ИЗМЕНЕНИЕ ДВИГАТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ БЕЛЫХ КРЫС ПОД ВЛИЯНИЕМ ГАЛОПЕРИДОЛА
(исследование методами «открытое поле с норками»,
«темно-светлая камера», «вертикальная сетка»; июнь 2016)
Двигательная активность - одна из базовых характеристик поведения животных. Она включает в себя рефлекторные ответы на различные стимулы (имеются ввиду как врожденные, так и приобретенные реакции), перемещение животных в пространстве (локомоцию), а также движения, запускаемые некоторыми внутренними потребностями организма (ориентировочно-исследовательскую деятельность, груминг - умывания, вылизывание шерсти; двигательные компоненты пищевого, питьевого, зоосоциального, родительского, полового поведения и т.д.).
Управление двигательной активностью осуществляют моторные центры мозга, включающие в себя большое количество структур, образующих иерархически организованные комплексы. Основные из них - это моторная, премоторная и ассоциативная кора больших полушарий; базальные ганглии; мозжечок; двигательные ядра мозгового ствола; спинной мозг.
На уровне спинного мозга осуществляются, в первую очередь, двигательные безусловные рефлексы. Наиболее типичные из них: (1) сокращение мышцы в ответ на растяжение - миотатический рефлекс; примером может служить коленный рефлекс; (2) обратный миотатический рефлекс, когда при сверхсильном растяжении мышца расслабляется; (3) сгибательный рефлекс кожного происхождения - отдергивание конечности от болевого стимула.
Локомоция - это координированные стереотипные движения конечностей при беге и ходьбе, для водных - плавание за счет изгибов туловища. Локомоция осуществляется при помощи врожденных двигательных программ, но способна запускаться не только внешним стимулом (как рефлексы), но и «изнутри» организма (например, при нарастании пищевой мотивации, тревожности и т.п.). Ритм сгибания-разгибания каждой конечности определяется активностью особого центра спинного мозга. Четыре таких центра у наземных позвоночных образуют замкнутый контур, по которому возбуждение может циркулировать длительное время, обеспечивая непрерывность локомоции. При этом основная роль в запуске движений очередной конечности принадлежит проприорецепции (мышечной чувствительности), связанной с движением предыдущей конечности.
Головной мозг осуществляет коррекцию локомоторных движений. Это достигается двумя способами - тоническими влияниями (запуск и ускорение локомоции) и фазическими (коррекция сгибания и разгибания). Центры тонических влияний - это субталамические ядра и голубое пятно с окружающей его норадренергической зоной. Чем больше активность этих ядер, тем быстрее локомоция. Передача сигналов осуществляются главным образом через ретикуло-спинальный тракт. Большие дозы агонистов норадреналина запускают локомоцию даже у спинальных животных.
Фазические влияния не изменяют общую интенсивность локомоции, а регулируют ее отдельные фазы. При этом крупноклеточная часть красного ядра усиливает фазу сгибания конечностей (через рубро-спинальный тракт); вестибулярные ядра (прежде всего, ядро Дейтерса) - фазу разгибания конечностей (вестибуло-спинальный тракт); ретикулярные ядра продолговатого мозга влияют на движения туловища (ретикуло-спинальный тракт). Все перечисленные центры получают проприоцептивную импульсацию из спинного мозга и управляющие сигналы из старой части мозжечка.
В коре больших полушарий можно выделить три двигательных центра - ассоциативную лобную, премоторную и моторную кору. Ассоциативная кора дает команду к началу целенаправленного поведения («принятие решения и запуск программы»); премоторная кора рассматривается как область, раскладывающая программу на отдельные компоненты-движения; моторная кора обеспечивает реализацию конкретных движений.
В моторной коре обнаруживается «карта» мышечной поверхности, т.е. определенные ее участки управляют определенными мышцами, причем соседние участки коры дают проекции к соседним мышцам. Площадь участков коры, управляющих отдельными мышцами пропорциональна не величине этих мышц, а тонкости их движений. Стимуляция моторной коры приводит к сокращению отдельных мышц, в то время как стимуляция премоторной коры вызывает сокращение целых мышечных групп.
