Лимфоцитопоэз и иммуноцитопоэз
СКК
ПСК – клетка- предшественница лимфоцитопоэза
Т-лимфопоэтин В-лимфопоэтин
клетка-предшественница Т-лимфоцитов клетка-предшественница В-лимфоцитов
Т-иммунобласт Т-лимфобласт В-лимфобласт В-плазмобласт
Т-большой В-большой
лимфоцит лимфоцит
Проплазмоцит
Т-средний В-средний
лимфоцит лимфоцит
Т-лимфоцит акти-
вированный Т-малый В-малый Плазмоцит
лимфоцит лимфоцит
Цель занятия— изучение морфологии и особенностей дифференцировки клеток крови в процессе эмбрионального и постэмбрионального кроветворения.
Задачи:
1. Получить представление о стволовых клетках крови.
2. Научиться отличать стадии дифференцировки клеток гранулоцитарного, моноцитарного, тромбоцитарного и эритроцитарного рядов.
3. Получить представление об иммуноцитах и изучить основные стадии иммуноцитопоэза.
Необходимый исходный уровень знаний:
1. Строение крови как ткани.
2. Морфофункциональная характеристика клеточных элементов крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов).
3. Основные этапы эмбрионального и постэмбрионального гемопоэза.
Объекты изучения
Микропрепараты для изучения и зарисовки
1. Кроветворение в стенке желточного мешка(срез зародыша курицы на стадии образования туловищных и амниотических складок). Окраска железным гематоксилином. На малом увеличении в стенке желточного мешка между энтодермой и висцеральным листком мезодермы найти первичные кровеносные сосуды (vasa sanguinica). На большом увеличении зарисовать и обозначить: 1—эндотелиальные клетки (endotheliocytus), первичного кровеносного сосуда, 2 — первичные эритробласты (erythroblastus primarius), 3 — мезенхимные клетки (mesenchymocytus), окружающие сосуд.
2. Мазок красного костного мозга. Окраска по Романовскому— Гимза. На мазке красного костного мозга под большим увеличением необходимо найти дифференцирующиеся клетки эритроцитарного и гранулоцитарного рядов. Миелобласт— крупная клетка с округлым или овальным ядром, содержащим дисперсный хроматин, и бледно-голубой цитоплазмой. Промиелоцит по внешнему виду напоминает миелобласт, но в его цитоплазме присутствуют неспецифические азурофильные и небольшое число специфических гранул. Число специфических гранул невелико, поэтому без иммерсии обычно не удается различить базофильный, эозинофильный и нейтрофильный промиелоциты.
Миелоцит имеет округлое или овальное ядро с более конденсированным хроматином, чем хроматин ядра промиелоцита, и значительное количество специфической зернистости, благодаря чему легко можно отличить базофильный, эозинофильный и нейтрофильный миелоциты. Так как нейтрофильная зернистость очень мелкая, цитоплазма клеток нейтрофильного ряда выглядит очень прозрачной. Цитоплазма эозинофилов (ацидофилов) заполнена плотно расположенными розовыми гранулами. Для клеток базофильного ряда характерна крупная темно-фиолетовая (темнее ядра) зернистость. У метамиелоцитов меняется форма ядра: оно становится бобовидным, происходит дальнейшее накопление специфической зернистости. Далее происходит сегментация ядра и формируется зрелый (сегментоядерный) гранулоцит.
Клетки эритроцитарного ряда отличаются от гранулоцитов прежде всего меньшими размерами и гомогенной окраской цитоплазмы. Ядра эритробластов от базофильного к оксифильному (ацидофильному) уменьшаются в размерах, пикнотизируются. Базофильный эритробласт имеет более плотное ядро по сравнению с бластом и резко базофильную (темно-синюю) цитоплазму. Полихроматофильный эритробласт отличается светлой окраской цитоплазмы серых тонов, иногда с розоватым или синеватым оттенком. Ядро маленькое, с компактным хроматином, расположено эксцентрично. Оксифильный эритробласт окрашивается в розовый цвет, очень маленькое темное ядро лежит на периферии клетки. Мегакариоциты — это крупные клетки, имеющие большую площадь цитоплазмы и содержащие крупные дольчатые ядра. Цитоплазма окрашивается слабобазофильно.
Зарисовать и обозначить: 1) миелобласт (myeloblastus), 2) базофильный эритробласт (erythroblastus basophilicus), 3) полихроматофильный эритробласт (erythroblastus polychro-matophilicus), 4) ацидофильный эритробласт (erythroblastus acidophilicus), 5) промиелоцит (promyelocytus), 6) нейтрофильный миелоцит (myelocytus neutrophilicus), 7) нейтрофильный метамиелоцит (metarnyelocytus neutrophilicus), 8) нейтрофильный палочкоядерный гранулоцит, 9) сегментоядерный нейтрофильный гранулоцит (granulcytus neutrophilicus), 10) ацидофильный миелоцит (myelocytus acidophilicus), 11) ацидофильный метамиелоцит (metarnyelocytus acidophilicus), 12) ацидофильный гранулоцит (granulocytes acidophilicus), 13) мегакариоцит (megacaryocytus), 14) базофильный миелоцит (metarnyelocytus basophilicus), демонстрационный препарат.
Демонстрационные препараты
Клетки в мазках красного костного мозга: 1) миелобласт, 2) базофильный эритробласт, 3) полихроматофильный эритробласт, 4) оксифильный эритробласт, 5) базофильный миелоцит, 6) эозинофильный миелоцит, 7) нейтрофильный миелоцит, 8) эозинофильный метамиелоцит, 9) базофильный метамиелоцит, 10) нейтрофильный метамиелоцит. Окраска по Романовскому— Гимза. Увеличение большое (иммерсия).
Электронные микрофотографии
1. Эритробласты и эритроциты.
2. Эозинофильный метамиелоцит.
3. Нейтрофильный метамиелоцит.
4. Базофильный метамиелоцит.
5. Мегакариоцит, продуцирующий . кровяные пластинки.
Контрольные вопросы:
1. Что такое эмбриональное кроветворение? В какие сроки и в каких органах оно происходит?
2. Расскажите о постэмбриональном кроветворении у человека.
3. Что такое стволовые, полустволовые, унипотентные клетки?
4. Как изменяется характер цитоплазмы и ядер клеток эритропоэтического ряда по мере созревания эритроцита?
5. В чем заключаются основные процессы дифференцировки клеток гранулоцитарного ряда в красном костном мозге?
6. Где и как происходит образование Т-и В-лимфоцитов?
7. Где формируются моноциты, какие стадии они проходят?
8. Как происходит образование тромбоцитов (кровяных пластинок).
Ситуационные задачи:
1. В селезенку облученной мыши попала полустволовая клетка КОЕ-ГЭММ. Колония каких клеток вырастет из нее?
2. В селезенке облученной мыши из КОЕ — МгцЭ выросла колония. Какие клетки вы рассчитываете в ней найти? А если колония выросла из КОЕ-ГМ?
3. В базофильном эритробласте подавлен синтез белка. Какой специфический белок не будет образовываться и возможна ли дальнейшая дифференцировка клетки?
4. В эксперименте из красного костного мозга выделили клетки эритробластического ряда, в которых уже в основном закончен синтез гемоглобина. Какие клетки были выделены?
5. В эксперименте на мышах в раннем неонатальном периоде ингибировали функцию тимуса. Какой вид гемопоэза нарушится?