Фиксация молекулярного азота
Химический и биологический пути связывания молекулярного азота.
В природе существуют два пути превращения NО2 в доступную растениям форму. Это химическая и биологическая азотфиксация.
Химическое связывание N2 в форме ионов NH4+ или NO3- небольших размерах осуществляется в результате фотохимических процессов и электрических разрядов в атмоcaepe.
В настоящее время в ряде стран больших масштабов достигло промышленное производство HNO3 и NH3 из азота воздуха. Химическое связывание молекулярного азота с образованием аммиака (N2 + ЗН2 ---> 2NH3) осуществляется в присутствии катализаторов при температуре свыше 500°, давлении около 35 МПа и составляет основу синтеза аммонийных удобрений.
Азотфиксируюшие микроорганизмы.
Микроорганизмы, осуществляющие биологическую азотфиксацию, можно разделить на две основные группы: а) свободноживущие азотфиксаторы Clostridium pasteurianum, Clostridium pasteurianum и б) микроорганизмы, живущие в симбиозе с высшими растениями - ризобиум образующие клубеньки на корнях бобовых растений, а также некоторые актиномицеты и цианобактерии..
Инфицирование растения-хозяина начинается с проникновег ния бактерий рода Rhizobium в клетку корневого волоска. Затем бактерии мигрируют в клетки коры и вызывают интенсивное деление инфицированных клеток, что приводит к образованию клубеньков на корнях. При этом сами бактерии превращаются в бактероиды, которые в среднем в 40 раз больше по объему, чем исходная бактерия. Образование бактероидов тесно связано с синтезом нитрогеназной ферментативной системы.
Молекулярный механизм азотфиксации.
Молекула азота N2(N = N) чрезвычайно прочна и химически инертна. Биологическая фиксация N2 микроорганизмами осуществляется при нормальной температуре и давлении, что свидетельствует об исключительно высокой эффективности участвующего в этом процессе фермента нитрогеназы,
Азотфиксация представляет собой восстановительный процесс и первым стабильным продуктом ее действительно является аммиак.
Процессу азотфиксации необходим постоянный приток электронов и энергии в форме АТР. Источником электронов и АТР для функционирования нитрогеназы у разных типов микроорганизмов могут быть процессы фотосинтеза, дыхания или брожения. Симбиотрофные бактерии рода Rhizobium в качестве источников электронов и АТР используют фотоассимиляты, синтезирующиеся в листьях растения-хозяина и поступающие в корневые клубеньки.
Процесс протекает в бактероиде, окруженном мембраной и локализованном в кортикальных клетках корня растения-хозяина. Основная роль в процессе азотфиксации принадлежит ферменту нитрогеназы. Нитрогеназа катализирует три типа сопряженных реакций: восстановление субстратов, зависимый от восстановителя гидролиз АТР и АТР-зависимое выделение Н2.
Поскольку нитрогеназа разрушается в присутствии 02, у азотфиксирующих микроорганизмов используется ряд механизмов для ее защиты.
Функционирующий в бактероиде цикл Кребса служит источником субстратов для окисления в электронтранспортной цепи, осуществляющей синтез АТР; обеспечивает нитрогеназу электронами через ферредоксин; поставляет кетокцслоты (а-кетоглутарат и др.), которые, реагируя с образуют аминокислоты, транспортируемые затем в клетки растения-хозяина.
Глиоксилатный цикл.
Глиоксилатный цикл можно рассматривать как модификацию цикла Кребса. Он активно функционирует в прорастающих семенах масличных растений и в других растительных объектах, где запасные жиры превращаются в сахара (глюконеогенез).
Глиоксилатный цикл локализован в специализированных микротелах — глиоксисомах. В отличие от цикла Кребса в глиоксилатном цикле в каждом обороте участвует не одна, а две молекулы ацетил-СоА и используется для синтеза янтарной кислоты. Янтарная кислота выходит из глиоксисом, превращается в ЩУК и участвует в глюконеогенезе (обращенном гликолизе) и других процессах биосинтеза.
