Гематологические исследования при подозрении на ИНАН

1. О п р е д е л е н и е СОЭ. В пробирку Неводова (эритроседиометр) насыпают 0,03 г порошка щавелевокислого натрия (на кончике скальпеля) или наливают 1 мл 5%-ного раствора лимонного натрия. Кровь для определения в количестве 12 мл или до черты 0 берут из яремной вены. Пробирку закрывают пробкой, кровь в ней 10 – 15-кратным медленным переворачиванием перемешивают с порошком щавелевокислого натрия. Затем пробирку устанавливают вертикально и каждые 15 мин в течение первого часа отмечают уровень оседания эритроцитов. Последнюю запись делают через 25 ч. У лошадей. Больных ИНАН, СОЭ увеличена6 в первые 15 мин – 60 – 70 делений, у здоровых – 30 – 36.

2. О п р е д е л е н и е к о л и ч е с т в а г е м о г л о б и н а проводят с помощью эритроседиометра Неводова (цифры на правой стороне пробирки от 25 до 125 показывают процентное содержание гемоглобина, а цифры на левой стороне от 2 до 14 – количество эритроцитов в млн) или пользуются гемометром Сали. В градуированную пробирку наливают до метки 20 децинормальный (0,1 н.) раствор соляной кислоты. Кровь из ушной вены насасывают в капилляр до метки 20 м ³и переносят в пробирку с соляной кислотой; капилляр несколько раз промывают соляной кислотой и удаляют из пробирки, а в пробирку приливают по каплям дистиллированную воду до тех пор, пока цвет испытуемой жидкости не совпадает с цветом стандарта, после этого с помощью нанесенных на пробирке делений по верхнему уровню жидкости определяют процентное содержание гемоглобина.

У лошадей, больных ИНАН, количество гемоглобина по сравнению со здоровыми лошадьми снижается на 15 – 50%.

3. П о д с ч е т э р и т р о ц и т о в и л е й к о ц и т о в. Меланжеры, или смесители, - это капиллярные трубочки с делениями. Меланжер с цифрами 0,5; 1,0; 101 предназначены для подсчета эритроцитов; меланжер с цифрами 0,5; 1,0; 11 – для подсчета лейкоцитов. Кровь берут из ушной вены. Для подсчета эритроцитов ее набирают до метки 0,5 или 1,0. Затем в этот же меланжер набирают до метки 101 3%-ный раствор хлористого натрия. Для подсчета лейкоцитов кровь набирают до метки 0,5 или 1,0. В этот же меланжер набирают до метки 11 1%-ный раствор уксусной кислоты (подкрашенный 3 каплями 1%-ного раствора генцианвиолета).

После заполнения меланжера концы его зажимают между большим и указательным пальцами и плавным движением смешивают кровь с жидкостью.

Число эритроцитов можно определить и с помощью обыкновенной пробирки. В нее насыпают 0,05 г лимоннокислого натрия и наливают 10 мл крови, взятой из яремной вены. Перемешав содержимое, пробирку ставят в штатив и через 24 ч учитывают результат – высоту столба эритроцитов в миллиметрах умножают на коэффициент 216000. Произведение показывает число эритроцитов в 1 мм ³ крови. При ИНАН число эритроцитов снижается.

4. П о д с ч е т л е й к о ф о р м у л ы и и с к л ю ч е н и е к р о в е п а р а з и т а р н ы х б о л е з н е й. Мазки крови фиксируют, окрашивают и под микроскопом определяют лейкоцитарную формулу. У больных ИНАН лошадей количество лимфоцитов в формуле белой крови увеличено.

Отчёт

Задание №1

Клинический осмотр	Место введения	Доза	Время учёта	Повторное введение	Результат

Задание №2 а)

Последовательность клинического осмотра	Характеристика

Задание №2 б)

Клиническое состояние	Спокойное состояние	Пробег	Индекс серд. возб.

Задание №2 в).

