Б) Приготувати мазок із середовища Кітта-Тароцці з посівом ґрунту, пофарбувати за Грамом, мікроскопувати
Матеріали та обладнання: посів ґрунтової бовтушки на середовище Кітта-Тароцці, бактеріальна петля, стерильна піпетка Пастера, барвники за Грамом, спиртівка, сірники, марлеві серветки, склограф.
Порядок роботи:
1. Бульйонну культуру набрати пастерівською піпеткою, яку занурити через шар вазелінової олії на дно пробірки, затиснувши її.
2. Після занурення пастерівської піпетки відкрити її отвір, набрати бульйонну культуру, а потім знову затиснути піпетку.
3. Бульйонну культуру нанести на предметне скло, піпетку занурити в дезрозчин.
4. Приготувати фіксований препарат із суміші мікроорганізмів, дотримуючись усіх правил (див. практичну роботу 4 заняття 1) та пофарбувати його за методом Грама.
5. Результати мікроскопії (характеристику морфологічних та тинкторіальних властивостей бактерій) занести до таблиці:
| Назва препарату, метод фарбування | Рисунок | Характеристика бактерій (мікроскопічна картина) |
| Мазок з ґрунтової бовтушки, фарбування за Грамом | ________________________________________ ________________________________________ ________________________________________ |
Висновок: ______________________________________________________________________
| Алгоритм виділення чистої культури анаеробних бактерій |
| Дослідний матеріал для накопичення анаеробів засівають у спеціальне поживне середовище для культивування анаеробів (середовище Кітта-Тароцці, бульон Мартена та ін.). Посіви заливають вазеліновою олією та інкубують у термостаті |
| Методи отримання ізольованих колоній |
| Метод Цейслера |
| Метод послідовних розведень Вейнберга |
| ІІІ етап |
| V етап |
| Урахування та аналіз результатів. Остаточна відповідь аліз результатів дослідження. Відповідь |
| ІV етап |
| Культуру, що виросла після інкубації у середовищі Кітта-Тароцці, перевіряють на чистоту та ідентифікують за морфологічними, тинкторіальними, культуральними, біохімічними, антигенними та іншими властивостями |
| Вивчають культуральні властивості бактерій. З найбільш типових колоній готують фіксовані препарати, фарбують їх за Грамом. Залишок колонії засівають на середовище Кітта-Тароцці для накопичення чистої культури |
| ІІ етап |
| Враховують зміни, які відбулися у середовищі накопичення (поява помутніння, газоутворення) |
| Бульонну культуру набирають пастерівською піпеткою, яку занують через шар вазелінової олії на дно пробірки |
| Готують фіксовані препарати, фарбують їх за Грамом з метою вивчення морфологічних властивостей |
| Пересів із середовища накопичення на спеціальні щільні поживні седовища (напр., агар Цейслера, середовище Вільсона-Блера) з метою отримання ізольованих колоній. Інкубація посівів у термостаті |
| І етап |
Підпис чергового студента ______________
Підпис викладача ______________________
Практичне заняття ДАТА _______________
Тема. «БАКТЕРІОФАГИ. ГЕНЕТИКА БАКТЕРІЙ»
Питання для підготовки
1. Природа та властивості бактеріофагів.
2. Вірулентні та помірні фаги. Механізми їх взаємодії з бактеріальною клітиною.
3. Використання бактеріофагів (фагоідентифікація, індикація, профілактика, терапія).
4. Форми мінливості мікроорганізмів. Фенотипова мінливість.
5. Генотипова мінливість (мутації та генетичні рекомбінації).
6. Плазміди – позахромосомні фактори спадковості.
7. Практичне значення вчення про генетику мікроорганізмів.
8. Принципи генетичних методів діагностики інфекційних захворювань.
9. Основні принципи генної інженерії.
Список літератури
1. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія: підручник для студ. вищ. навч. закл. / за редакцією В.П. Широбокова. – Вінниця: Нова Книга, 2011. – С. 139 - 151.
2. П’яткін К.Д. , Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія. – К.: Вища школа, 1992. – С. 28 - 39.
2. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, иммунология, вирусология. - М.: МИА, 2002.– С. 84 – 120.
3. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. – СПб., 2002. – СПб, 2002. – С. 85 - 106.
4. Поздеев О.К. Медицинская микробиология / под ред. акад. РАМН В.И.Покровского. – М.: ГЭОТАР, 2001. – С. 80 -89;1 07 – 112.
5. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник/ под ред. А.А. Воробьева. – М.:Медицинское информационное агентство, 2004. – С. 104 - 115.
6. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии / под редакцией Л. Б. Борисова. – М.: Медицина, 1993. – С. 54 – 59.
7. Клименюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична мікробіологія: посібник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2004. – С. 111 - 113 .
Практична робота 1. «Вивчення демонстрації»