Работа № 1. Определение витамина С в моче
Принцип метода:
Метод основан на способности аскорбиновой кислоты восстанавливать краситель 2,6 – дихлорфенолиндофенол. Окисленная форма красителя обладает окраской (в кислой среде - розовой), восстановленная форма – бесцветная. Количество витамина С определяют, титруя исследуемый подкисленный раствор дихлорфенолиндофенолом до появления розовой окраски. Пока в растворе есть аскорбиновая кислота, краситель обесцвечивается, когда вся аскорбиновая кислота будет окислена, титруемый раствор приобретает розовую окраску.
| Реактивы: 1. Уксусная кислота – 3%. 2. Дихлорфенолиндлфенол– 0,001н. 3. Дистиллированная вода. 4. Моча. | Оборудование: 1. Колба на 50 или 100 мл. 2. Пипетки на 1 мл и 5 мл. 3. Бюретка. |
Ход определения:
· В колбу наливают 1 мл мочи, 7 мл дистиллированной воды, 3 мл уксусной кислоты.
· Смесь титруют дихлорфенолиндлфенолом до появления розовой окраски, устойчивой 30 с.
· Для расчета содержания витамина С в суточной моче используют формулу:
А * 0.088 * 1500 = витамин С. мг,
Где:
1500 – суточный диурез;
0,088 – количество мг аскорбиновой кислоты, соответствующей 1 мл 0,001 н раствора дихлорфенолиндлфенола;
А – количество мл дихлорфенолиндлфенола, пошедшего на титрование исследуемого раствора.
Норма: с мочой за сутки выделяется от 20 до 40 мг витамина С.
Диагностическое значение: определение содержания витамина С в моче дает представление о запасах этого витамина в организме.
Работа № 2. Определение витамина С в продуктах питания.
Принцип:
Аскорбиновая кислота является сильным восстановителем и может быть определена йодометрическим методом при определенном значении рН раствора (например рН = 7). При титровании йодом аскорбиновая кислота окисляется, образуя дегидроаскорбиновую кислоту.
| Реактивы: 1. Картофель, капуста. 2. Песок. 3. 2 % соляная кислота. 4. 0,5 % крахмал. 5. 0,003 н. раствор йода. | Оборудование: 1. Ступка. 2. Химический стакан. 3. Воронка. 4. Вата. 5. Колба на 100 мл. 6. Титровальная колонка. |
Ход работы:
Подготовка экстракта из пищевых продуктов для определения витамина С.
· 2 г капусты или картофеля натрите на терке в чашке Петри или мелко порежте и разотрите в ступке с небольшим количеством толченого стекла или песка.
· Соберите массу из чашки Петри, если измельчали на терке, в стаканчик.
· Добавьте 10 мл 2 %-го раствора НС1.
· Если измельчали в ступке - добавьте прямо в ступку 10 мл 2 %-го раствора НС1.
· Хорошо перемешанную массу отфильтруйте через стеклянную воронку с ватой в коническую колбу на 50 — 100 мл.
· Массу на фильтре промойте несколькими каплями воды.
Определение количества витамина С.
· В фильтрат прилейте 1 мл 0,5% раствора крахмала и оттитруйте его рабочим раствором 0,003 н. йода до появления синего окрашивания.
3. Расчет:
При расчете содержания витамина С в продукте использовать формулу определения массы при помощи титра по определяемому веществу:
М = Н * Э * V / 1000 (г)
Где:
Н - молярная концентрация эквивалента йода;
Э — молярная масса эквивалента аскорбиновой кислоты в г, равная в данном случае 88 г;
V — объем пошедшего на титрование йода, в мл.
Для пересчета на содержание витамина С в 100 г продукта использовать формулу:
Х = М * 1000 / 2 (г)
Норма:
Содержание витамина С в капусте 0,45 мг%, в картофеле — 20 мг%.
Для перевода мг% из грамм результат умножают на 100.
Ответьте на вопросы:
1. Напишите структурную формулу витамина С.
2. К какому классу органических соединений можно отнести витамин С?
3. Какие функции витамин С играет в организме?
4. На каких свойствах витамина С основано его колическтвенное определение?
5. В каких продуктах питания содержание витамина С наибольшее?
6. *От каких факторов зависит содержание витаминов в продуктах питания?
Практическая работа
«Качественные реакции на гормоны».
Цели практической работы:
· закрепить знания о функциях гормонов в организме;
· научиться проводить качественные реакции на гормоны.
Задания для самостоятельной работы:
1. Перепишите в тетрадь принцип и методику проведения практической работы.
2. Оборудуйте рабочее место для практической работы.
3. Выполните практическую работу.
4. Оформите результаты работы оформить в виде таблицы:
| № п/п | Ход работы. Рисунки. | Наблюдения | Выводы |
5. Сделайте вывод по работе.
6. Ответьте на дополнительные вопросы.