Определение калия в сыворотке крови
Цели занятия:
- Усвоить представление о диагностическом значении определения электролитов в плазме крови;
- Знать функции и распределение минеральных веществ в организме, регуляцию натрия и калия в организме, клинико-диагностическое значение определения калия в сыворотке крови;
- Уметь определять содержание калия в сыворотке крови.
Принцип метода:ионы К+ в присутствии ионов свинца меди и нитрита образуют нерастворимый в воде осадок, который растворяют в смеси риванола и уксусной кислоты.
Оптическая плотность полученного раствора, прямопропорциональна количеству нитрит-ионов. Содержание калия находят используя постоянный коэффициент, рассчитанный исходя из соотношения нитрит-ионов и К+ в образовавшемся соединении.
| Реактивы: 1. 5% раствор ацетат натрия. 2. Смесь растворов 5% ацетат кальция и 5% ацетат свинца. 3. Нитрит натрия в смеси растворов ацетата меди и ацетата свинца. 4. 0,5% раствор риванола 5. Ледяная уксусная кислота. 6. Дистиллированная вода. 7.сыворотка крови. | Оборудование: 1. Пробирки центрифужные 2. Стеклянные палочки. 3. Центрифуга. 4. ФЭК. 5. Кюветы на 10 мм. 6. Колба на 25 мл. 7. пипетки на1 мл, 2 мл. 8. Дозатор на 0,1 мл. |
Ход определения:
В центрифужную пробирку вносят 0,5 мл раствора ацетата натрия, 0,1 мл сыворотки и 0,5 мл раствора №3. Содержимое пробирок перемешивают стеклянной палочкой, потирая о внутренние стенки пробирки в течение 5 минут. Оставляют на 1 час, после чего центрифугируют 10 минут при 1500 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 1 мл ацетата натрия, перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин. Аналогичное промывание осадка ацетатом натрия проводят до исчезновения голубизны осадка. Затем к осадку приливают 1 мл риванола и 2 мл ледяной уксусной кислоты. Смесь перемешивают и количественно переносят в колбу на 25 мл, и доводят до метки дистиллированной водой.
Колориметрируют при 540 нм в кювете на 10 мм против воды. Рассчитывают результат по формуле:
С, мг/% = Е * 36
Нормальные величины:в сыворотке – 14 – 24 мг/%
в эритроцитах – 310 – 440 мг/%
Клинико-диагностическое значение определения калия в сыворотке крови.
Калий – основной внутриклеточный катион. 98% калия находится в клетках. В основном калий содержится в мышцах и печени.
Суточная потребность составляет – 2.5 – 5.0 г. В течение суток поступает с пищей до 6г. Физиологическое значение:
· Необходим для синтеза протеинов, АТФ, гликогена.
· Принимает участие в формировании потенциала покоя, действия.
· Активирует ряд ферментов.
· Участвует в регуляции сердца, нервной системы, скелетной и гладкой мускулатуры (повышает тонус и силу сокращений).
В регуляции обмена калия участвует альдостерон, усиливающий его выделение с мочой.
В норме содержание калия в плазме крови составляет 3,6 – 5,4 ммоль/л. Снижение ее до уровня 3,5 ммоль/л приводит к тяжелым нарушениям в организме человека: слабости мышц, появлению вялых параличей, прекращению перистальтики кишечника, вздутию живота.
Увеличение концентрации калия в плазме выше 5,6 ммоль/л сопровождается ощущением «ползания мурашек», «одеревенения конечностей», нарушением ритма сердца. Может наступить остановка деятельности сердца, паралич дыхательных мышц.
Гиперкалиемия наблюдается при:
· заболеваниях, сопровождающихся распадом клеточных элементов и чрезмерным высвобождением калия из клеток (обширный некроз, внутрисосудистый гемолиз, ожогах, опухолях, голодании, шоке);
· уменьшении выделения калия почками (почечная недостаточность, болезнь Аддисона);
Гипокалиемия наблюдается при:
· недостаточном поступлении этого элемента в организм (голодание, после хирургического вмешательства);
· усиленном выведении с мочой, вследствие нарушения эндокринной системы (синдром Конна, Иценко-Кушинга);
· усиленном выделении через кишечник при поражении ЖКТ (неукротимая рвота, понос).
Задание для самостоятельной работы:
· Законспектируйте методику;
· Подготовьте рабочее место для исследования;
· Проведите определение содержания калия в предложенной сыворотке;
· Оцените полученные результаты;
· Заполните бланки анализа;
· Сделайте выводы по работе и рисунки;
· Ответьте на дополнительные вопросы.
Ответьте на вопросы:
1. Дайте определение понятиям: водно-минеральный обмен, минеральный обмен, гомеостаз.
2. Перечислите основные функции воды в организме.
3. Локализация натрия, калия в организме, их биологическое значение для организма.
4. Патология обмена калия и натрия.
5. Перечислите методы определения калия и натрия в организме.
6. Преаналитический этап исследования водно-минерального обмена.
Практическая работа