Основные методы исследования,
ПРИМЕНЯЕМЫЕ В ВИРУСОЛОГИЧЕСКОЙ ПрОКТИКЕ
В вирусологической практике применяют вирусоскопический метод, метод выделения и культивирования вирусов, биологический и серологический методы исследования.
Сущность вирусоскопического метода исследования заключается в использовании различных видов микроскопии с целью изучения вирусов.
Световая вирусоскопия позволяет выявлять крупные вирусы (вирусы оспы, эктимы овец), обнаруживать внутриклеточные включения, выявлять дегенерацию и гибель клеток в культурах, т. е. цитопатогенное действие вирусов.
Метод флюорохромирования основан на свечении (люминесценции) вирусов после обработки их специальными веществами — флюорохромами, которые под действием ультрафиолетовых лучей светятся. С помощью этого метода можно установить морфологию вирусов, внутриклеточные включения и за счет различного свечения нуклеиновых кислот можно дифференцировать (различать) вирусы на ДНК- или же РНК-содержащие.
Метод иммунофлуоресценции базируется на специфическом взаимодействии вирусного антигена с антителами, меченными флюрохромом. Этот метод позволяет выявлять патогенные вирусы непосредственно в патматериале и определять их вид.
Электронная вирусоскопия позволяет визуально наблюдать вирусные частицы в поле зрения электронного микроскопа. С помощью электронного микроскопа можно определить морфологию вирионов и дифференцировать вирусы по семействам, наблюдать взаимодействие вирусов и антител, что позволяет установить вид вирусов.
Метод выделения и культивирования вирусов основан на их способности репродуцироваться (размножаться) в живых клетках. Этот метод позволяет обнаружить присутствие вирусов в исследуемом материале, поддерживать их в активном состоянии, титровать вирусы, изучать их патогенные свойства, проводить постановку реакции нейтрализации, накапливать вирусный материал и применять его для изготовления противовирусных вакцин, предназначенных для профилактики вирусных болезней.
Биологический метод (биопроба) основан на заражении лабораторных, а при необходимости и производственных животных с целью определения патогенности вирусов и их вирулентности.
Серологический метод исследования основан на взаимодействии гомологичных друг другу антител и антигенов. Осуществляют этот метод путем постановки серологических реакций (РИД, РН, РСКи др.) in vitro с целью установления достоверного диагноза на вирусную болезнь.
Контрольные вопросы
1. Какая наука изучает вирусы?
2. Как устроены вирусы?
3. Из каких частей и химических веществ состоят вирусы?
4. Какие клеточные культуры применяют для выращивания вирусов?
5. Назовите основные методы исследований, применяемые в вирусоскопической практике?
Глава 2 ОСНОВЫ ОБЩЕЙ ЭПИЗООТОЛОГИИ
Предмет эпизоотологии
Болезни животных делятся на две большие группы: заразные и незаразные. В свою очередь заразные болезни подразделяются на инфекционные (вирозы, бактериозы, микозы и микотоксикозы) и инвазионные (паразитарные).
Инфекционные болезни занимают особое место среди болезней животных и имеют следующие отличительные особенности от других патологий животных:
♦ во-первых, для их возникновения необходимо внедрение в организм животного специфического патогенного микроба или продуктов его жизнедеятельности (ботулизм и др.);
♦ во-вторых, возможна передача возбудителя инфекционной болезни от больного животного здоровому;
♦ в-третьих, при инфекционных болезнях возможно массовое заболевание животных (заболеваемость может достигать 100 % при ящуре животных, классической чуме свиней и др.);
♦ в-четвертых, инфекционные болезни обладают способностью широкого территориального распространения (в пределах района, области, государства и материка могут распространяться высокопатогенный грипп птиц, ящур животных, чума крупного рогатого скота и другие болезни);
♦ в-пятых, отдельные болезни могут передаваться от животных человеку (таких болезней в мире зарегистрировано около 200, а в Беларуси — около 30: сибирская язва, туберкулез, бешенство, сальмонеллез, хламидиоз, лептоспироз и др.);
♦ в-шестых, инфекционным болезням свойственна стадийность (различают следующие периоды болезни: инкубационный, продромальный (период предвестников), основных признаков болезни и угасания (реконвалесценции);
♦ в-седьмых, отдельным инфекционным болезням свойственна стационарность, которая может быть обусловлена длительным сохранением возбудителя во внешней среде (сибирская язва, ЭМКАР и др.), продолжительным микробоносительством (инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота, бруцеллез и др.) и другими причинами;
♦ в-восьмых, у абсолютного большинства переболевших животных создается невосприимчивость к повторному заболеванию, т. е. у них образуется иммунитет.