Моторная кора пятислойна (нет 4-го слоя). Другой ее характерной чертой является очень значительная выраженность 5-го слоя - гигантских пирамид (пирамиды Беца). От них начинается пирамидный или кортико-спинальный тракт и другие тракты моторной коры. Пирамидный тракт эволюционно самый молодой и лучше всего развит у приматов. Его аксоны в основном заканчиваются на нейронах промежуточного и собственного ядер спинного мозга. У человека примерно 8% волокон кортико-спинального тракта оканчиваются непосредственно на мотонейронах спинного мозга. Благодаря этому осуществляются тонкие движения пальцев. У других приматов моносинаптическую передачу в пирамидном тракте осуществляют примерно у 2% волокон. Для остальных млекопитающих такое явление вообще не характерно.
Прочие двигательные тракты коры: кортико-рубральный - к красному ядру среднего мозга; кортико-понтинный - к собственным ядрам моста, а оттуда к мозжечку; кортико-бульбарный - к двигательным ядрам черепных нервов (управление мимикой, миганием, жеванием, глотанием, речедвигательными реакциями и т.п.)
Произвольные движения, совершаемые под контролем ассоциативной коры, требуют от организма очень больших усилий. Поэтому каждое новое движение, появляясь как произвольное, «стремится» к автоматизации, которая развивается в результате многочисленных повторений. Автоматизация - результат обучения нейронов мозжечка и базальных ганглиев. При этом мозжечок управляет отдельными движениями, а базальные ганглии - комплексами движений.
Обучающаяся зона мозжечка - это его кора. Самые крупные нейроны коры мозжечка, ее единственные эфференты - это ГАМК-ергические клетки Пуркинье (КП). С ними контактируют две группы афферентов:
(1) от моховидных волокон через клетки-зерна, аксоны которых (параллельные волокна) образуют синапсы на дендритах КП; через моховидные волокна КП получают сенсорную информацию от проприо- и вестибуло-рецепторов, а также двигательные сигналы от коры больших полушарий (через собственные ядра моста), которые активируют КП и задают их высокую фоновую активность (около 50 имп/с);
(2) лазающие волокна приносят импульсацию от нижних олив; нижние оливы получают афференты от мелкоклеточной части красного ядра, на которую, в свою очередь, приходит информация от коры больших полушарий; этот вход вызывает временное снижение активности КП.
Функция КП - постоянное торможение ядер мозжечка. Через эти ядра, в свою очередь, замыкаются дуги множества двигательных программ, и КП блокируют возможность самопроизвольных движений. Для запуска движения необходимо торможение КП (обычно - очень кратковременное).
Чтобы затормозить КП существует несколько способов:
(1) при произвольных движениях через параллельные волокна активируются звездчатые и корзинчатые ГАМК-ергические клетки, которые на десятые доли секунды тормозят КП;
(2) при двигательном обучении влияния от нижней оливы вызывают долговременные изменения свойств синапсов на КП; конкретнее, при срабатывании аспартатергических лазающих волокон в КП образуются вторичные посредники, которые частично инактивируют синапсы КП с параллельными волокнами (долговременная депрессия; несколько минут и часов);
(3) если двигательная активность сопровождается срабатыванием систем подкрепления, в работу включается еще одна группа проекций на КП - норадренергические; они создают долговременное снижение активности КП, которое может сохраняться недели, месяцы и годы - т.е. формируется долговременная двигательная память.
В системе выбора и запуска двигательной программы основные нейронные дуги проходят через премоторную кору и вентральное латеральное ядро таламуса (ВЛЯ). Соответственно, чтобы возбуждающий поток от ВЛЯ к коре не возникал самопроизвольно, это ядро находится под постоянным тормозным "давлением" бледного шара. Нейроны бледного шара аналогичны КП - крупные, ГАМК-ергические, постоянно активные.
В полосатом теле (стриатуме) находятся более мелкие, также ГАМК-еригические клетки, чьи аксоны направляются к бледному шару. Стимуляция стриатума приводит приводит к запуску целого комплекса движений (срабатывают десятки мышц). Без полосатого тела не формируются двигательные условные рефлексы. При разрушении лобной коры уже сформированные условные рефлексы сохраняются, если стриатум остается неповрежденным.
Активность полосатого тела регулируется компактной частью черной субстанции. Ее дофаминергические проекции оказывают сложные, чаще активационные влияния на стриатум. Повреждение этой системы при паркинсонизме может привести к снижению активности полосатого тела, что вызывает характерную симптоматику: тремор, ригидность и акинезию (вялость, затрудненность в запуске движений). Эта симптоматика ослабляется введением предшественника дофамина L-ДОФА.
Дофамин (как и норадреналин) относится к катехоламинам. Его практически нет в периферической нервной системе. Мы встречаем дофаминергические нейроны почти исключительно в трех основных отделах головного мозга: черной субстанции (компактная часть), вентральной покрышке среднего мозга (тегментум, VTA) и в различных ядрах гипоталамуса.
