В) пересіяти частину колонії, з якої готувався препарат, на скошений МПА, для накопичення чистої культури бактерій
Матеріали та обладнання: середовище Ендо з ростом різноманітних колоній (посів з минулого заняття), бактеріальна петля, спиртівка, сірники, марлеві серветки, склограф, скошений МПА.
Порядок роботи:
Чистота культури мікроорганізмів повинна перевірятися. Цю перевірку проводять за допомогою декількох методів – візуальним, мікроскопічним контролем. Якщо після мікроскопії препарату, який був виготовлений з певної колонії, є впевненість у тому, що ця колонія утворена одним видом бактерій, то другу частину цієї колонії слід пересіяти на скошений м’ясопептонний агар (МПА). Такий пересів забезпечить накопичення чистої культури, яка надалі буде ідентифікуватися.
Пересів колонії на скошений МПА проводиться так:
1. Бактеріологічну петлю прожарте в полум'ї спиртівки, тримаючи її як олівець вертикально у правій руці. Два-три рази проведіть через полум’я і нижню третину петлетримача.
2. Лівою рукою відкрийте чашку Петрі з колоніями, що виросли.
3. Бактеріальною петлею візьміть частину потрібної колонії, не торкаючись інших.
4. Закрийте чашку Петрі.
5. Не випускаючи петлі, візьміть у ліву руку пробірку зі скошеним МПА, пробку пробірки притисніть до правої долоні та 4-м та 5-м пальцями витягніть із неї пробку.
6. Петлю з культурою опускають на дно пробірки та зробіть зигзагоподібний посів по поверхні середовища. Далі витягніть петлю із пробірки, проведіть пробку і відкритий край пробірки через полум’я спиртівки, після чого її закривають і становлять у штатив.
7. Далі петлю прожарте у полум’ї спиртівки і поставте у штатив.
8. Пробірки з посівом підпишіть та поставте у термостат на одну добу при температурі 370С.
Результати проведених маніпуляцій ІІ етапу виділення чистої культури кишкової палички з суміші бактерій внесіть до єдиного протоколу 1.
Практична робота 3. « «Виконання 2-го етапу науково-дослідної роботи - Задача 2 - Виділення культури стафілококів із слизової носа»:
А) описати культуральні властивості колоній, що виросли на ЖСА.
Матеріали та обладнання: чашка з ростом бактерій на ЖСА (посів з минулого практичного заняття).
Порядок роботи:
1. Вивчити культуральні властивості ізольованих колоній на поверхні ЖСА. Для вивчення культуральних властивостей використовувати такі ознаки: форму колонії, розмір (діаметр) колонії, поверхню колонії, профіль колонії, блиск та прозорість, колір колонії, краї колонії, структуру колонії, консистенцію колонії.
2. Результати вивчення культуральних властивостей занести до єдиного протоколу 2 (ІІ етап).
Б) Приготувати мазки з різних колоній, пофарбувати за Грамом, мікроскопувати.
Матеріали та обладнання: ЖСА з ростом бактерій (посів з минулого заняття), бактеріальна петля, барвники за Грамом, спиртівка, сірники, марлеві серветки, склограф.
Порядок роботи:
1. Приготувати фіксований препарат із суміші мікроорганізмів, дотримуючись усіх правил (див. практичну роботу 4 заняття 1) та пофарбувати його за методом Грама.
2.Результати мікроскопії (характеристику морфологічних та тинкторіальних властивостей бактерій) занести до єдиного протоколу 2 «Виділення чистої культури стафілококів із слизової носа ”.
В) Пересіяти частину колонії, з якої готувався препарат, на скошений МПА, для накопичення чистої культури бактерій.
Матеріали та обладнання: ЖСА з ростом бактерій (посів з минулого заняття), бактеріальна петля, спиртівка, сірники, марлеві серветки, склограф, скошений МПА.
Порядок роботи:
Порядок проведення пересіву колонії на скошений МПА дивитися у практичній роботі 2 пункт в.
Результати проведених маніпуляцій ІІ етапу виділення чистої культури кишкової палички з суміші бактерій занесіть до єдиного протоколу 2.
Підпис чергового студента ______________
Підпис викладача ______________________
Практичне заняття ДАТА _______________