РНГА З ЕРИТРОЦИТАРНИМ ДІАГНОСТИКУМОМ, ЩО МІСТИТЬ ЧУМНИЙ АНТИГЕН

Заняття

ТЕМА. ЗБУДНИКИ ЗООНОЗНИХ БАКТЕРІАЛЬНИХ ІНФЕКЦІЙ - ЧУМИ, ТУЛЯРЕМІЇ.

Теоретичні питання:

1. Особливо небезпечні інфекції. Режим роботи зі збудниками цих захворювань.

2. Біологічні властивості збудника туляремії – F.tularensis.

3. Мікробіологічна діагностика туляремії.

4. Біологічні властивості збудника чуми – Y.pestis.

5. Мікробіологічна діагностика чуми.

6. Специфічна профілактика особливо небезпечних інфекцій.

ДЕМОНСТРАЦІЯ

МІКРОПРЕПАРАТИ

Yersinia pestis, фарбування по Граму

Збудник має овальну форму, довжина до 2 мкм, поперечник – 0,3-0,7 мкм, Грам негативний. Розміщуються бактерії поодиноко. В препаратах, приготовлених з культур які вирощувались на щільному поживному середовищі можливі паличкоподібні форми, подібні до кишкової палички. При фарбуванні метиленовим синім по Лефлеру виразніше, ніж при фарбуванні по методу Грама, видна біполярність фарбування (полюси фарбовані більш інтенсивно, ніж центральна частина клітини).

Francisella tularensis,фарбування по Граму

Дуже дрібні Грам негативні кокобактерії (форма, проміжна між паличкоподібною і кулеподібною) з яскраво вираженим поліморфізмом. Звичайно їх розміри 0,2-0,7 мкм.

ДІАГНОСТИКУМИ

Туляремійний

Представляє собою завис культури збудника туляремії в формалінізованому ізотонічному розчині хлориду натрію. Діагностикум містить 25 млрд. мікробних тіл в 1 мл. Його використовують для проведення:

- кров’яно-краплинної реакції (застосовують у нерозведеному вигляді);

- розгорнутої реакції аглютинації (РРА) по типу реакції Відаля ( в цьому випадку розводять ізотонічним розчином натрію хлориду в 5 раз).

Частіше ставлять РРА з парними сироватками для виявлення зростання титру антитіл. Сироватку хворого розводять від 1:12,5 до 1:400. Реакцію вважають позитивною при титрі 1:100 і більше.

Чумний еритроцитарний антитільний

Представляє собою еритроцити з адсорбованими на них антитілами проти збудника чуми. Використовується для виявлення збудника в РНГА при експрес-діагностиці.

БАКТЕРІОФАГИ

Чумний

Містить живі бактеріофаги.Використовується для проведення реакції фаголізису з метою ідентифікації виділеної чистої культури при бактеріологічному методі діагностики.

АЛЕРГЕНИ

Тулярин

Є два види тулярину і відповідно два методи введення: тулярин для нашкірного застосування і тулярин для внутрішньошкірного застосування.Перший препарат більш зручний при масових обстеженнях для виявлення поствакцинального імунітету або імунного шару серед населення. Внутрішньошкірний тулярин застосовують для діагностики гострих захворювань, підозрілих на тулюремію.

Різні види тулярину містять різні концентрації алергена, тому категорично заборонено використовувати нашкірний тулярин для проведення внутрішньошкірних проб і навпаки.

ЛІКУВАЛЬНІ І ПРОФІЛАКТИЧНІ ІМУНОБІОЛОГІЧНІ ПРЕПАРАТИ

ВАКЦИНИ

Чумна жива EV

Висушена жива культура Y.pestis вакцинного штаму EV. Використовується для профілактики чуми по епідеміологічним показанням.

Туляремійна жива

Містить завис живих мікроорганізмів вакцинного штаму збудника туляремії. Щепленню підлягають люди, що проживають на території, епізоотичній по туляремії, а також виїжджаючі в такі місця.Вакцину наносять нашкірно, одноразово. Через 1-2 тижні провіряють ефективність щеплення постановкою нашкірної алергічної проби з тулярином або серологічної реакції (РА і РНГА). У разі негативного результату проводять повторне щеплення. Вакцина забезпечує імунітет, котрий зберігається до 5, іноді до 10-15 років.

СИРОВАТКИ

Імуноглобулін протичумний

Гамма-глобулінова фракція сироватки крові коней, гіперімунізованих вакциною EV. Використовується з профілактичною і лікувальною метою.

Чумна мічена ФІТЦ

Використовується для проведення прямої реакції Кунса РІФ при експрес-діагностиці чуми.

Туляремійна мічена ФІТЦ

Цю стандартну сироватку отримують класичним способом. Використовується для виявлення збудника в мазках крові і мазках-відбитках із органів тварин, заражених матеріалом від хворого (пунктатом бубона, харкотинням та ін.).

РНГА З ЕРИТРОЦИТАРНИМ ДІАГНОСТИКУМОМ, ЩО МІСТИТЬ ЧУМНИЙ АНТИГЕН

Серологічний метод відноситься до додаткових методів діагностики чуми.

РНГА поставлена з сироваткою крові хворого; мета – виявлення антитіл до антигенів чуми (він адсорбований на поверхні баранячих еритроцитів), що може вказувати на наявність захворювання чумою. Позитивна реакція виглядає у вигляді перевернутої парасольки.

Пояснення до самостійної роботи з теми: ” ЗБУДНИКИ ЗООНОЗНИХ БАКТЕРІАЛЬНИХ ІНФЕКЦІЙ - ЧУМИ, ТУЛЯРЕМІЇ.”

Контрольні питання для самостіної роботи.

Морфологія збудника чуми	Грамнегативна мілка овоїдна паличка, біполярно забарвлена, має капсулу, спор не утворює джгутиків не має.
Фактори вірулентності збудника чуми	токсин (мишиний, гемолізин), V-W-антигени, ферменти.
Природній резервуар інфекції при чумі	гризуни та зайцеподібні
Переносники Yersinia pestis	Блохи.
Джерело інфекції	спочатку – гризуни, а потім хворі люди
Шляхи інфікування	контактний,трансмісивний, аліментарний, аерогенний
Характерні клінічні прояви чуми	наявність бубонів
активна специфічна профілактика чуми:	жива вакцина для парентерального та перорального введення
Пасивна специфічна профілактика	протичумний імуноглобулін
морфологія збудника туляремії	мілкі грамнегативні поліморфні палички нерухливі, вкриті слизистою речовиною (капсулою)
Антигени збудника туляремії	оболонковий Vi-антиген, соматичний О-антиген
Основні фактори патогенності	ендотоксин, Vi-антиген речовини, які пригнічують фагоцитоз
Туляремія: Резервуар інфекції	Гризуни, зайці, водяні щури
Шляхи інфікування туляреміею	контактний, аліментарний, аспіраційний, трансмісивний
Методи діагностики туляремії	алергічний, серологічний, біологічний, експрес-діагностика
Особливості виділення чистої культури	виділеня іде через біологічну пробу на мишах з послідуючим висівом на селективні середовища
Метод ранньої діагностики	алергічна проба
Специфічна профілактика туляремії	жива туляремійна вакцина