Глиоксилатный цикл позволяет утилизировать запасные жиры, при распаде которых образуются молекулы ацетил-СоА. Кроме того, на каждые две молекулы ацетил-СоА в глиоксилатном цикле восстанавливается одна молекула NADH, энергия которой может быть использована на синтез АТР в митохондриях или на другие процессы.
18. Цикл ди – и трикарбоновых кислот (цикл Кребса).
В анаэробных условиях пировиноградная кислота (пируват) подвергается дальнейшим превращениям в ходе спиртового, молочнокислого и других видов брожений, при этом NADH используется для восстановления конечных продуктов брожения, регенерируя в окисленную форму.
Последнее обстоятельство поддерживает процесс гликолиза, для которого необходим окисленный NAD+. В присутствии достаточного количества кислорода пируват полностью окисляется до С02 и Н20 в дыхательном цикле, получившем название цикла Кребса.
Все участки этого процесса локализованы в матриксе или во внутренней мембране митохондрий.
Непосредственно в цикле окисляется не сам пируват, а его производное — ацетил-СоА.
На протяжении одного оборота цикла при окислении пирувата происходит выделение трех молекул С02, включение трех молекул Н20 и удаление пяти пар атомов водорода.
Энергетический выход цикла Кребса, его связь с азотным обменом.
Цикл Кребса играет чрезвычайно важную роль в обмене веществ растительного организма. Он служит конечным этапом окисления не только углеводов, но также белков, жиров и других соединений. В ходе реакций цикла освобождается основное количество энергии.
При окислении одной молекулы пирувата может образоваться 15 молекул АТР + 8АТФ гликолиз = 38 АТФ = 1591 кДж/моль (380 ккал/моль).
Значение цикла Кребса не исчерпывается его вкладом в энергетический обмен клетки. Не менее важную роль играет то обстоятельство, что многие промежуточные продукты цикла используются при синтезе различных соединений. азотном обмене, синтезе и распаде белковых веществ, образуются аминокислоты. Для синтеза липидов, полиизопренов, углеводов и ряда других соединений используется ацетил-СоА. Особенно важно, что через реакции цикла Кребса устанавливается тесная связь между обменом трех важнейших групп соединений — белков, жиров и углеводов.
Вопрос.
Гликолиз.
Гликолиз — процесс анаэробного распада глюкозы, идущий с освобождением энергии, конечным продуктом которого является пировиноградная кислота.
Гликолиз — общий начальный этап аэробного дыхания и всех видов брожения. Реакции гликолиза протекают в растворимой части цитоплазмы (цитозоле) и в хлоропластах.
Этапы гликолиза, фосфорилирование на уровне субстрата.
Цепь реакций, составляющих суть гликолиза, можно разбить на три этапа:
I. Подготовительный этап — фосфорилирование гексозы и ее расщепление на две фосфотриозы.
II. Первое субстратное фосфорилирование, которое начинается с 3-фосфоглицеринового альдегида и кончается 3-фосфоглицериновой кислотой. Окисление альдегида до кислоты связано с освобождением энергии. В этом процессе на каждую фосфотриозу синтезируется одна молекула АТР.
III. Второе субстратное фосфорилирование, при котором 3-фосфоглицериновая кислота за счет внутримолекулярного окисления отдает фосфат с образованием АТР. Пируват 2 молекулы— конечный продукт гликолиза.
Энергетический выход гликолиза.
Всего в процессе гликолиза образуются 8 молекул АТР (335 кДж/моль, или 80 ккал).
Функции гликолиза в клетке.
В аэробных условиях гликолиз выполняет ряд функций:
1) осуществляет связь между дыхательными субстратами и циклом Кребса;
2) служит основным источником АТР в клетке;
3) производит интермедиаты, необходимые для синтетических процессов в клетке;