Подсчет клеток в счетных камерах
Метод прямого подсчета клеток микроорганизмов в счетных камерах успешно применяют для определения общего количества микроорганизмов, содержащихся во взвесях (суспензиях).
Известны счетные камеры разных конструкций (Горяева, Фукс - Розенталя, Петрова - Хауссера, Тома - Цейса и др.).
Метод количественного учета микроорганизмов с помощью счетных камер имеет ограничения применения, связанные с тем, что в счетных камерах проводится учет всех клеток микроорганизмов без их дифференциации на живые и мертвые клетки. Кроме того, счетные камеры могут быть использованы лишь для подсчета относительно крупных объектов –клеток водорослей, дрожжей, спор грибов, микроскопируемых при объективе от 8 до 40´.
В качестве примера можно привести камеру Горяева, которая внешне представляет собой толстое предметное стекло, разделенное поперечными бороздками, образующими три поперечно расположенные плоские площадки (рисунок 1 а). Средняя площадка продольным прорезом разделена пополам, причем на каждой половине нанесена квадратная сетка. Две боковые площадки расположены на 0,1 мм выше средней, они служат для притирания покровного стекла (рисунок 1 б).
Сетка разделена на определенное число больших и маленьких квадратов, по-разному сгруппированных. Постоянной величиной во всех сетках является маленький квадрат АВСD (рисунок 1 в), сторона которого равна 1/20 мм, площадь его –1/400 мм², а объем при высоте камеры 1/10 мм –1/4000 мм³ или 1/4000000 мл. Так называемый большой квадрат АВСD состоит из 16 малых квадратиков. Камера Горяева имеет площадь 9 мм², объем камеры 9 мм³ и разбита на 225 больших квадратов (15 рядов по 15 больших квадратов в каждом ряду).
а –вид сверху;б –вид сбоку;
в –вид при малом увеличении; h –высота камеры
Рисунок 1 –Счетная камера Горяева