Клинико-диагностическое значение определения альбуминов в крови
Альбумины - это простые белки (протеины) плазмы крови, которые определяют большую часть онкотического давления, участвуют в обезвреживании и транспортировке и жирных кислот, холестерина, билирубина, лекарственных веществ, образую с ними водо-растворимые комплексы. Альбумины сравнительно легко обновляются в организме. Основным местом их синтеза является печень.
Гипоальбуминемия (снижение концентрации альбумина в крови) - наблюдается при:
· Голодании;
· воспалительных заболеваниях;
· циррозе печени;
· злокачественных опухолях;
· кровотечениях;
· после удаления желудка;
· выхода белка из русла крови: в просвет кишечника – при завороте кишок, перитоните; на ожоговую поверхность – при обширных ожогах; с мочой – у больных, страдающих нефротическим синдромом (для которых характерно повышенное выделение почками альбумина и некоторых других белковых фракций);
· остром и хроническом гломерулонефрите, почечной недостаточности, лейкозах.
При падении уровня альбуминов ниже 30 г/л, «освободившаяся» вода перемещается из сосудов в более плотные ткани, вызывая отеки.
Гиперальбуминемия(возрастаниеуровня альбумина в крови) практически не встречается, а если и обнаруживается, то она, как правило, вызывается уменьшением содержания воды в кровеносном русле (дегидратацией), гемоконцентрацией и внутривенном введении больших количеств концентрированных растворов альбумина.
Ответьте на вопросы:
1. Расскажите о строении, свойствах альбуминов.
2. Перечислите функции альбуминов.
3. На каком свойстве альбуминов основано их определение в сыворотке крови?
4. При каких заболеваниях уровень альбуминов изменяется? Почему?
5. *Напишите строение пептида АЛА – ТРИ – ЦИС – ЛЕЙ. Какой зарад будет у него в водном растворе? Как он будет двигаться а электрическом поле? В какой среде он будет достигать изоэлектрической точки?
Практическая работа
«Определение белковых фракций
экспресс-методом в сыворотке крови».
Цели практической работы:
· закрепить знания о составе и функциях белковых фракций крови;
· изучить понятие о диспротеинемии и парапротеинемии;
· научиться исследовать содержание белковых фракций в сыворотке крови.
Задания для самостоятельной работы:
1. Перепишите в тетрадь принцип и методику проведения практической работы.
2. Оборудуйте рабочее место для практической работы.
3. Выполните практическую работу.
4. Сделайте необходимые расчеты.
5. Заполните бланк анализа. Оцените полученные результаты.
6. Сделайте вывод по работе.
7. Зарисуйте протеинограммы схематично в виде графиков.
8. Ответьте на дополнительные вопросы.
Принцип:
Метод основан на том, чторастворы фосфатного буфера определенной концентрации осаждают с образованием очень мелких хлопьев различные фракции белков.
| Реактивы: 1. Основной фосфатный буфер. 2. Рабочий раствор фосфатного буфера А. 3. Рабочий раствор фосфатного буфера Б. 4. Рабочий раствор фосфатного буфера В. 5. Рабочий раствор фосфатного буфера Г. | Оборудование: 1. Пробирки - 6 шт. 2. Пипетки на 0.5 мл, 1 мл, 5 мл 3. ФЭК с кюветой на 1 см. |
Ход определения.
· 0,5мл сыворотки крови, 0.75 мл воды, 3.75 мл основного фосфатного буфера вносят в пробирку, хорошо перемешивают.
· Пять пробирок нумерую.
· В нумерованные пробирки вносят по 0,5 мл полученной смеси.
· В пробирку № 1 вносят 5 мл рабочего раствора А.
· В пробирку № 2 вносят 5 мл рабочего раствора Б.
· В пробирку № 3 вносят 5 мл рабочего раствора В.
· В пробирку № 4 вносят 5 мл рабочего раствора Г.
· В пробирку № 5 (контроль) вносят 5 мл воды.
· Осторожно чтобы не образовалась пена, перемешать содержимое пробирок (перевернуть 5-6 раз) и оставить стоять при комнатной температуре на 15 минут.
· Через 15 минут колориметрировать на ФЭКе пробирки № 1,2,3 и 4 против контроля в кювете 1 см при красном светофильтре.
Расчетколичества белковых фракций проводят по формулам:
А = (Е1 – Е2) / Е1 * 100%
А2 = (Е2 – Е3) / Е1 *100%
В2 = (Е3 – Е4) / Е1 *100%
Г = Е4 / Е1 * 100%
Где:
Е1 - экстинция пробирки № 1, указывает на содержание всех белковых фракций.
Е2, Е3, Е4 – экстинции соответственно 2, 3 и 4 пробирок.
А – содержание альбуминов, %.
А2 – содержание альфа-глобулинов, %.
В2 – содержание бетта-глобулинов, %.
Г – содержание гамма-глобулинов, %.
Норма белковых фракций в крови:
· Альбумины - 52-76.7 % или 35-55 г/л.
· Глобулины а1 - 3.5-6.0 % .
а2 - 6.9-10.5 %.
· вся фракция альфа-глобулинов 10.4-16.5 % или 8-12 г/л.
· бетта-глобулины - 7.3-12.5 % или 3-11 г/л.
· гамма-глобулины 12.8-19 % или 11-13 г/л.