Работа № 1. Определение содержания общего ХС в сыворотке крови

Принцип метода - основан на реакции Златкис-Зака. Холестерин при взаимодействии с хлоридом железа ( +3) в присутствии смеси серной, фосфорной и уксусной кислот образует окрашенный продукт, оптическая плотность его раствора пропорциональна концентрации холестерина.

Ход работы: В двух чистых пробирках приготовить растворы – опыт (оп) и стандарт (ст), как указано в таблице № 1.

Таблица № 1.

Реагенты	Объем пробы оп (мл)	Объем пробы ст (мл)
Стандартный р-р ХС	-	0,2
Сыворотка крови	0,2	-
Уксусная к-та (лед)	3,0	3,0
Рабочий р-р FeCI₃	2,0	2,0

Содержимое пробирок перемешать и инкубировать при комнатной температуре 15 минут, затем определить оптическую плотность против воздуха, используя зеленый светофильтр.

Расчет концентрации холестерина провести по формуле:

С_{ХС =}Е_ОП/Е_СТ^. 1,29 ммоль/л ( или 50 мг%)

Содержание общего холестерина колеблется в пределах 3,6 – 6,7 ммоль/л; рекомендуемые значения < 5,2; пограничные 5,2 – 6,5; повышенные > 6,5 ммоль/л.

Клинико-диагностической значение: Исследование уровня ХС в сыворотке крови не даёт точной диагностической информации о конкретном заболевании, а лишь отражает патологию обмена липидов в организме. Его содержание исследуется для уточнения диагноза типа липидемии, а также для расчёта коэффициента атерогенности (см. ниже) и прогноза развития коронарного артериосклероза.

Гиперхолестеринемия -повышенный уровень ХС - наблюдается при IIа, IIб, III типах липидемий, сахарном диабете, ожирении, алкоголизме, холестазе и др. Гипохолестеринемия - при голодании, синдроме мальабсорбции, гипертиреозе, онкологической кахексии, туберкулёзе, анемиях.

Вывод: В клинической практике для оценки атерогенности дислипопротеинемий пользуются расчетным индексом атерогенности( ИА) , или коэффициентом атерогенности (КА), который рассчитывается как отношение показателей.

ХС общ - ХС(ЛПВП)

И.А.( К.А) = ————————

ХС(ЛПВП )

Числитель представляет собой суммарное содержание холестерина в атерогенных фракциях ( ЛПОНП и ЛПНП )

В норме КА не должен превышать 3,3 В противном случае ставится диагноз - атеросклероз.

При нормолипидемии, чем ближе значение И.А.( КА ) к верхней допустимой границе, тем выше вероятность развития атеросклероза. Коэффициент КА позволяет выявлять клинические и доклинические стадии атеросклероза.

7 КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ: смотри задание для студентов к практическому занятию.

8. ЛИТЕРАТУРА ДЛЯ ПОДГОТОВКИ

Основная

1.Биохимия: Учебник /Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД. 2003. – 784 с.: ил. – (Серия «XXI век») С.409 -417, 439 -444..

2.Биохимия с упражнениями и задачами: Учебник/ Под. Ред чл.-корр. РАН. Проф. Е.С.Северина.-М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.-384с. С.225 - 219.

3.Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – 3-е изд., перераб. и доп. –М.: Медицина. – 2004. – 704с.

4. Биохимия .Тестовые вопросы. Учебное пособие/ Под ред. Д.М. Зубаирова, Е.А.

Пазюк.-М.: «ГЭОТАР-Медиа»2010.-960с.

Дополнительная

1.Биологическая химия:учебник / В.К.кухта, Т.С.Морозкина,Э.И.Олецкий, А.Д.Таганович. под ред. Тагановича-Минск. Агар, М.: Издательство БИНОМ,2008.-688с.

2..Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: в 2-х томах. Т. 1. Пер. с англ.: – М.: Мир, – 1993. – 384 с.

3.Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Основы общей патологии. Часть 2. Основы

патохимии (Учебное пособие для студентов медицинских ВУЗов) – СПб. – 2000. – 686 с.

4. Л.А. Данилова Анализы крови м и мочи -СПб,1999. 128 с.

Методические указания подготовлены

Доц. каф. биохимии к.х.н. Каминская Л.А.

ГОУ ВПО УГМА РОСЗДРАВА

кафедра биохимии

Утверждаю

Зав. каф. проф., д.м.н.

Мещанинов В.Н.

_____‘’_____________2010 г

Биохимия

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ДЛЯ СТУДЕНТОВ

К ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗАНЯТИЮ

Факультет: стоматологический

1 курс. 2. семестр

1. ТЕМА ЗАНЯТИЯ Биохимия липидного обмена – 5. Регуляция липидного обмена. Патология липидного обмена.

2. ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

Изучить представления о существовании уровней регуляции липидного обмена, молекулярных причинах и направлениях развития патологии липидного обмена

3. ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

3.1. Изучить значение и особенности каждого уровня биохимической

регуляции липидного обмена( центрального, межорганного,

клеточного)

3.2. Изучить молекулярные механизмы развития патологии липидного

обмена ( дислипопротеинемии, атеросклероз, стеатоз, ожирение, кахексия), направления лабораторной диагностики: исследование липидограммы, индекса атерогенности.

4. ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЗАНЯТИЯ : 2 акад. часа.

5. ЗАДАНИЕ СТУДЕНТАМ :

5 1. Сделать конспект объяснения преподавателя

5. 2 Ответить на вопросы преподавателя..

5.3. Ответить на вопросы тестового контроля