Клиническое состояние	СОЭ	Количество гемоглобина	Количество эритроцитов	Количество лейкоцитов
Здоровое животное









Больное животное

Вывод:_________________________________________________________________________

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Дата ____________________ Подпись преподавателя __________________________________

Лабораторная работа № 11.

Тема: Болезни птиц. Ознакомление с техникой вакцинации при оспе, болезни Ньюкасла и др.

Цель занятия: Освоение методов введения биопрепаратов при болезнях птиц.

Литература:И.А. Бакулов. Эпизоотология с микробиологией. с. 434 – 435.

Задание № 1. Изучить методику кровекапельной реакции агглютинации.

Задание № 2. Ознакомиться с биопрепаратами применяемых при оспе птиц.

Задание № 3. Ознакомиться с биопрепаратами применяемыми при болезни Ньюкасла.

Задание № 4. Ознакомиться с биопрепаратами применяемыми при сальмонеллезе птиц.

Методика выполнения.

Диагностика пуллороза птиц реакцией агглютинации с каплей крови (ККРА).Цветной антиген для кровекапельной реакции выпускают в виде жидкости фиолетового цвета. Перед употреблением его тщательно взбалтывают. Температура помещения, где проводят исследование, не должна быть ниже 18*С.

На предметное стекло глазной пипеткой наносят две капли антигена. Кровь берут у птиц из гребня или подкрыльной вены путем укола или надреза. Каплю крови вносят в каплю антигена (соотношение крови и антигена 1:2). Смешивают кровь с антигеном покачиванием предметного стекла на грелке – качалке при температуре 35 – 37*С. П о л о ж и т е л ь н а я р е а к ц и я – появление хорошо заметных фиолетовых хлопьев и просветление смеси антигена с кровью в срок от нескольких секунд до двух минут; с о м н и т е л ь н а я р е а к ц и я – отсутствие или слабовыраженное просветление и появление зернистости или небольшого количества хлопьев; о т р и ц а т е л ь н а я р е а к ц и я – отсутствие хлопьев и просветления среды в капле крови.

Применение эритроцитарного антигена (ККРНГА).Пуллорный эритроцитарный антиген для кровекапельной реакции непрямой гемагглютинации – жидкость коричневого цвета, содержащая сенсибилизированные эритроциты.

Исследуют птицу в возрасте 50 – 55 дней и повторно в 7 мес. Каплю крови на предметном стекле смешивают с каплей антигена (соотношение 1:1) покачиванием предметного стекла на грелке – качалке при 37 – 40*С.

П о л о ж и т е л ь н а я р е а к ц и я – в течение 2 мин в смеси крови с антигеном выпали хорошо заметные хлопья коричневого цвета; с о м н и т е л ь н а я р е а к ц и я – слабовыраженные мелкозернистые хлопья коричневого цвета; о т р и ц а т е л ь н а я р е а к ц и я – равномерная стабильная гомогенная взвесь эритроцитов.

Положительно и сомнительно реагирующих птиц убивают.

Применение эмбрионвирусакцины из голубиного вируса против оспы птиц.Вакцина оспы птиц – высушенный вирус оспы голубей, культивированный на куриных эмбрионах. Вместе с вакциной для ее разведения прилагают флаконы с 25%-ным раствором глицерина на физрастворе. Вакцину применяют в неблагополучных и угрожаемых по оспе птиц хозяйствах. Вакцинируют кур, индеек, фазанов и цесарок, начиная с 25-дневного возраста. Прививают только клинически здоровую птицу. Перед обработкой содержимое ампулы высыпают в стерильную ступку, растирают пестиком и разводят раствором глицерина в количестве, указанном на этикетке. С наружной стороны голени выщипывают перья на площади 5 – 6 см²(20 – 25 перьев фолликул), наносят 2 – 3 капли вакцины и в этот участок кожи с помощью коротко остриженной волосяной щеточки или стеклянной палочки с шероховатой поверхностью втирают разведенную вакцину. Инструменты для втирания должны быть предварительно прокипячены. Втирать вакцину следует осторожно, без травматизации кожи, но достаточно энергично. Всю вакцинированную птицу просматривают через 7 – 9 дней. Реакция на вакцину выражается в припухании и покраснении фолликул. Птицу, не давшую реакцию, вакцинируют повторно. Иммунитет наступает через 15 – 20 дней после вакцинации и сохраняется до 3 месяцев у молодняка и до 6 месяцев у взрослой птицы. Ревакцинацию птицы проводят в сроки, указанные в наставлении.

