Приготовление препаратов в живом виде из различных
Культур микроорганизмов.
Алгоритм выполнения.
Препарат «раздавленная капля» неокрашенный (нативный).
На предметное стекло нанесите бактериологической петлей каплю водопроводной воды, внесите в нее немного исследуемых микроорганизмов, размешайте. Покровное стекло поставьте на ребро у края капли, постепенно опустите на нее. Излишек выступившей жидкости удалите фильтровальной бумагой.
Выращенные на плотной среде микроорганизмы перенесите в каплю жидкости с помощью бактериологической петли, микроскопические грибы – двумя препаровальными иглами. Культуры, выращенные в жидкой среде, поместите на предметное стекло стерильной пипеткой без предварительного нанесения капли волы.
Препарат позволяет установить форму клетки преимущественно крупных микроорганизмов, их размеры, подвижность.
Бактерии, дрожжи, микроскопируйте с объективом 40х, грибы – с объективами 8х, 40х. Зарисуйте препарат. Отработанные препараты живых микроорганизмов помещают в сосуд с дезинфицирующим раствором для обезвреживания.
РИСУНОК.
ЗАДАНИЕ №2
Приготовление препарата в окрашенном виде из различных
Культур микроорганизмов.
Алгоритм выполнения.
Приготовление окрашенных фиксированных препаратов состоит из следующих этапов:
1. Приготовление мазка. На середину чистого предметного стекла наносят маленькую каплю воды, в неё вводят немного бактерий, взятых с плотной питательной среды кончиком стерильной бактериологической иглы, и тщательно перемешивают; полученную слабомутную бактериальную суспензию равномерно распределяют (размазывают) тонким слоем по поверхности предметного стекла на площади 2-3 см2.
2. Высушивание мазка. Полученный мазок высушивают при комнатной температуре на воздухе или (для ускорения) в токе тёплого воздуха высоко над небольшим пламенем горелки, не допуская нагрева стекла (стекло при этом держат мазком вверх).
3. Фиксация мазка. Охлаждённый мазок фиксируют в пламени горелки: стекло с мазком, обращённым кверху, проводят 3-4 раза через пламя. При этом микробы погибают, клетки прикрепляются к стеклу и улучшается их окрашиваемость.
Возможна также фиксация химическим путём (этиловым, метиловым спиртом, смесью равных объёмов спирта с эфиром и др.)
Фиксированные препараты можно микроскопировать только после окраски специальными красителями.
4. Окрашивание мазка.Различают простые и дифференциальные способы окраски микроорганизмов.
Для окраски микроорганизмов используют анилиновые красители. Наибольшее применение имеют основные краски - метиленовый синий, основной фуксин, генциановый фиолетовый и др.
При простой окраске используют один краситель, прокрашивают всю клетку. На охлаждённый мазок наносят 1-2 капли метиленового синего на 3-5 минут, затем смывают водой до тех пор пока промывная вода не станет прозрачной. Промытый мазок высушивают на воздухе или осушают фильтровальной бумагой.
5. Микроскопирование. На сухой препарат наносят каплю иммерсионного масла и микроскопируют с объективом 90х. Формы и расположение микроорганизмов необходимо зарисовать. Под рисунком указать увеличение, способ окраски, объект исследования.
РИСУНОК.
ЗАДАНИЕ №3
Микроскопирование бактерий, плесневых грибов, дрожжей.
Алгоритм выполнения.
Микроскопирование бактерий простым способом.
Приготовьте окрашенный фиксированный препарат (из настоя сена, мяса, рыбы, овощей, налета на кариесных зубах, воды из под цветов), рассмотрите его под иммерсионным объективом 90х.
Обратите внимание на форму клеток бактерий, их взаиморасположение, наличие спор в клетке бацилл. Зарисуйте препарат, укажите увеличение и название.
РИСУНОК.