Нейроны черной субстанции направляют свои аксоны вперед - к конечному мозгу, где те образуют синапсы на клетках полосатого тела. Функция этих проекций состоит в поддержании общего уровня двигательной активности, обеспечении точности выполнения моторных программ, недопущении непроизвольных движений.
Проекции нейронов VTA направляются к широкому кругу корковых областей и ряду ядер базальных ганглиев. В их списке - обонятельная (древняя) кора, гиппокамп, ассоциативная и теменная кора, прилежащее ядро прозрачной перегородки (n. accumbens), миндалина. Наличие этой системы указывает на важнейшую роль дофамина в поддержании как общего уровня бодрствования, так и «тонуса» ряда важнейших центров, связанных с положительным подкреплением, эмоциями, формированием памяти, мышлением.
Дофаминергические нейроны гипоталамуса весьма разнообразны. Обладая относительно короткими аксонами, они формируют три вида проекций: к субталамическим ядрам, нейроэндокринным зонам и центрам потребностей гипоталамуса.
Несмотря на многообразие связей, большинство «точек приложения» активности дофаминергической системы собрано вокруг регуляции двигательных функций. Управление возможно как на уровне коры (ассоциативной и моторной), так и на уровне базальных ганглиев, субталамуса. Даже в продолговатом мозге одна из врожденных моторных реакций - рвотный рефлекс, находится под контролем этой медиаторной системы. Эмоции, возникающие при активации дофаминергических синапсов, также часто связаны с движениями: удовольствие, получаемое от танца и выполнения сложного спортивного упражнения, «чувство гибкости и легкости», радость от снятия усталости.
В настоящее время обнаружено 5 типов рецепторов к дофамину. Все они являются метаботропными и связаны с аденилатциклазой. Наиболее распространены и важны первый и второй типы, названные, соответственно, D1-рецепторы и D2-рецепторы.
D1-рецепторы составляют, видимо, около 3/4 всех дофаминовых рецепторов. Их действие реализуется через активацию аденилатциклазы и рост синтеза цАМФ. У человека больше всего D1-рецепторов в полосатом теле; далее в порядке убывания следуют бледный шар, миндалина, новая кора и гиппокамп.
D2-рецепторы составляют около 1/5 всех дофаминовых рецепторов. Их влияние реализуется через торможение аденилатциклазы и снижение синтеза цАМФ. Больше всего D2-рецепторов также в полосатом теле; далее следуют бледный шар, миндалина, гиппокамп, таламус и новая кора. По общему мнению, несмотря на меньшую встречаемость, роль D2-рецепторов в ЦНС более значима. Именно через них преимущественно действуют большинство применяемых в клинике нейролептиков - препаратов, устраняющих психотические симптомы (избыточную активность, бред, агрессивность и т.п.).
Агонисты дофаминовых рецепторов не всегда проявляют специфичность по отношению к D1 и D2-типам. Таков, например, апоморфин, используемый как препарат, вызывающий рвоту. Его применяют в ситуациях пищевого отравления, когда по каким-либо причинам промывание желудка провести невозможно. Используют апоморфин и для выработки условнорефлекторной отрицательной реакции на алкоголь (при лечении алкоголизма). Избирательный агонист D2-рецепторов бромокриптин (синоним - парлодел) применяется для подавления послеродовой лактации. Предложен он и для использования при паркинсонизме, а также для ослабления двигательных нарушений, вызываемых нейролептиками. В относительно больших дозах бромкриптин вызывает у экспериментальных животных двигательные стереотипии (вращения, отряхивания, навязчивое принюхивание и т.п.).
Антагонисты дофаминовых рецепторов относят к группе нейролептиков. Первым открытым нейролептиком стал аминазин (иначе - хлорпромазин). Произошло это в начале 50-х годов, и с тех пор вся история психиатрии делится на два периода - до начала применения аминазина и после. Применение нейролептиков позволяет контролировать самые сложные типы психопатологии – психозы и шизофрению, часто сопряженные с опасностью больного для окружающих и самого себя (сильное возбуждение, в том числе маниакальное, агрессия, страхи, расстройства сознания и т.п.). Именно поэтому второе название нейролептиков - антипсихотические препараты.
