Методические указания по теме
О санитарно-гигиеническом состоянии молока можно судить по загрязнению его механическими примесями, по количественному содержанию бактерий, характеру микрофлоры, кислотности, наличию возбудителей инфекционных заболеваний и т. д.
Для определения содержания микроорганизмов в молоке обычно применяют следующие прямые (метод посева на питательные среды; непосредственный подсчет микроорганизмов под микроскопом) и косвенные методы (редуктазная проба).
5.1.1 Определение общего количества бактерий в молоке
методом посева
Вначале готовят разведения (10-1–10-6), для чего из отобранной пробы молока стерильной пипеткой берут 1 мл и переносят в пробирку с 9 мл стерильной водопроводной воды (технику приготовления разведений см. в п. 2.1.1). Далее из разведений 10-4, 10-5 и 10-6 берут отдельной стерильной пипеткой по 1 мл суспензии, вносят в стерильные чашки Петри, а затем вносят 10 мл расплавленного и охлажденного до 50 ºС МПА. Суспензию с агаром перемешивают и чашки Петри с посевом помещают в термостат при температуре 30 ºС. После двухдневной инкубации подсчитывают колонии бактерий в чашках. Для подсчета общего количества бактерий в 1 мл общее количество колоний, выросших в бактериологической чашке, умножают на соответствующее разведение.
5.1.2 Подсчет микроорганизмов в мазках из молока методом
Брида
5.1.2.1 На предметном стекле восковым карандашом наносят квадрат площадью 2×2 см (400 мм² ).
5.1.2.2 Микропипеткой в центр квадрата вносят 0,01 мл испытуемого молока и равномерно распределяют его в пределах квадрата, т. е. готовят мазок с известной площадью.
5.1.2.3 Мазки подсушивают на воздухе, фиксируют и обезжиривают от 10 до 15 минут в спирт-эфире.
5.1.2.4 Мазок окрашивают 2...3 минуты водным 2%-ным раствором метиленовой синьки, промывают и высушивают фильтровальной бумагой.
5.1.2.5 Проводят расчет количества микробов, содержащихся в одном миллилитре испытуемого молока:
–определяют, сколько полей зрения придется на площадь мазка, учитывая, что площадь поля зрения иммерсионного объектива равна 0,02 мм². Для этого площадь мазка делят на площадь иммерсионного объектива 400 мм²: 0,02 мм² = 20000 полей зрения;
–определяютсколько микроорганизмов содержится в мазке, приготовленном из молока: среднее количество бактерий, содержащихся в одном поле зрения иммерсионного объектива, умножают на количество полей зрения, укладывающихся в мазке (20000 полей зрения);
–так как мазок приготовлен из 0,01 мл молока, то в 1 мл их содержится в 100 раз больше.
Определение количества микроорганизмов в молоке