Техника прививок птиц против ньюкаслской болезни.Занятия проводят в птицеводческих хозяйствах (птицефабриках) или клинике техникума. Преподаватель объясняет и показывает способы применения различных вакцин против ньюкаслской болезни студенты разбиваются на группы по 3 человека; они самостоятельно подготавливают вакцины и вакцинируют птицу (при прививках в условиях неблагополучного хозяйства студентам дают соответствующие вакцины, в остальных случаях вместо биопрепаратов применяют стерильный физраствор). В заключение студенты составляют акт на проведенную вакцинацию.

Сухую вирус-вакцину против ньюкаслской болезни птиц из штамм В1 применяют с профилактической целью в хозяйствах, благополучных по ньюкаслской болезни. Прививают только клинически здоровую птицу по схемам, приведенным в наставлении по применению этой вакцины. Вирус-вакцину применяют интраназально или аэрозольно. Содержимое одной ампулы (500 назальных доз) растворяют в 50 мл дистиллированной воды. Две капли разведенной вакцины из глазной пипетки закапывают в ноздри птицы, при этом другую ноздрю закрывают пальцем, чем достигается более глубокое введение вакцины в носовую полость. Иммунитет наступает к 8 – 10-му дню.

Сухую вирус-вакцину против ньюкаслской болезни птиц из штамма Ла-Сота применяют в неблагополучных и неблагополучных по этой болезни хозяйствах по соответствующим схемам, приведенным в наставлении по применению этого препарата. Вакцину вводят интраназально, аэрозольно или путем выпаивания. Для этого содержимое одной ампулы разводят в 1 л кипяченой воды. Разведенную вакцину дают птице на одну выпойку из расчета по 5 мл на одного цыпленка до 25-дневного возраста, по 7.5 мл до 45-дневного возраста, по 10 мл старше 45-дневного возраста и по 15 мл взрослой птице. Иммунитет наступает на 8 – 10-й день.

Вирус - вакцины против ньюкаслской болезни из штаммов В1 и Ла-Сота применяют аэрозольным методом в соответствии со специальными наставлениями.

Вакцинация птиц поливалентной вакциной против сальмонеллеза и колибактериоза птиц. Вакцину применяют с профилактической целью водоплавающей птице (молодняку с 7 – 10-дневного возраста и взрослой птице перед яйцекладкой), а также голубям. Вводят вакцину подкожно в дозах (мл):

	Молодняку	Взрослой птице
1-й раз	2-й раз	3-й раз	1-й раз	2-й раз	3-й раз
Водоплавающая птица	0,25 - 0,5	0,5 - 1,0	-	0,5 – 1,0	1,0 – 1,5	1,5 – 2,0
Голуби	0,25	0,25 – 0,5	-	0,5 – 1,0	1,0 – 1,5	-

Отчёт

Задание №1

Вид птицы, возраст птицы	Название антигена	Соотношение крови и антигена	t⁰ проведения реакции	Результат

Задание №2

Название биопрепарата	Вид птицы	Возраст птицы	Ревакци-нация	Метод введения	Доза, мл	Имму-нитет

Задание №3

Название биопрепарата	Вид птицы	Возраст птицы	Метод введения	Доза, мл	Ревак-цинация	Имму-нитет

Задание №4

Название биопрепарата	Вид птицы	Возраст птицы	Метод введения	Доза, мл	Ревак-цинация	Имму-нитет

Вывод:_________________________________________________________________________

Дата ____________________ Подпись преподавателя __________________________________