Определение рН мочи универсальной индикаторной бумагой.
рН нормальной мочи колеблется от 4,8 до 7,0, составляя в среднем 6,0. Кислотность нормальной мочи зависит главным образом от соотношения NaH2PO4 и Na2HPO4. На величину рН мочи влияет характер пищи. При различных заболеваниях могут наблюдаться сдвиги рН как в кислую, так и в щелочную стороны.
Каплю мочи стеклянной палочкой наносят на полоску индикаторной бумаги. Определяют значение рН, сравнивая полученную окраску с цветной шкалой.
2. Определение неорганических составных частей мочи.При выпаривании суточного объема мочи остается сухой остаток в количестве 47-65 г, из них 15-25 г составляют неорганические вещества. Наиболее важные катионы мочи Na+, K+, NH4+, Са2+, Mg2+, анионы - С1-, SO42-, Н2РО4-, НРО2-, РО43-, НСО3-, СО2-, С2О42-. В незначительных количествах могут присутствовать микроэлементы.
2.1. Открытие фосфатов в моче.В моче встречаются фосфаты щелочноземельных и щелочных металлов. Фосфатов за сутки выделяется с мочой около 2,5 г (в расчете на Р2О5).
3—5 мл мочи подщелачивают несколькими каплями раствора аммиака и ждут 2—3 минуты до полного осаждения фосфатов кальция, магния и двойного фосфата магния и аммония. Осадок отфильтровывают, а фильтрат, содержащий растворимые фосфаты натрия и калия, сохраняют. Воронку с осадком на фильтре переставляют в другую пробирку, промывают осадок 2 раза дистиллированной водой и растворяют на фильтре в 1—2 мл 10% раствора азотной кислоты. К азотнокислому раствору добавляют 1 мл раствора молибдата аммония и нагревают. Выпадает желтый кристаллический осадок фосфоромолибдата аммония. К сохраненному фильтрату добавляют по каплям магнезиальную смесь до образования белого кристаллического осадка MgNH4PO4, в виде которого выпадают растворимые фосфаты натрия и калия (NaH2PO4, КН2РО4, К2НРО4).
2.2. Открытие кальция и магния в моче.Кальций и магний выделяются кишечником, в меньшей степени — почками. При смешанной пище в норме суточное содержание кальция 0,3—0,4 г (в расчете на СаО), магния — 0,06—0,2 г (в расчете на MgO).
В пробирку вносят 1 мл мочи, прибавляют 2 капли 10% раствора уксусной кислоты и 3-5 капель насыщенного раствора оксалата аммония. Жидкость в пробирке встряхивают. Белый кристаллический осадок оксалата кальция отделяют фильтрованием. К фильтрату добавляют 4—5 капель 10% раствора аммиака (до щелочной реакции на лакмус). Постепенно выпадает осадок (в виде мути) двойного фосфата магния и аммония, не растворимый в аммиаке, но растворяющийся в органических и минеральных кислотах.
2.3. Открытие аммонийных солей в моче.В пробирку наливают 2 мл мочи и 1 мл известкового молока. Подносят к отверстию пробирки смоченную водой красную лакмусовую бумажку, не прикасаясь ею к стенкам пробирки. Через некоторое время лакмусовая бумажка синеет вследствие выделения аммиака.
3. Органические составные части мочи.К органическим составным частям мочи относятся пировиноградная кислота, мочевые пигменты, мочевина, креатинин, мочевая кислота, аминокислоты, гиппуровая кислота и др. С мочой выводятся также некоторые ферменты, витамины, гормоны. К патологическим составным частям мочи относятся белок, глюкоза, ацетоновые тела, желчные и кровяные пигменты, гомогентизиновая и фенилпировиноградная кислоты.
3.1. Качественное обнаружение и количественное определение белка в моче.В норме в моче человека содержится минимальное количество белка (у взрослого от 20 до 60 мг, у детей — от 3 до 47 мг за 24 часа), присутствие которого не может быть доказано обычно применяемыми в лаборатории реакциями. При ряде заболеваний количество белка в моче увеличивается, и он начинает определяться обычными методами. Цветные реакции не пригодны для открытия белка в моче из-за наличия собственной окраски у мочи. Кроме того, она может содержать вещества, препятствующие появлению характерной окраски. Чувствительность реакций на белок в моче меняется в зависимости от состава мочи.
3.1.1. Проба кипячением в слабокислой среде.В пробирку вносят 1 мл мочи и проверяют ее реакцию на лакмус. Если моча щелочная, то ее предварительно очень слабо подкисляют на лакмус добавлением 1% раствора уксусной кислоты, а затем кипятят. В присутствии белка образуется муть или осадок. При кипячении мочи может выпадать осадок фосфатов и карбонатов кальция и магния. В этом случае осадок растворяется при добавлении 1—2 капель 10% раствора уксусной кислоты и повторном кипячении.
3.1.2. Проба Геллера.В пробирку помещают 1 мл концентрированной азотной кислоты и осторожно из пипетки, спуская по стенке пробирки, наслаивают мочу. При наличии белка на самой границе двух жидкостей образуется белый аморфный осадок или муть в виде кольца. Если белка в моче мало, то кольцо образуется не сразу, а через 2—4 минуты. Проба с концентрированной азотной кислотой чувствительна — она открывает до 0,033 г/л белка.
3.1.3. Проба с сульфосалициловой кислотой.Проверяют реакцию мочи. Мочу щелочной реакции подкисляют 2-3 каплями 5-10% раствора уксусной кислоты. В пробирку наливают 3 мл мочи и прибавляют 6 капель 20% раствора сульфосалициловой кислоты. Моча, содержащая белок, мутнеет (положительная проба). Результаты читают на темном фоне.
Проба с сульфосалициловой кислотой одна из самых чувствительных, она открывает белок при содержании его в моче до 0,015 г/л. Однако проба дает ложноположительные результаты с некоторыми лекарствами (производными пенициллина).
3.1.4. Количественное определение белка в моче по методу разведения (метод Брандберг—Роберте— Стольникова).Экспериментально установлено, что если при взаимодействии слоя азотной кислоты и слоя мочи образование белкового кольца произойдет между 2 и 3 минутами, то в данной моче содержится 0,033 г/л белка.
В пробирку помещают 1 мл 50% раствора азотной кислоты (или реактив Ларионовой) и осторожно по стенке пробирки наливают такое же количество мочи. При рассмотрении на темном фоне появление тонкого белкового кольца между 2-й и 3-й минутами на границе двух жидкостей указывает на наличие в моче 0,033 г/л белка. Если кольцо появляется раньше двух минут после наслоения, мочу следует развести водой и произвести повторное наслоение разведенной мочи. При этом подбирают такое разведение мочи, при наслоении которой кольцо образуется между 2-й и 3-й минутами. Если кольцо имеет нитевидную форму, мочу нужно развести в 2 раза, при широкой форме кольца — в 4 раза и при компактной форме — в 8 раз. Количество белка вычисляют путем умножения 0,033 г/л на степень разведения.
Расчет количества белка в зависимости от разведения мочи представлен в таблице.
Количество мочи, мл | Количество воды, мл | Кратность разведения | Количество белка,г/л |
0,066 | |||
0,099 | |||
0,132 | |||
0,165 |