Вопрос 2. Микробиологическая диагностика трахомы.
ХЛАМИДИИ. ВОЗБУДИТЕЛЬ ТРАХОМЫ
Вопрос 1. Систематика. Свойства. Патогенез.
1. Отдел: Gracilicutes; семейство: Chlamydiaceae; род: Chlamydia; патогенный вид: C. trachomatis.
Хламидии являются ОБЛИГАТНЫМИ ВНУТРИКЛЕТОЧНЫМИ ПАРАЗИТАМИ. Они могут быть представлены:
 Элементарным тельцем (ЭТ) – мелкая сферическая метаболически малоактивная внеклеточная структура с ТРЁХслойной клеточной стенкой;
Ретикулярным тельцем (РТ) – репродукционная внутриклеточная форма жизненного цикла хламидий, более крупное образование, имеющее сетчатую структуру с тонкой клеточной стенкой.
ЖИЗЕННЫЙ ЦИКЛ ХЛАМИДИЙ:
Ø 7-10 часов: ЭТ, попадают в организм и адсорбируются на плазмолемме чувствительной клетки хозяина, после чего внедряются в неё путём эндоцитоза è
Ø 6-8 часов: из ЭТ в цитоплазме образуются инициальные тельца, которые превращаются в метаболически активные неинфекционные, вегетативные РТ è
Ø РТ многократно бинарно делятся, образуя т.н. тельца включений (один или несколько расположенных около ядра цитоплазматический пузырька, образованных из мембраны клетки хозяина и содержащих делящиеся РТ хламидий) è
Ø 36-42 часа: вследствие конденсации РТ образуется промежуточные тельца, которые трансформируются в ЭТ è
Ø образовавшиеся ЭТ покидают клетку, что сопровождается её гибелью.
Через 48-72 часа проникают в новые клетки хозяина à начинается новый цикл развития хламидий.
| |
| |
Морфология и тинкториальные свойства.
Мелкие Гр– бактерии шаровидной или овоидной формы. Не образуют спор, не имеют жгутиков и капсулы. Окрашиваются по Романовскому-Гимзе:
- элементарные тельца окрашиваются в пурпурный цвет на фоне голубой цитоплазмы;
- ретикулярные тельца окрашиваются в синий цвет.
* Клеточная стенка хламидий характеризуется отсутствием в составе пептидогликана N-ацетилмурамовой кислоты. В состав клеточной стенки входит двойная наружная мембрана, включающая в себя ЛПС и белки.
Культуральные свойства.
На искусственных питательных средах не размножаются. Их можно культивировать только в живых клетках: для этого используют культуры клеток HeLa, McCoy, желточные мешки куриных эмбрионов, организм чувствительных животных при t=35оС
4. Биохимические свойства: не способны синтезировать АТФ, поэтому являются облигатными внутриклеточными паразитами.
5. Антигенные свойства: родоспецифический Аг (ЛПС); видоспецифический Аг (белок, расположенный в наружной мембране), типоспецифический Аг (ЛПС, находящийся в клеточной стенке м/о). C. trachomatis имеет 18 сероваров: 4 из которых вызывают трахому (А, В, Ва, С), 8 - урогенитальный хламидиоз (D-R), 4 – венерический гранулёматоз (L1-L4). C. psittaci имеет 1 серовар.
6. Факторы патогенности: адгезины, эндо- и экзотоксины, белок теплового шока.
7. Во внешней среде неустойчивы. Длительному сохранению инфекционных свойств возбудителя способствует низкая tо. Крайне чувствительны к УФ-облучению и дезинфекантам.
8. Антропоноз. Источник инфекции: больной человек. Механизм передачи: контактный. Путь передачи: контактно-бытовой.
9. Трахома – это хроническое инфекционное заболевание, характеризующееся поражением конъюнктивы и роговицы, приводящее, как правило, к формированию грубых рубцов и слепоте.
Патогенез. Возбудитель в форме ЭТ проникает клетки конъюнктивы и прилегающих тканей, где размножается à образуются сосочки и фолликулы, происходит рубцевание конъюнктивы (ввиду действия токсинов), поражение нервных окончаний в конъюнктиве и регионарных лимфоузлах.
Выделяют 4 стадии течения трахомы:
I. Прогрессирование воспалительного процесса;
II. Начало регрессивных изменений;
III и IV. Процессы рубцевания роговицы.
Вопрос 2. Микробиологическая диагностика трахомы.
Материал для исследования: СОСКОБЫ с конъюнктивы.
Методы диагностики: бактериоскопия, серодиагностика. Выделение возбудителя обычно не проводят (но заражение исследуемым материалом культур клеток человека (HeLa, McCoy) или куриных эмбрионов возможно).
1. БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ: делают мазок, окрашивают его по Романовскому-Гимзе, микроскопируют применяя фазово-контрастный микроскоп. Обнаруживают тельца Провацека-Хальберштедтера – цитоплазматические включения фиолетового цвета с красным центром, расположенные около ядра.
2. СЕРОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ: определяют Аг в РИФ с АТ, меченными флюорохромами; ИФА; ПЦР.