Бактериологический метод диагностики менингокковых инфекций

Цель: ____________________________________________________________________________

Материал: _____________________________________________________________

I этап

Ориентировочная бактериоскопия

Приготовить мазок из исследуемого материала, окрасить по грамму/метиленовым синим, микроскопировать

Морфологические свойства: форма_____________________
расположение_________________
Тинкториальные свойства____________________________

2. Посев на элективные среды с целью получения изолированных колоний с последующей инкубацией при t= 37° C в течение 18-24 ч.

Произвести посев отделяемого слизистой оболочки носогдотки на сывороточный агар с целью выделения чистой культуры менингококков.

II этап

Изучение культуральных свойств

Изучить культуральные свойства колоний, выросших сывороточном агаре

Признаки	Характеристика колоний на сывороточном агаре
1. Размер
2. Цвет
3. Форма
4. Характер края
5. Характер поверхности
6. Консистенция
7. Внутренняя структура
8. Генетическая форма

2. Приготовление мазка, окраска по Грамму, изучение морфологических и тинкториальных свойств: бобовидные грам(-) диплококки

Пересев на скошенный агар с целью накопления чистой культуры

Отсеять изолированную колонию, выросшую на электиной среде (штрихами) на среду накопления (скошенный сывороточный агар) с целью накопления чистой культуры и инкубируют при 37°C и 22°C

III этап

Идентификация выделенной чистой культуры по

1. морфологическим и тинкториальным свойствам: бобовидные грам(-) диплококки

2. культуральным свойствам: мелкие бесцветные нежные колонии вязкой консистенции

3. биохимическим свойствам. Посев изолированных колоний на пестрый ряд Гисса (см.табл.)

Постановка:______________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

глюкоза лактоза мальтоза маннит сахароза

МПА "____" "____" "____" "____" "____" МПБ

Учет реакции:____________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________

4. определение факторов патогенности (оксидазы)

Постановка:на изолированную колонию наносят 1 каплю индикатора - диметилпарафенилендиамида

Учет:+ реация - окрашивание колонии в розовый цвет

Серологическая идентификация

Определение серогруппы:

Постановка:______________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Учет: _____________________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________

IV этап

Учет результатов. Выдача ответа

6. Учесть РПГА с “парными” сыворотками в диагностике менингококковой инфекции

Метод: ___________________________________________________________________________

Ингредиенты: _____________________________________________________________________

Постановка: ______________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Разведения: 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 контроль эр. д-ма

I сыворотка

II сыворотка

“___“ “___“ “___“ “___” “___“ “___“

Учёт: _____________________________________________________________________________

Заключение: ______________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________

7. Заполнить таблицу: «Свойства основных возбудителей бактериальных менингитов»

Подозреваемый микроб	Морфология	Интенсивность роста на агаре	Изменение цвета шоколадного агара вокруг колоний	Обработка колоний 3% р-ром KOH	Ферменты	Окраска по Граму
		Сывороточный агар	Шоколадный агар			Оксидаза	Каталаза	Уреаза
Neisseria meningitides
Haemophilus influenzae
Streptococcus pneumoniae
Streptococci B,D,viridans
Listeria monocytogenes
Acinetobacter calcoaceticus

Подпись преподавателя______________________