Реакция связывания комплемента (РСК)

Титрование гемолитической сыворотки: тип реакции Реакция иммунного гемолиза

Титр гемолитической сыворотки - максимальное ее разведение, обеспечивающее полный гемолиз эритроцитов в присутствии комплемента. Рабочая доза гемолитической сыворотки в 3-4 раза выше титра.

Ингредиенты РСК: 1. исследуемая сыворотка 2. антиген - взвесь убитых бактерий 3. комплемент (сыворотка кролика или морской свинки 4. гемолитическая система состоящая из : а) гемолитической сыворотки (сыворотка кролика, иммунизированного эритроцитами барана) б) эритроцит антигена - 3% взвеси эритроцитов барана

ОСНОВНОЙ ОПЫТ РСК (изучить схему постановки)

Ингредиенты, мл пробирки
  опыт Полж. к-ль Отр. к-ль К-ль сывор К-ль антг. К-ль компл К-ль ГC
Испытуемая сыворотка в разведении 1:5 0,2 - - 0,2 - - -
Положительная сыворотка - 0,2 - - - - -
Отрицательная сыворотка - - 0,2 - - - -
Антиген 0,2 0,2 0,2 - 0,2 - -
Изотонический раствор хлорида натрия - - - 0,2 0,2 0,4 0,6
Комплемент (в рабочей дозе) 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 -
Инкубация на холоде при t - 0-4 0С в течение 18-20 час. или при t-37 0С в течение 30 минут
Гемолитическая система 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4
Инкубация при 370С в течение 20-30мин. (до гемолиза в контроле)
Результат Гем- Гем- Гем+ Гем+ Гем+ Гем+ Гем-

Вывод: Исследуемая сыворотка содержит антитела против используемого антигена

Цель применения РСК: 1.для экспресс диагностики выявления микробных антигенов (обнаружения бактерий ) в материале от больного (например при диагностике гонореи исследуется моча, секрет предстательной железы, гнойные выделения из шейки матки; 2 для выявления антител (диагностики заболеваний ) в сыворотке крови больного (например при диагностике сыпного тифа);

Применение РСК в экспресс-диагностике для выявления микробных антигенов (гонорея).

Исследуемый материал: гнойные выделения больного, содержит микробные антигены(гонококков)

Диагностические препараты: 1. антититела против бактерий (полученные иммунизацией животных)

2. комплемент (сыворотка кролика или морской свинки 3. гемолитическая сыворотка (сыворотка кролика, иммунизированного эритроцитами барана) 4. 3% взвесь эритроцитов барана

 

Применение РСК в серодиагностике сыпного тифа.

Исследуемый материал: кровь больного, содержит антитела против риккетсий Провачека – возбудителя сыпного тифа

Диагностические препараты: 1. риккетсиозный корпускулярный антиген 2. комплемент (сыворотка морской свинки) 3. гемолитическая сыворотка (сыворотка кролика, иммунизированного эритроцитами барана) 4. 3% взвесь эритроцитов барана