Аминазин и сходные с ним соединения (относятся к химической группе фенотиазинов) являются антагонистами не только дофаминергических, но и центральных норадренергических рецепторов. В связи с этим, кроме ослабления психотических проявлений, они вызывают также очень характерное снижение общего уровня активности ЦНС. Конкретнее, введение аминазина вызывает уменьшение двигательной активности, эмоциональную обедненность (индифферентность), у больного запаздывают реакции на внешние стимулы. При этом, однако, не наблюдается помрачения сознания и нарушения мышления. Большие дозы фенотиазинов создают фон для легкого развития дремотного состояния, способны вызвать депрессию и двигательные расстройства, сходные с проявлениями паркинсонизма. Более отдаленными последствиями их хронического применения являются вегетативные (снижение артериального давления) и эндокринные расстройства.
Следующим шагом в поисках более избирательно действующих нейролептиков стало открытие бутирофенонов. Их наиболее известным представителем является галоперидол - специфических антагонист D2-рецепторов. Именно эта избирательность позволяет галоперидолу, эффективно блокируя маниакальные состояния, острый бред и т.п., не в столь явной форме вызывать у больных состояние вялости и апатии. Вместе с тем, сходные с паркинсоническими двигательные расстройства вполне могут проявляться, что требует соответствующей фармакологической коррекции (например, с помощью бромокриптина). Существуют и другие группы нейролептиков, обладающие, как правило, еще более «мягким» действием. Выбор конкретного препарата обуславливается тяжестью патологии, ее остротой, необходимостью хронического или периодического применения, индивидуальной переносимостью и т.п.
С данными о преимущественно дофаминергической природе активности нейролептиков перекликаются представления о важной роли данной медиаторной системы в генезе, прежде всего, шизофрении. Посмертный анализ мозга больных показывает значительное увеличение связывания антагонистов дофамина в различных структурах переднего мозга. Это, в свою очередь, обусловлено повышением плотности дофаминовых рецепторов - D2 и D4. В целом происходящие патологические изменения, не затрагивая процессы синтеза и выброса дофамина, значительно (вернее, избыточно) повышают чувствительность к нему постсинаптической мембраны. Впрочем, генез шизофрении (как и сама симптоматика этой наиболее «человеческой», затрагивающей сферу мышления психопатологии) очень сложен и явно не ограничивается каким-либо одним механизмом. Кроме увеличения числа дофаминовых рецепторов вклад в развитие заболевания, видимо, вносят изменение активности МАО, ослабление функции глутаматергической системы в лобной коре и другие факторы. Исходя из этого фармакологическая коррекция симптомов шизофрении может производиться путем сочетания (комбинации) сразу нескольких воздействий на более чем одну медиаторную систему мозга.
Целью данной работы является наблюдение за двигательными изменениями, вызываемыми у белых крыс введением различных доз галоперидола. Эти изменения количественно оцениваются с целью выявления их выраженности и специфики. Анализ поведения животных осуществляется в нескольких стандартных тестах: «Темно-светлая камера», «открытое поле» и «вертикальная сетка».
За 30 минут до помещения в «Темно-светлую камеру» животным контрольной группы внутрибрюшинно вводится растворитель (вода для инъекций) из расчета 1 мл/кг; животным опытных групп - аналогичные объемы раствора галоперидола (дозы 0.1 и 0.5 мг/кг). Крысы контрольной и опытных групп тестируются поочередно (рекомендуемый интервал – 10 мин).
После теста «Темно-светлая камера» проводятся тесты «открытое поле» и «вертикальная сетка».
План эксперимента (для каждого животного):
0 мин – инъекция галоперидола (или растворителя);
30 мин – тест «Темно-светлая камера» (продолжительность 3 мин);
40 мин –тест «открытое поле со сменой освещенности» (продолжительность 4 мин- 2 мин яркий свет, затем 2 мин красный свет);
50 мин – тест «вертикальная сетка».
В интервалах между тестами крыса находится в индивидуальной отсадке.
Тест “Темно-светлая камера ”
Экспериментальная камера (48х24х40 см) разделена на 2 равных отсека перегородкой с отверстием. Один отсек ярко освещен, другой – затемнен. Крысу помещают в освещенный отсек и регистрируют латентный период перехода в темный отсек камеры, а также суммарное время, проведенное в светлом отсеке за 3 мин тестирования.
· латентные периоды (ЛП) захода в темный отсек;
· суммарное время на свету;
· ЛП первого выхода на свет из темного отсека;
· ЛП второго захода в темный отсек;
· количество заходов в темноту;
· количество стоек в светлом и темном отсеках;
· количество выглядываний из темного отсека;
· количество заглядываний в темный отсек из светлого;
· груминг (количество умываний) в светлом и темном отсеках.
