Оценка 3 – ей фазы плазменного гемостаза – образование фибрина
1.Фибриноген
2.Активность XIII фактора
3.Тромбиновое время
Фактор I — фибриноген — гликопротеин с молекулярной массой около 340000 дальтон, состоящий из 2946 последовательных аминокислот, и представляет собой димер, в каждой единице которого содержатся три полипептидные цепи, соединенные дисульфидными мостиками.
Фактор I вырабатывается паренхиматозными клетками печени и поступает в кровь. Под действием тромбина фибриноген превращается в нерастворимый в крови фибриллярный белок — фибрин, основное вещество (субстрат) тромба.
Фибриноген под влиянием тромбина превращается в фибрин по типу протеолитического дробления молекулы фибриногена. Оставшаяся молекула фибриногена — фибрин-мономер. Эта молекула приобретает способность соединяться с себе подобными и образовывать фибрин-полимер, который представляет гель (или сгусток). Сборка мономеров фибрина проходит этапы формирования димеров, из которых при продольном и поперечном сшивании образуются полимеры фибрина — протофибриллы, а затем нити фибрина. Полноценным, то есть устойчивым к фибринолизину, тромб может стать под действием фибриназы (фактоpa XIIIa). Образовавшийся фибрин называется нерастворимым фибрином.
Фактор XIII — фибринстабилизирующий фактор, фибриназа -гликопротеид с массой молекулы 300 000 — 340 000. Менее термостабилен, чем фибриноген.
Определяется в сосудистой стенке, тромбоцитах, эритроцитах, почках, легких, мышцах, плаценте. В плазме находится в виде профермента, соединенного с фибриногеном. Фактор XIII под влиянием тромбина превращается в активную форму (XIIIa). В крови здоровых людей его содержится 80—120% (сгусток растворяется за 50—100 с). 10% фибриназы обеспечивают полноценный гемостаз, 2% этого фактора достаточны для остановки кровотечения.
Активность фактора XIII хорошо сохраняется при —20 °С (лиофилизированные препараты теряют около трети активности за 3 нед). При комнатной температуре активность фермента падает в течение 2—3 дней. В результате прогревания плазмы или сыворотки до 60 °С фибриназа инактивируется за 10 мин. В инкубируемых растворах фибриногена при 40 °С фибриназа разрушается в течение 3 ч.
Тромбы, образовавшиеся в присутствии фибриназы, очень медленно подвергаются лизису. Если активность фактора XIII снижается, свертки очень быстро распадаются, даже когда фибринолитическая активность крови нормальная.
Установлено, что снижение активности фибриназы сопровождается уменьшением адгезивности и агрегации кровяных пластинок, и наоборот — при повышении активности фибриназы эти свойства тромбоцитов повышаются.
Тромбиновое время – 12- 16 сек
Это время необходимое для образования сгустка фибрина в плазме при добавлении к ней тромбина. Оно зависит только от концентрации фибриногена и активности ингибиторов тромбина (антитромбинаIII, гепарина); используется для оценки как 3-ей фазы свёртывания крови – образования фибрина, так и состояния естественных и патологических антикоагулянтов.
Фактор Флетчера — плазменный прекалликреин, участвующий в реакциях коагуляции в контактной фазе.
Если фактора Флетчера нет в организме, нарушается общее время свертывания, хотя факторы I—XIII содержатся в крови в пределах нормы. Фактор Флетчера активирует факторы VII и IX. Тем самым он связывает внутреннюю и внешнюю системы активации фактора X. Прекалликреин трансформируется в калликреин под влиянием фактора XIIa.
Дефицит фактора Флетчера, подобно недостатку фактора Хагемана, клинически ничем не проявляется.
Фактор Фитцжеральда (Фитцжеральда — Фложе) — высокомолекулярный кининоген плазмы (ВМ-кининоген), который переводится калликреином в кинин и участвует в активации фактора XI, ускоряя действие на последний фактора XIIa. Фактор стабилен в цитратной плазме, сохраняет свою активность 4 мес при —40 °С. Осаждается с эуглобулиновой фракцией плазмы. Активность фактора снижается наполовину после суточного хранения при 37 °С.
В процессе свертывания крови этот фактор не потребляется. Его активность не снижается под влиянием непрямых антикоагулянтов.
ПРОТИВОСВЕРТЫВАЮЩАЯ СИСТЕМА,
СИСТЕМА ФИБРИНОЛИЗА
Тромбообазование в норме ограничивается местом повреждения сосудистой стенки и не распространяется по организму. В ходе нормального гемостаза только небольшие количества факторов свёртывания в плазме превращается в активные протеазы или кофакторы. Антикоагулянты позволяют локализовать свёртывание в месте повреждения и предупредить превращение процесса в системный.
I.Показатели характеризующие состояние антикоагулянтов:
1. АнтитромбинIII
2. Гепарин
3. Ативиованное время свёртывания
4. Протеин С
5. Протеин S
II. Показатели характеризующие плазминовую систему:
1. Плазминоген
2. Альфа-2-антиплазмин
3. Альфа-1-антиплазмин
4. Продукты деградации фибриногена и фибрина
5. D – димер
Основными антикоагулянтами являются антитромбин III и система протеина С.
Физиологический инактиватор тромбина – антитромбин III, образующий комплекс тромбин-антитромбин, в присутствии гепарина способен инактивировать до 60% тромбина в плазме, оставшееся количество инактивируется менее специфическими ингибиторами (α2 макроглобулин). Когда тромбин удаляется с места повреждения, он связывается с тромбомодулином на поверхности эндотелиальных клеток и теряет способность превращать фибриноген в фибрин. Комплекс тромбин-тромбомодулин активирует систему протеина С, которая инактивирует факторы VIIIa и Va, чем полностью блокирует свертывание. Система протеина С в свою очередь активирует систему фибринолиза, предназначенную для растворения образовавшихся сгустков фибрина.
Антитромбин III
Антитромбин III - это D белок с молекулярной массой 60 000, синтезируемый в печени, и связывающийся с инактивируемыми сериновыми протеазами через каскад свёртывания.
Для определения антитромбина III в плазме крови существуют много различных методов (в основном клоттинговый), преимущественно основанных на применении хромогенных субстратов.
Протеин С
Диагностика комплекса Протеина С осуществляется для ориентировочного выявления врожденной или приобретенной недостаточности противосвертывающей системы протеина С (протеин С, протеин S, тромбомодулин, тромбин, ингибитор протеина С), которая приводит к тромбозам различной локализации.
D – димер
При расщеплении волокон фибрина образуются фрагменты –D димеры. Выявление в плазме крови D – димера свидетельствует об активации в ней фибринолиза. Повышение содержания фрагмента фибриногена D – димера является одним из главных маркёров активации системы гемостаза, поскольку отражает как образование фибрина так и его лизис. Определение содержания фрагмента D – димера используется для исключения тромбоза и диагностики ДВС – синдрома.