Исследование действия пепсина

Раздел IV. Обмен азотсодержащих соединений.

Тема 4.1. Азотсодержащие соединения пищи. Переваривание белков. Общие пути обмена аминокислот.

Тема 4.2. Источники и пути обезвреживания аммиака в разных тканях

Тема 4.3. Обмен глицина, серина, цистеина, метионина, триптофана, аргинина.

Тема 4.4. Индивидуальные пути обмена аминокислот. Обмен фениланина, тирозина, аспарагиновой, глутаминовой кислот, валина, лейцина и изолейцина.

Лабораторные работы по разделу.

Требования к результатам освоения дисциплины

Вопросы к итоговому занятию «Обмен азотсодержащих соединений».

Тема 4.1. Азотосодержащие соединения пищи. Переваривание белков. Общие пути обмена аминокислот.

Вопросы для самоконтроля.

1.Азотистый баланс. Определение, виды. Факторы, влияющие на азотистый баланс.

2.Заменимые и незаменимые аминокислоты. Определение, формулы.

3.Частично заменимые аминокислоты. Определение, формулы.

4.Условно заменимые аминокислоты. Определение, формулы.

5.Глюкогенные и кетогенные аминокислоты. Формулы.

6.Условия, определяющие биологическую ценность белков.

7.Белковая недостаточность

8.«Резервные» белки организма. Какие белки можно рассматривать как резервные?

9.Переваривание белков в желудке.

10.Роль соляной кислоты в переваривании белков.

11.Переваривание белков в кишечнике.

12.Продукты гидролиза белков, всасывающиеся из кишечника в кровь.

13.Защита клеток желудочно-кишечного тракта от действия протеаз.

14.Транспорт аминокислот в клетке

15.Нарушение переваривания белков и транспорт аминокислот.

16.Гниение аминокислот в кишечнике. Продукты гниения фенилаланина, тирозина, триптофана, лизина, орнитина, цистеина и метионина, их структурные формулы.

17.Роль ДАФС и УДФГК в обезвреживании продуктов гниения аминокислот.

18.Дезаминирование, определение, виды дезаминирования аминокислот.

19.Окислительное дезаминирование глутаминовой кислоты (фермент, кофермент, значение)

20.Что представляет собой трансаминирование?

21.Назовите ферменты, осуществляющие процесс трансаминирования. К какому классу ферментов они относятся?

22.Назовите кофермент, необходимый для осуществления трансаминирования.

23.Напишите процесс трансаминирования с участием соответствующего фермента.

24.Неокислительное дезаминирование треонина, гистидина.

25.Что представляет собой трансдезаминирование?

26.Напишите процесс трансдезаминирования аспарагиновой кислоты. Назовите ферменты и коферменты, катализирующие этот процесс.

27.Напишите процесс трансдезаминирования аланина. Назовите ферменты и коферменты, катализирующие этот процесс.

28.Что представляет собой восстановительное аминирование?

29.Назовите аминокислоты, синтезируемые путем восстановительного аминирования.

30.Напишите процесс восстановительного аминирования пировиноградной, α-кетоглутаровой и щавелевоуксусной кислот.

31.Напишите процесс декарбоксилирования аминокислот. Какие продукты образуются при декарбоксилировании?

32.Укажите судьбу продуктов декарбоксилирования аминокислот.

33.Напишите процесс декарбоксилирования гистидина и триптофана.

34.Укажите физиологическую роль продуктов декарбоксилирования гистидина и триптофана.

35.Напишите процесс декарбоксилирования глутаминовой и аспарагиновой кислот. Назовите образовавшиеся при этом продукты.

36.Укажите физиологическую роль продуктов декарбоксилирования глутаминовой и аспарагиновой кислот.

Вопросы, задачи и упражнения для самоконтроля.

1. Заполните таблицу.

Место синтеза	Активный фермент	Профермент	Актива-тор	Место действия	Оптимум рН
Желудок Поджелудочная железа Тонкая кишка

2.Биологическая роль аминокислот в организме определяется их использованием в синтезе (использовать таблицу 1-го задания):

1) гема;

2) белков;

3) глюкозы;

4) жирных кислот;

5) биогенных аминов и гормонов – производных аминокислот

(адреналин, тироксин).

3.Пищевая ценность белка зависит от:

1) присутствия всех 20 аминокислот аминокислотного состава;

2) порядка чередования аминокислот;

3) наличия всех незаменимых аминокислот;

4) возможности расщепления в желудочно-кишечном тракте.

4.Соляная кислота желудочного сока:

1) денатурирует белки пищи;

2) создает оптимум рН для пепсина;

3) активирует пепсин аллостерическим путем;

4) обеспечивает всасывание белков;

5) вызывает частичный протеолизпепсиногена.

5.Протеолитические ферменты синтезируются в:

1) химотрипсин; а) активной форме;

2) аминопептидаза; б) неактивной форме;

3) оба; в) поджелудочной железой;

4) ни один. г) желудком.

6.Биологическое значение переваривания белков:

1) источник аминокислот, необходимых для синтеза собственных белков организма;

2) источник незаменимых аминокислот;

3) образование продуктов, лишенных антигенной специфичности;

4) образование продуктов, которые легко всасываются в клетки слизистой оболочки кишечника;

5) источник аминокислот, необходимых для синтеза биологически активных соединений.

Исследование действия пепсина

Принцип метода. Пепсин действует на внутренние пептидные связи, расщепляя белки на пептиды. О действии пепсина на белок, например на фибрин (нерастворимый белок плазмы), можно судить, наблюдая растворение кусочков фибрина. Полученный раствор дает положительную биуретовую реакцию, указывающею на появление в растворе пептидов.

Ход определения. 1. В три пробирки наливают по 1 мл раствора пепсина или желудочного сока. Содержимое первой пробирки кипятят 2 мин и охлаждают под струей воды. Содержимое второй пробирки нейтрализуют раствором NaHCO₃ до щелочной реакции по лакмусу (3-4 капли 10%-ного раствора NaHCO₃). Третью пробирку оставляют без изменения.

2. Во все три пробирки добавляют по маленькому кусочку фибрина или яичного белка. Пробирки выдерживают в термостате при 37˚С 30-45 мин. Затем их вынимают, встряхивают, отмечают видимые изменения белка (растворение, набухание) и проделывают биуретовую реакцию. Положительная биуретовая реакция получается только в третьей пробирке.

Оформление работы.Полученные результаты вносят в таблицу и делают выводы.

№ пробирки	Субстрат	Фермент	Реакция среды	Видимые изменения	Биуретовая реакция	Выводы