Нормальная и фитопатогенная микрофлора растений. Источники и пути загрязнения ЛРС. Методы контроля микробной чистоты ЛРС. Требования к категориям 4А и 4Б
Нормальная микрофлора растений.
В норме на поверхности живых растений (на листьях, стеблях, плодах, семенах) обитают микроорганизмы, которые называются эпифитной микрофлорой. Эпифитная микрофлора не наносит вреда и препятствует проникновению фитопатогенных микробов в растительные ткани (антагонистическое действие). К эпифитной микрофлоре относятся: грам «-» бактерии Erwinia herbicola (на МПА образует золотисто-желтые колонии), грам«-» полиморфная палочка Pseudomonas fluorescens (на МПА – прозрачные колонии с флюоресценцией), спорообразующие бактерии – Bacillus mesentericus, Bacillus vulgatus, бесспоровые бактерии – Bacterium putidam, E. сoli, а также небольшое количество грибов.
Возле корней растений в почве находится большое количество микроорганизмов. Эта зона называется ризосферой. Здесь встречаются псевдомонады, микобактерии (неспорообразующие палочки), актиномицеты, а также спорообразующие бактерии и грибы. Эти микроорганизмы переводят различные сложные вещества в соединения, доступные для растений, синтезируют биологически активные соединения (витамины, антибиотики и др.), вступают в симбиотические взаимоотношения с растениями, обладают антагонистическими свойствами по отношению к фитопатогенным микробам..
Фитопатогенные микроорганизмы.
К фитопатогенным микробам относятся возбудители инфекционных заболеваний у растений - бактерии, грибы и вирусы. Болезни, вызываемые бактериями, называются бактериозами. Различают местные и общие бактериозы. Общие бактериозы вызывают гибель всего растения или его отдельных частей. Местные бактериозы - поражения только отдельных участков растений. Основные роды бактерий - возбудителей инфекционных заболеваний растений: Род Erwinia - вызывает болезни типа ожога, увядания, мокрой или водянистой гнили. Род Pseudomonas – вызывает бактериальную пятнистость (на листьях образуются пятна различной окраски и размеров).Род Xanthomonas – вызывает сосудистые бактериозы (закупорка сосудов, увядание и гибель), поражает листья, вызывает пятнистость. Род Corynebacterium – сосудистые и паренхиматозные заболевания, бактериальный рак. Род Agrobacterium – вызывает образование опухолей (корончатые галлы). Род Pectobacterium – вызывает преимущественно гнили растений.
Источники и пути загрязнения ЛРС:
Передача фитопатогенных м.о. происходит через зараженные семена, почву, грунтовые воды, дождевые капли, моллюсков, нематод, воздух. Эти м.о. проникают в растения через устьица, чечевички, гидатоды, царапины.
Фитопатогенные м.о. синтезируют ферменты-протеаза, целлюлаза, ,пектиноза, которые разрушают межклетники и клеточную оболочку, образуют токсины, которые инактивируют ферменты растения, нарушают фотосинтез, дыхание, и другие физиол.процессы.
Методы контроля микробной чистоты растительного сырья.
Для оценки микробной обсемененности растительного сырья используется метод смывов. В асептичных условиях, используя стерильные инструменты, взвешивают 1 г сырья, помещают в стерильную пробирку с 5 мл изотонического раствора хлорида натрия и встряхивают на шуттель-аппарате в течение 10 мин; берут 1 мл смыва, делаю разведения 1:10, 1:100; из каждого разведения делают посев 1 мл в глубину питательной среды в чашках Петри. Для выявления роста грибов и дрожжей используют среду Сабуро или сусло-агар, для выявления бактерий – МПА. При этом засевают 2-3 параллельные чашки на каждое разведение. Оставляют в термостате при 37°С для бактерий и при 24°С для грибов и дрожжей, подсчитывают число выросших колоний и, зная разведение смыва, подсчитывают микробную загрязненность сырья. Микробную загрязненность лекарственного сырья выражают количеством клеток микроорганизмов в 1 г сырья.
Требования к категориям 4а 4б:
(стр. 30, методичка)