· количество дефекаций
Установка "Темно-светлая камера" предназначена для изучения поведения грызунов в условиях переменной стрессогенности (при свободном выборе комфортных условий) и позволяет оценить: предпочтение темноты и света; выраженность и динамику поведения "выглядывания"; привыкание (habituation). Метод позволяет оценить баланс исследовательской и оборонительной мотиваций грызунов – то есть уровень их тревожности.
Согласно руководству по доклиническому изучению новых фармакологических веществ оценка поведения крыс и мышей в темно-светлой камере входит в перечень исследований, доказывающих наличие анксиолитической активности у изучаемого соединения. Обычно транквилизаторы увеличивают число переходов из одного отсека в другой и время нахождения в светлом отсеке.
Темно-светлая камера также необходима для типирования животных (по предпочтению темноты и света) перед проведением тестирования в приподнятом крестообразном лабиринте.
При обработке данных вычисляют отдельно для опытных и контрольной групп: средние величины и разбросы 1-го ЛП выхода в светлый отсек; время, проведенное в открытых отсеках и в каждом из закрытых отсеков (с учетов ЛП выходов и заходов в отсеки); количество выходов в открытые отсеки; количество свешиваний из открытых и закрытых отсеков отдельно; число стоек на открытых и закрытых отсеках отдельно; количество выглядываний из закрытых отсеков.
Тест «открытое поле».
Тест «открытое поле» (ОП, open field test) изначально был предназначен для разделения крыс на группы по двигательной активности и эмоциональности. Такое группирование необходимо, например, в опытах по генетике поведения. Позднее ОП стало использоваться в фармакологии для анализа воздействия различных химических и физических агентов на поведение грызунов, а именно, на уровень двигательной активности (5-30 минут при красном свете), а также баланс исследовательской деятельности и оборонительной мотивации в условиях неизбегаемого яркого освещения. В последнем случае смена яркого света на красный активирует исследовательскую реакцию животных.
Используемое ОП представляет собой круглую пластиковую арену диаметром 100 см с высокими стенками и полом, расчерченным двумя концентрическими окружностями, находящимися на равном расстоянии друг от друга и от края арены, и отрезками прямых, делящими поле на 19 равных по площади областей. Кроме того, на линиях и в центре арены расположены норки (13 штук).
В начале опыта включают яркий свет, включают видеозапись, крысу помещают в центр арены. Каждое животное тестируется в течение 4-х минут, из них первые 2 мин при ярком свете, затем 2 мин при красном свете. Красная (15 Вт) и яркая (> 100 Вт) лампы подвешены над центром арены; при включении яркой лампы красная не выключается.
Во время опыта оценивают по минутам следующие показатели:
· горизонтальную двигательную активность (по числу пройденных секторов);
· вертикальную двигательную активность (число стоек);
· число радиальных перемещений с пересечением внешней окружности (отходы от стенки арены – выходы 1);
· число радиальных перемещений с пересечением внутренней окружности (выходы в центр арены – выходы 2);
· число обследованных норок.
Также отмечают латентный период (ЛП) первого выхода из центра, когда животное всеми лапами пересекает внутреннюю окружность.
При обработке данных вычисляют для опытных и контрольной групп отдельно за каждую минуту и за все время тестирования средние величины и разбросы горизонтальной двигательной активности, количества стоек, отходов от стенки арены и выходов в ее центр, количества обследованных норок, ЛП выхода из центра.
Тест «Вертикальная сетка».
Экспериментальная установка представляет собой проволочную сетку с ячейками 1,5х1,5 мм, площадью 30х60 см. Сверху и с боков сетка ограничена деревянными стенками. Установку располагают на краю стола, под сеткой находится коробка с опилками. При тестировании животное помещают на сетку и регистрируют время, прошедшее с момента посадки на сетку до момента падения с нее (не более 3 минут). Каждую крысу тестируют 3 раза (с интервалом 1 мин), при обработке данных полученные результаты усредняют.
Для каждой группы вычисляется среднее время и разбросы:
· удержания на сетке при каждой попытке (1-й, 2-й и 3-й);
· среднее время удержания по всем попыткам;
· среднее минимальное время удержания;
· среднее максимальное время удержания.
На основе результатов обработки составляются таблицы усредненных данных эксперимента (примеры см. ниже) и строятся соответствующие графики.
