Диагностические сыворотки. Получение и практическое применение. Монорецепторные сыворотки. Моноклональные антитела, принцип получения.

Диагностические сыворотки используются в бактериологическом методе на этапе идентификации для определения антигенной структуры возбудителя и микроскопическом методе в РИФ и РЗЦПД. Получают путём иммунизации животных вакцинами и анатоксинами.

Монорецепторные сыворотки получают путём истощения по Кастелани (пример: берут мышь и заражают антигенами А, В, С, D, Е, К, затем берут сыворотку мыши и добавляют антитела А, В, С, Е, К, и получают моноклональную сыворотку D.

Моноклональные антитела – принцип тот-же (путём слияния активного В-лимфоцита с миеломной клеткой, получается гибридом (активная онкоклетка продуцирующая антитела к одному антигену.

Монорецепторные моноклональные сыворотки применяют для специфической диагностики.

 

30. Понятие о клинической иммунологии. Методы оценки иммунного статуса организма. Врождённые и приобретённые иммунодефицитные состояния. Аутоиммунные заболевания. Трансплантационные реакции. Иммуномодуляторы.

Клиническая иммунология изучает изменения иммунной системы при патологических состояниях, выявляет иммунодефициты и изучает их.

Методы оценки иммунного статуса.

1. Количественное – определение числа Т- и В-лимфоцитов, иммуноглобулинов различных классов, факторов естественной резистентности. Активность фагоцитоза.

2. Качественное изучение функционально-активных иммунокомпетентных клеток и антител в реакциях розеткообразования.

Иммунодефициты: врождённые (первичные), результат генетических нарушений. Проявляется в виде гипо- или агаммаглобулинемий, дефицита иммунных клеток или нарушения эритропоэза. Приобретённые (вторичные) в результате действия неблагоприятных факторов: радиации, авитаминоза, инфекционных болезней, экофакторов.

Аутоиммунные заболевания – реакция иммунной системы на аутоантигены, при нарушении гистиобарьеров, травмах и воспалительных процессах или на собственные ткани организма.

Трансплантационные реакции бывают двух типов: отторжение (хозяин против трансплантанта), и аутоиммунные процессы (трансплантант против хозяина). При трансплантации учитывают принцип иммунной толерантности и предпочтительной является пересадка органов близких родственников.

Иммуномодуляторы – препараты изменяющие состояние иммунной системы. Выделяют две группы: иммуномодуляторы применяют при хронических инфекционных заболеваниях, иммуносупрессоры при трансплантации и аутоиммунных процессах.

 

 

Раздел №3 Частная медицинская микробиология.

Стафилококки. Виды стафилококков, дифференцирующие признаки. Эпидемиология. Патогенез гнойно-воспалительйых заболеваний, вызванных стафилококками. Ферменты патогенности. Лабораторная диагностика, специфическая профилактика и терапия. Проблема госпитальной стафилококковой инфекции. Выявление и санация бактерионосителей.

Стафилококки - возбудители заболевании у человека 1-St. aureus. 2-St. epidermidis. 3-St. saprofiticus. 1-патогенный вид, 2 и 3 - условно-патогенные микробы (УПМ). Все стафилококки Гр+ кокки. При микроскопии выявляется расположение в виде грозди (staphila - виноград). Дифференцируются при идентификации по видовым признакам: биохимическая активность, факторы патогенности. Все стафилококки по наличию фермента плазмокоагулазы делятся на коагулаза+ КГ+ и КГ-, (КГ+ St. aureus. КГ- УПМ).

Стафилококки обладают широким спектром ферментов агрессии и защиты: плазмокоагулаза (ПКГ) (сворачивает белки плазмы вокруг стафилококка), фибринолизин, гиалуронидаза, лецитовителлаза (расщепляет лецитин и мембрану), коллагеназа и др.

Культивируют на специальных средах - желточносолевой агар (ЖСА), молочносолевой агар (МСА), но может расти и на мясопептонном агаре (МПА). Если стафилококк обладает лецитовителлазой, то при росте на ЖСА образует колонии с венчиком. Устойчивость во внешней среде высокая.

Эпидемиология – источником инфекции являются больные люди, бактерионосители и животные. Пути передачи: контактно-бытовой, алиментарный. Восприимчивость организма высокая, особенно у ослабленных (дети, старики и т.д.).

Патогенез. Входными воротами являются чаще кожа и слизистые, где возникают очаговые воспаления (фурункул, карбункул), из которых возбудитель может попасть в кровь и лимфу и распространиться по этим системам – это генерализация процесса, сепсис, который может привести к септикопиемии. Другими входными воротами являются дыхательные пути, инфицирование которых приводит к бронхиту и пневмонии (чаще детей). Если входными воротами станет ЖКТ, то разовьется заболевание по типу токсикоинфекции, т.к. токсины стафилококка накапливаются в пищевых продуктах (чаще в молочных, кондитерских).

Лабораторная диагностика. Используются методы I принципа: микроскопический, бактериологический и биопроба. Биопроба используется для определения факторов патогенности - некротоксина, летального токсина и т.д. Бактериологический метод позволяет идентифицировать возбудителя и изучить факторы патогенности: плазмокоагулазу, лецитиназу, АЛА, антибиотикорезистентность. II принцип не используется, т.к. применение серологического метода нецелесообразно вследствии определенных особенностей микроба: антигенная мимикрия, острое течение заболеания, нормальная микрофлора которая содержит эти УПМ, поэтому в крови есть определенный титр антител к этим микробам.

Специфическая терапия: При генерализованных формах используется стафилококковая плазма, при хронических - стафилококковый гамма-глобулин, при стафилодизбаюпериозе - стафилобактериофаг. Профилактика: по показаниям - стафилококковый анатоксин.

