Микробиологическая диагностика поражений ЦНС при вирусном паротите
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: спинномозговая жидкость (собирают в стерильный контейнер и сохраняют при +4 °С не более 48 ч). При необходимости более длительного хранения материал замораживают и хранят при —70 "С.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Вирусологическое исследование.Выделение чистой культуры вируса из спинномозговой жидкости является ведущим методом диагностики поражений ЦНС при вирусном паротите (см. главу 21).
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохимические и молекулярно-биологические исследования.Иммунохимические исследования. Методы обнаружения антигенов возбудителя в исследуемом материале — см. главу 21.
Молекулярно-биологические исследования. Вирусные НК в исследуемом материале обнаруживают с помощью ПЦР или метода ДНК-зондов.
Микробиологическая диагностика поражений ЦНС, вызванных вирусом кори
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: спинномозговая жидкость, биоптат тканей ЦНС.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Цитологическое исследование.Спинномозговую жидкость центрифугируют, из осадка, содержащего слущенные клетки, готовят мазки. Мазки или препараты тканей головного мозга окрашивают по методу Романовского—Гимзы. В положительном случае удается обнаружить признаки ЦПД — гигантские многоядерные клетки, часто содержащие внутрицитоплазмати-ческие включения. В поздних стадиях заболевания, а также при хронических формах инфекции (в частности, подостром скле-розирующем панэнцефалите — ПСПЭ) типично появление внутриядерных включений. Метод обладает низкой чувствительностью и специфичностью.
Вирусологическое исследование.Вирус кори с трудом удается культивировать in vitro, поэтому выделение чистой культуры возбудителя из исследуемого материала редко применяют с диагностической целью (см. главу 21). Другой причиной является низкое содержание вируса в спинномозговой жидкости. Необходимо помнить, что при ПСПЭ в организме персисти-рует дефектный вирус, который не удается культивировать с помощью стандартных методов. В этом случае применяют метод совместного культивирования клеток ткани мозга или периферической крови пациента с культурой клеток, чувствительных к вирусу. Исследование занимает не менее 1 мес. Присутствие вируса определяют по ЦПД и путем выявления его антигенов методом ИФ.
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молекулярно-биологические исследования.Иммунохимические исследования. Присутствие антигенов вируса в клетках био-птата мозга и слущенных клетках спинномозговой жидкости выявляют методом ИФ (см. главу 21). Необходимо иметь в виду, что отрицательный результат исследования не исключает заболевания, что объясняется малым содержанием вируса в клетках спинномозговой жидкости и сравнительно низкой чувствительностью метода. Присутствие вирусных белков (анти-
генов) в исследуемом материале может быть выявлено с помощью чувствительных серологических реакций: ИФА, РИА и др.
Молекулярно-биологические исследования. Вирусные НК в исследуемом материале обнаруживают с помощью ПЦР или метода ДНК-зондов.
Серодиагностика.Обнаружение специфических противовирусных антител в спинномозговой жидкости является ведущим методом диагностики поражений ЦНС, вызываемых вирусом кори. Повышенное содержание противокоревых антител в спинномозговой жидкости является характерным для всех форм патологии ЦНС, обусловленных этим вирусом. Наличие противокоревых антител в спинномозговой жидкости определяют с помощью различных серологических реакций (см. главу 21). Методы ИФА и непрямой ИФ являются наиболее чувствительными и дают положительный результат в большинстве случаев.