В ходе статистического анализа с применением параметрических и непараметрических критериев:
1) оцениваются отличия опытных и контрольных групп по всем параметрам и на всех стадиях тестирования с использование критериев для независимых выборок, а также ANOVA-метода; с использованием корреляционных методов оценивается дозозависимость эффектов галоперидола.
2) выявляются поведенческие показатели, значимо изменяющиеся в ходе эксперимента (в случае «открытого поля» - по минутам; в случае «вертикальной сетки» - по попыткам; анализ проводится для каждой группы отдельно с использованием парных критериев; могут быть обнаружены угасание ориентировочной реакции, стрессогенное влияние яркого света, признаки выработки навыка удержания на сетке и т.п.;);
3) с использованием корреляционных методов рассчитывается взаимосвязь поведенческих показателей, зарегистрированных в разных тестах в контроле и опыте отдельно (например, пробега в «открытом поле» и времени удержания на сетке).
Отчет о проделанной работе включает:
- краткое теоретическое введение;
- описание методики;
- таблицы протоколов экспериментов, таблицы усредненных данных со статистическим сравнением групп, графики с подрисуночными подписями, текст с описанием результатов.
- выводы из данных и их обсуждение.
Литература:
· Регуляторные системы организма человека (Дубынин В.А., Каменский А.А.)
· Харкевич Д.А. Фармакология.
· Физиология человека (Шмидт Р., Тевс Г.). Том 1. Глава по двигательным системам.
Пример таблицы для проведения эксперимента.
| 14.06.2015 | |||||||
| № крысы | Вес,кг | группа | укол | ТС | ОП | сетка | |
| контроль | 0,00 | 30,00 | 40,00 | ||||
| галоперидол 0,1 | 10.00 | 40.00 | 50.00 | 60.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 20.00 | 50.00 | 60.00 | 1:10.00 | |||
| контроль | 30.00 | 60.00 | 1:10.00 | 1:20.00 | |||
| галоперидол 0,1 | 40.00 | 1:10.00 | 1:20.00 | 1:30.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 50.00 | 1:20.00 | 1:30.00 | 1:40.00 | |||
| контроль | 60.00 | 1:30.00 | 1:40.00 | 1:50.00 | |||
| галоперидол 0,1 | 1:10.00 | 1:40.00 | 1:50.00 | 2:00.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 1:20.00 | 1:50.00 | 2:00.00 | 2:10.00 | |||
| контроль | 1:30.00 | 2:00.00 | 2:10.00 | 2:20.00 | |||
| галоперидол 0,1 | 1:40.00 | 2:10.00 | 2:20.00 | 2:30.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 1:50.00 | 2:20.00 | 2:30.00 | 2:40.00 | |||
| контроль | 2:00.00 | 2:30.00 | 2:40.00 | 2:50.00 | |||
| галоперидол 0,1 | 2:10.00 | 2:40.00 | 2:50.00 | 3:00.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 2:20.00 | 2:50.00 | 3:00.00 | 3:10.00 | |||
| № крысы | Вес, кг | группа | укол | ТС | ОП | сетка | |
| контроль | 0,00 | 30,00 | 40,00 | ||||
| галоперидол 0,1 | 10.00 | 40.00 | 50.00 | 60.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 20.00 | 50.00 | 60.00 | 1:10.00 | |||
| контроль | 30.00 | 60.00 | 1:10.00 | 1:20.00 | |||
| галоперидол 0,1 | 40.00 | 1:10.00 | 1:20.00 | 1:30.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 50.00 | 1:20.00 | 1:30.00 | 1:40.00 | |||
| контроль | 60.00 | 1:30.00 | 1:40.00 | 1:50.00 | |||
| галоперидол 0,1 | 1:10.00 | 1:40.00 | 1:50.00 | 2:00.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 1:20.00 | 1:50.00 | 2:00.00 | 2:10.00 | |||
| контроль | 1:30.00 | 2:00.00 | 2:10.00 | 2:20.00 | |||
| галоперидол 0,1 | 1:40.00 | 2:10.00 | 2:20.00 | 2:30.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 1:50.00 | 2:20.00 | 2:30.00 | 2:40.00 | |||
| контроль | 2:00.00 | 2:30.00 | 2:40.00 | 2:50.00 | |||
| галоперидол 0,1 | 2:10.00 | 2:40.00 | 2:50.00 | 3:00.00 | |||
| галоперидол 0,5 | 2:20.00 | 2:50.00 | 3:00.00 | 3:10.00 | |||