Госпитальные стафилококковые инфекции возникают в хирургических, акушерскогинекологических и неонатологических отделениях. Источники - медперсонал и больные. Пути передачи - контактно-бытовой и артифициальный.

Особенности возбудителя: устойчивость к антибиотикам, к хлору, УФЛ, к бактериофагам и т.д.

Основным источником инфекции являются бактерионосители среди медперсонала, поэтому идет строгий контроль за их выявлением и санацией. Диагностика бактерионосительства проводится среди работников медицинских учреждений, дошкольных учреждений, пищеблоков, фармацевтов, связанных с производством лекарств.

Методы:

1. Цитоскопический – обнаружение в мазках со слизистой носа эпителиацитов с микроколониями стафилококка. Для диагноза таких клеток должно быть не менее 20%. Исследуемый материал (мазок) подвергается окраске и микроскопии.

2. Бактериологический метод: исследуемый материал (мазок слизистой носа) сеется на ЖСА. Производится оценка колоний по лицитиназе (ЛВ) и подсчитывавпся показатель микробной обсемененности (ПМО). ЛВ+ отсеиваются для получения чистой культуры, идентифицируются: определяются ПКГ и биохимических свойств, определение АЛА и т.д.

Результат:

1. Выделение St. Aureus при ПМО>10³

2. Выделение St. Epidermidis при ПМО>10³+ЛВ+АЛА

Санация: Используются бактерицидные препараты – антисептики и вещества поглащающие АЛА (например витамин А). В случае длительного и упорного носительства используются антибиотики.

 

Стрептококки. Свойства, классификация. Виды патогенных стрептококков. Гемолитические стрептококки группы А, стрептококки пневмонии и их роль в патологии человека. Факторы патогенности. Лабораторная диагностика. Лечение.

Стрептококки – возбудители крупозной пневмонии. (Str. pneumonia), ревматизма (Str. hemolyticus), пиодермии, скарлатины, ангины, b-гемолитический стрептококк группы А)

Морфологически - это Гр+ кокки. Факультативные анаэробы. Культивируются на кровяном агаре. Высокоустойчивы во внешней среде. Факторы патогенности: токсины, ферменты, защиты и агрессии.

Классификация стрептококков: группа А- патогенные виды, b- непатогенные. Группа А включает a- и b-гемолитические стрептококки - b-гемолитический - возбудитель ангины, может вызвать ревматизм, так как при хронизации процесса реализуется антигенная мимикрия (под соединительную ткань, к которой развивается аутоиммунный ответ.

Лабораторная диагностика. Включает выявление носительства и определение этиологии ангины. Исследуемый материал - мазок зева. Применяются: 1-микроскопический метод. 2-метод бактериологический: посев на кровяной агар, отбор колоний с зоной гемолиза и их идентификация. Лечение: только антибиотиками.

Str. pneumonia – возбудитель крупозной пневмонии. Морфологически - это дипплококк. Фактор патогенности - капсула. Культивируется в специальной среде, т.к. плохо растет на обычных.

Патогенез. Входные ворота - эпителий дыхательных путей, поражение легких (воспалительное) влечет крупозную пневмонию (характерные признаки крупозной пневмонии: долевое поражение из-за этого тяжелая интоксикация, выключение из вентиляции доли легкого (печеночный звук при перкуссии).

Лабораторная диагностика: Включает: 1-Микроскопию. 2-Бактериологический метод. З-Биологический метод. 2+3 - диагноз ставится на основании фактора патогенности - капсулы. Исследуемый материал вводится в животное, после его гибели: 1-Мазок и отпечаток органов. 2-Посев из органов.

Лечение: антибиотиками. Специфической терапии нет.

 

Менингококки. Серологические группы. Свойства. Эпидемиология, патогенез заболеваний. Лабораторная диагностика различных клинических форм менингококковой инфекции, бактерионосительства. Выделение внутриклеточно-паразитирующего возбудителя.

Менингококки (Neisseria meningitidis) - это Гр- кокки, расположенные попарно в виде бобов. Факультативные анаэробы. Факторы патогенности – эндотоксин и АЛА. Склонны к внутриклеточному паразитированию. Устойчивость во внешней среде низкая. Культивируются в специальных средах на основе кровяного агара с добавлением антибиотиков и лизоцима

Эпидемиология. Заболевание антропонозное. Источниками инфекции являются больные, бактерионосители. Путь передачи - воздушно-капельный. Восприимчивость организмов низкая (болеют 2-3% людей), но актуальность заболевания определяется тяжестью и последствиями. Формы инфекции: 1) назофарингит. 2) менингит 3) менингококцемия (сепсис). 4) носительство.

Патогенез: Входные ворота – слизистая носоглотки. Далее возбудитель лимфогенно и гематогенно проникает в головной мозг и вызывает менингит. На фазе гематогенного распространения может возникнуть генерализация - менингококцемия.

Клинические особенности: Продуктивное воспаление приводит к увеличению объема спинномозговой жидкости и повышению внутричерепного давления, из-за этого возникает головная боль, повышение температуры тела, рвота, менингеалъные знаки: ригидностъ затылочных мышц (симптомы Кернига) или боль.

Лабораторная диагностика: назофарингит и носительство - микроскопический, бактериологический (основной), менингит -микроскопический (основной) и бактериологический; менингококцемия - бактериологичекий.

Выделение внутриклеточных паразитов: исследуемый материал (клетки эпителия) помещаются в среду 199 с лизацимом, где инкубируются 3-6 часов, при температуре 37°С центрифугируются и высеиваются на питательные среды.

Специфическая профилактика - гамма-глобулин контактным: Вакцина в стадии разработки.