают в холодную воду.

Содержимое колбы нейтрализуют раствором серной кислоты 0,05 моль/ дм³ и добавляют избыток ее от 2 до 3 см³ для растворения карбонатов. Отмечают объем добавленного раствора серной кислоты.

Затем добавляют 2-3 капли смешанного индикатора и проводят обратное титрование раствором гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³ до появления такой же окраски, какая была перед кипячением. «Рабочий титр» 20 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³ по отношению к раствору серной кислоты 0,05 моль/ дм³ вычисляют по формуле:

 

, (3.2)

 

где - объем раствора серной кислоты 0,05 моль/ дм³, прилитый в колбу после кипячения, см³; - поправочный коэффициент на точный раствор 0,05 моль/ дм³ серной кислоты; - объем раствора гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³, израсходованный на обратное титрование, см³; - поправочный коэффициент на точный раствор 0,1 моль/ дм³ гидроксида натрия.

От 0,8 до 1,4 г исследуемой пробы (для продуктов с высоким содержанием воды навеска составляет от 1,8 до 2,0 г), отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,0005 г, помещают в колбу для сжигания вместимостью от 100 до 250 см³, добавляют соответственно 20 или от 10 до 12 см³ серной кислоты плотностью 1840 кг/ м³ и 5 см³ перекиси водорода. Происходит саморазогревание смеси и выделение газов.

По окончании выделения газов колбу нагревают в колбонагревателе до закипания серной кислоты, немного охлаждают, осторожно, по стенке колбы, добавляют 2-3 см³ перекиси водорода и продолжают нагревание. Добавление перекиси водорода с последующим нагреванием проводят несколько раз, постепенно уменьшая ее количество. Процесс минерализации продолжается от 35 до 45 минут.

По окончании минерализации (жидкость в колбе должна быть полностью обесцвечена) и охлаждения колбы содержимое ее количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 см³ при исследовании продуктов с низким содержанием воды и 200 см³ при исследовании продуктов с высоким содержанием воды. Объем жидкости в колбе доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают содержимое.

Пипеткой отбирают 50 см³ приготовленного раствора, переносят в коническую колбу вместимостью 500 см³, добавляют 50 см³ дистиллированной воды, 5 капель смешанного индикатора.

Содержимое колбы осторожно нейтрализуют раствором гидроксида натрия 150 г/ дм³ до переходной окраски, подкисляют несколькими см³ раствора серной кислоты 0,05 моль/ дм³, а затем вновь точно нейтрализуют раствором гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³.

После этого в колбу приливают из бюретки 20 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³ и ставят на горячую плитку. Содержимое колбы интенсивно кипятят точно 15 минут, считая с момента закипания, быстро охлаждают (под краном или погружают в холодную воду), нейтрализуют раствором серной кислоты 0,05 моль/ дм³ и добавляют избыток ее 2-3 см³ для растворения карбонатов, отмечая количество добавленного раствора серной кислоты.

Добавляют 2-3 капли смешанного индикатора и проводят обратное титрование раствором гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³ до появления такой же окраски, какая была перед кипячением.

Массовую долю белковых веществ в процентах вычисляют по формуле:

 

, (3.3)

 

где - «рабочий титр» 20 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³ (0,1 н); - объем, в котором растворена минерализованная навеска, см³; - объем раствора серной кислоты 0,05 моль/ дм³, прилитый для нейтрализации и подкисления жидкости после ее кипячения, см³; - объем раствора гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³, израсходованный на обратное титрование избытка серной кислоты, см³; - коэффициент пересчета на точный 0,05 моль/ дм³ раствор серной кислоты; - коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/ дм³ гидроксида натрия; - количество азота эквивалентное 1 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³, г; - коэффициент пересчета азота на белковые вещества; - навеска исследуемого продукта, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми не должны превышать 0,5 %.