МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ (ТСХ)
В ЗАКРЕПЛЕННОМ СЛОЕ
I. Цель работы:
II. Практическая часть
1. Подготовка хроматографической пластинки.
Из стандартной пластинки силуфола вырезается пластинка размером 50x90 мм (размеры могут быть и другими). Параллельно нижнему краю пластинки на расстоянии 5 мм простым карандашом, без нажима, проводится черта (стартовая линия).
2. Нанесение веществ.
Для хроматографирования предлагается двух- или трехкомпонентная смесь и ряд свидетелей.
Образец и свидетели наносятся на стартовую линию индивидуальными капиллярами в виде 1-2% раствора. Перед нанесением веществ на пластинку конец капилляра погружают в раствор (капилляр заполняется под действием капиллярных сил), затем необходимо слегка прикоснуться кончиком к сорбенту, стараясь при этом не повредить его поверхность, чтобы не вызвать некоторого искажения капли при проявлении. Расстояние между точками нанесения должно быть не менее 6-8 мм, а наносимое пятно должно быть не более 2 мм в диаметре (это требует тонкого капилляра для нанесения пробы).
После нанесения пятен пластинку оставляют на 3-5мин для удаления растворителя.
3. Разделение веществ на пластинке.
Это осуществляют в хроматографической камере, для чего пластинку с нанесенными образцами помещают в плоскодонный сосуд подходящего размера с пришлифованной крышкой (хроматографическую камеру), в которой налит растворитель (элюент) с высотой слоя 3-5 мм. Пластинку устанавливают в камере вертикально. Надо помнить, что при помещении пластинки в камеру нанесенные пробы не должны оказаться ниже уровня жидкости. Элюент, продвигаясь за счет капиллярных сил по пластинке вверх, увлекает за собой разделяемые вещества. По окончании хроматографирования пластинку вынимают, отмечают карандашом положение фронта растворителя и хроматограмму высушивают.
4. Обработка хроматограммы.
Обнаружение веществ на хроматограммах осуществляют по пятнам при хроматографировании окрашенных веществ. Если пятна на хроматограмме не окрашены и не флуоресцируют в ультрафиолетовом свете, хроматограмму опрыскивают подходящими реактивами, дающими окрашивание с соответствующими компонентами при помощи пульверизатора, или пластинку помещают в закрытый сосуд, в котором находится несколько кристалликов иода. Отмечают положение пятен на хроматограмме.
III. Данные по анализу:
| 1. Номер исследуемой смеси | ||||
| 2. Концентрация раствора исследуемой смеси (с указанием растворителя) | ||||
| 3. Используемые свидетели (с указанием концентраций растворов и растворителей) | ||||
| 4. Качественный и количественный состав элюента | ||||
| 5. Марка хроматографической пластины | ||||
| 6. Проявление (подчеркнуть) | (визуальное, в парах иода, УФ детектирование и др.) |
| Рис. пластинки ТСХ: |
|
IV. Выводы по работе:
V. Работа выполнена _________________________(подпись преподавателя).
Посуда и приборы
Хроматографическая силуфоловая пластинка, капилляры (5 штук), камера для хроматографирования, эксикатор с кристаллами иода и несколькими миллилитрами воды в том случае, если хроматограмму невозможно проявить оптическими методами.
Работа № 8
Название: МНОГОКРАТНАЯ ПРОСТАЯ ЭКСТРАКЦИЯ
ТВЕРДЫХ ВЕЩЕСТВ
I. Практическая часть
1. Собирают прибор для экстракции вещества из твердого образца – экстрактор Сокслета, состоящий из круглодонной колбы, насадки-экстрактора и обратного холодильника:
Экстрагируемый материал ( ) помещают в заранее приготовленном бумажном патроне в экстрактор. В колбу наливают необходимое количество ( мл) определенного растворителя ( ) и нагревают до кипения (теплоноситель выбирают с учетом природы и температуры кипения растворителя). Пары растворителя, поднимаясь по боковой трубке, конденсируются в обратном холодильнике, и растворитель стекает каплями на экстрагируемый материал.
Когда экстрактор заполнится растворителем до уровня сгибаемой трубки сифона, экстракт сбрасывается по сифону в круглодонную колбу и процесс повторяется. Таким образом, экстрагируемый материал каждый раз обрабатывается порцией чистого растворителя, а экстрагируемое вещество скапливается в колбе.