При отдельных инфекционных болезнях переболевшие или иммунизированные животные могут создать иммунную защиту колостральным путем (через молозиво) у новорожденных животных (колибактериоз, ротаикоронавирусная инфекция, болезнь Ауески и многие другие).
Вместе с тем не всем инфекционным болезням свойственны перечисленные особенности. Так, например, для злокачественной катаральной горячки крупного рогатого скота, столбняка животных и некоторых других инфекционных болезней не свойственны массовость. Они, как правило, регистрируются в виде единичных (спорадических) случаев и не наносят большого экономического ущерба. В то же время массовость заболевания, характерная инфекционным болезням, может быть присуща и некоторым незаразным болезням. Массовыми и приносящими значительный экономический ущерб могут быть отравления животных, эндемические болезни, заболевания обмена веществ и др. Главной же отличительной особенностью инфекционных болезней от незаразных, что в конечном итоге инфекционные болезни и объединяет, является свойственный только им эпизоотический процесс. Инфекционная болезнь существует только вследствие непрерывности эпизоотического процесса, т. е. последовательной передачи возбудителя от зараженного животного здоровому непосредственно (контактным путем, при случке и т. д.) или посредством элементов внешней среды (воздух, корма, вода, предметы ухода и др.). Без непрерывности передачи возбудителя нет и не может быть эпизоотического процесса.
Термин «эпизоотология» (от гр. epi — на и won — животное, logos — учение) подразумевает одновременное заболевание большого количества животных какой-либо инфекционной болезнью на конкретной территории в определенный период времени.
Термин «эпизоотология» как наука об эпизоотиях был научно обоснованным и приемлемым для того времени, когда имели место массовые вспышки инфекционных болезней животных (чума и повальное воспаление легких крупного рогатого скота, сибирская язва животных, сап лошадей и др.). На современном этапе указанные болезни не получают массового распространения. В силу этого такое определение эпизоотологии как науки об эпизоотиях (повальных болезнях животных) устарело и его нельзя считать правильным, ибо она изучает и другие формы проявления интенсивности эпизоотического процесса — на уровне спорадических случаев, энзоотии, а также микробоносительства, в том числе здоровыми животными. Отсюда более точным будет определение эпизоотологии как науки об эпизоотическом процессе — закономерностях возникновения, распространения и угасания инфекционных болезней животных, методах их профилактики и ликвидации.
Эпизоотология изучает не только эпизоотический процесс на уровне стада, группы, популяции при возникновении инфекционных болезней, но и суть конкретной инфекционной болезни. В связи с этим дисциплину называют эпизоотология и инфекционные болезни, а в методическом отношении эпизоотологию разделяют на общую и частную.
Общая эпизоотология выявляет и изучает общие закономерности возникновения, распространения и угасания инфекционных болезней животных и методы их управления (профилактики и ликвидации). Ее предметом являются учение об инфекции, эпизоотические аспекты учения об иммунитете, эпизоотический процесс, эволюция, номенклатура и классификация инфекционных болезней, общие принципы профилактики и ликвидации инфекционных болезней.
Частная эпизоотология изучает этиологию, эпизоотологические особенности, патогенез, симптомы, патологоанатомические изменения, диагностику, лечение, вопросы профилактики и ликвидации конкретных инфекционных болезней животных.
В общей эпизоотологии основной целью изучения является эпизоотический процесс, а в частной — инфекционный.
Во всем мире в учебниках и руководствах по эпизоотологии инфекционные болезни традиционно принято описывать по определенной схеме.