I. Методы изучения количественного и качественного состава микрофлоры кожи рук
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 7
Тема: Представители нормальной микрофлоры человека
Цель: Изучить основные закономерности развития, состава и местообитания нормальной микрофлоры человека. Определить качественный и количественный состав микрофлоры во всех локализациях в норме и при патологических состояниях.
Изучить строение бактериальной биопленки.
Знать:
1. Качественный и количественный состав нормальной микрофлоры организма человека и ее роль в жизнедеятельности человека.
2. Методы определения состава микрофлоры человека
3. Способы выделения и условия культивирования микроорганизмов, представителей нормальной микрофлоры человека
4. Методы коррекции состава микрофлоры человека
5. Особенности применения препаратов для коррекции состава микрофлоры человека
Уметь:
1. Провести микробиологическое исследование микрофлоры различных экотопов организма человека, оценить полученные результаты.
Контрольные вопросы:
1. Нормальная микрофлора организма человека: понятие, характеристика (облигатная и факультативная, пристеночная и полостная, условно-патогенная микрофлора).
2. Микрофлора различных экотопов: кожи, верхних дыхательных путей, ротовой полости, желудочно-кишечного тракта.
3. Функции нормальной микрофлоры человека, влияющие на состояние здоровья.
4. Физиологические функции нормальной микрофлоры, определяющие ее положительную роль в организме человека.
5. Колонизационная резистентность и свойства микроорганизмов нормальной микрофлоры ее обеспечивающие.
6. Назовите основные факторы, приводящие к развитию дисбактериоза.
7. Назовите методы микробиологической диагностики дисбактериоза.
8. Дисбактериоз: понятие, причины возникновения, меры профилактики, микробиологическая диагностика.
9. Препараты для коррекции нормальной микрофлоры человека (пробиотики, пребиотики и синбиотики).
10. Свойства представителей нормальной микрофлоры, входящих в состав пробиотиков, позволяющие использовать их в комплексной терапии дисбактериозов.
I. Методы изучения количественного и качественного состава микрофлоры кожи рук
Для исследования микрофлоры кожи применяют три группы методов. Это методы отпечатков, смывов и биопсий. Более эффективными являются методы смывов и биопсий.
Для посевов методом отпечатков используют бакпечатки - стерильные герметичные пластиковые контейнеры. В бакпечатки диаметром 2,4 см (площадь 4,52 см2), заливают 1,5 мл расплавленной агаровой селективной среды. Для проведения теста бакпечатку открывают, осторожно прижимают агар к коже в течение 20 с, после чего посев помещают в термостат. Результат теста оценивают по количеству колониеобразующих (КОЕ) единиц в расчете на 1 см2 кожи. Методами отпечатков выделяют меньшее количество микроорганизмов, чем при использовании других методов.
Метод смывов.
Для определения количества микроорганизмов на единицу площади кожи рук (см2)
проведите исследование методом смыва. Для этого смочите стерильный тампон в стерильном физиологическом растворе, тщательно протрите тампоном свою ладонь и сделайте посев тампоном на плотную питательную среду (Эндо). С помощью линейки измерьте длину и ширину ладони и вычислите ее площадь__________см2
На следующем занятии оцените качественный и количественный состав микрофлоры в своих посевах:
Общее количество колоний_______________
Количество лактозопозитивных колоний_______________
Уровень обсемененности кожи рук __________________на 1 см2
Сделайте вывод:_______________________________________________________________
Метод биопсий.
Метод, при котором образец ткани кожи удаляют специальным инструментом, после чего проводят посев на специальные среды или изучают под микроскопом.
П. Микрофлора полости рта
Полость рта, как экологическая ниша, представлена следующими биотопами: слизистая оболочка, протоки слюнных желез с находящей в них слюной, десневая жидкость и зона десневого желобка, ротовая жидкость, мягкий зубной налет (зубная бляшка).
Мягкий зубной налет (зубная бляшка) представляет собой наиболее сложный и многокомпонентный биотоп, формирующийся на поверхности зуба. Зубная бляшка начинает образовываться уже через 1-2 часа после чистки зубов, причем в динамике ее формирования происходят изменения состава микробиоценоза. Общей тенденцией является переход от доминирования аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, преимущественно кокков, к облигатно-анаэробным палочкам и извитым формам.
Задания:
- Оцените качественный и количественный состав микрофлоры в мазке из ротовой полости здорового человека.
Окраска по методу Грама, х1000.
Заключение ____________________________
_______________________________________
_______________________________________
_______________________________________
_______________________________________
_______________________________________
_______________________________________