Технология получения вирусных энтомопатогенных препаратов

Из всех энтомопатогенных препаратов вирусные обладают наибо­лее высокой специфичностью по отношению к насекомому-хозяину. Они поражают обычно не более одного вида. Их ярко выраженная видоспецифичность обусловливает практически полную безвредность вирусных препаратов для человека, флоры и фауны. Вирусы отличает высокая устойчивость к неблагоприятным воздействиям окружающей среды (температуре, влажности), они способны сохранять свою актив­ность в течение 10—15 лет, находясь вне насекомого.

Заражение происходит при питании вредителя. Попавшие в ки­шечник тельца-включения при щелочных значениях рН разрушают­ся. Освобожденные вирионы проникают через стенку кишечника в восприимчивые клетки, в ядрах которых осуществляется репликация вирусов. Высвободившись, они заражают другие клетки, что в итоге приводит к гибели личинок насекомого.

Отличительной особенностью вирусов является то, что они могут размножаться только в живой ткани. Это создает определенные труд­ности в организации промышленного производства таких энтомопа-тогенов, так как технология размножения вирусов должна быть свя­зана с использованием живых насекомых-хозяев. Последнее пред­ставляет собой достаточно трудоемкий процесс.

В СССР в 80-е гг. прошлого века осуществлялся выпуск трех вирусных энтомопатогенных препаратов: вирин-ЭКС (против капуст­ной совки), ЭНШ (против непарного шелкопряда) и АББ (против американской белой бабочки).

Производство любого из вирусных препаратов начинают с разве-


деиия насекомого-хозяина на искусственных питательных средах, обес­печивающих их физиологически здоровое состояние. На определен­ной стадии развития (обычно на стадии гусеницы) насекомых зара­жают, добавляя вирусную суспензию к корму. При этом инокулят предварительно получают от нескольких больных личинок.

После заражения насекомых выдерживают в строго определенных условиях, обеспечивающих максимальное накопление вируса в их тка­нях. Через 7 — 9 сут собирают мертвые и отмирающие личинки, под­сушивают их при 33 — 35 °С, измельчают механическим способом для вывода телец-включений из тканей. К полученной массе добавляют физиологический раствор или дистиллированную воду из расчета 1 мл на гусеницу, взвесь измельченных тканей фильтруют.

При производстве препарата вирии-ЭКС полиэдры осаждают из фильтрата центрифугированием. Осадок суспендируют в минималь­ном количестве дистиллированной воды и добавляют в него предвари­тельно простерилизованный глицерин до титра 1 млрд полиэдров в 1 мл. Готовый препарат разливают во флаконы в количестве, соответ­ствующем одной или нескольким гектариым нормам.

Данная технология позволяет увеличить количество полиэдров в 5 — 10 тыс. раз по сравнению с расходом инокулята. С одной гусени­цы в среднем удается получить до 36 млрд полиэдров, что составляет около 30 % ее сухой массы.

При производстве препарата вирин-ЭНШ в фильтрат добавляют лактозу, а после перемешивания — ацетон в соотношении 4 : 1 объему суспензии. После отстаивания иадосадочиую жидкость сливают, а оса­док подсушивают до полного удаления ацетона. При изготовлении готовой формы препарата в виде дуста сухой осадок смешивают с мелкодисперсным наполнителем — каолином или бентонитом — до получения титра 1 млрд полиэдров в 1 г. Масляную форму вирин-ЭНШ готовят путем диспергирования осадка в предварительно про-стерилизованном 50%-м растворе глицерина до титра 2 млрд полиэд­ров в 1 мл, потом стерильно добавляют равный объем солярового масла, перемешивают и разливают во флаконы.

Вирусные энтомопатогенные препараты применяют путем внесения полиэдров в плотные популяции насекомых с целью возникновения в них эпизоотии. Эффект может быть значительным, если энтомопато-гепный вирус отсутствует в популяции. Данный способ обработки пред­полагает внесение небольших количеств препарата.

В другом случае путем опрыскивания или опыления проводится массированная обработка растений на зараженных участках в период рождения личинок или на ранних стадиях их развития. Эффект до­стигается после внесения значительных количеств препарата в резуль­тате однократной или повторной обработки защищаемых растений.

Если требуется защита не от одного, а от нескольких вредителей, то действие вирусных энтомопатогенных препаратов сочетают с дру­гими средствами борьбы.