РАБОТА № 2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАЛЬЦИЯ ФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ. Кальций является составным компонентом костной ткани, участвует в функционировании свёртывающей системы крови, в мышечном сокращении, в проведении нервного импульса, как вторичный посредник в реализации гормонального сигнала внутри клетки-мишени.
ПРИНЦИП МЕТОДА. Кальций в щелочной среде с глиоксальбис-(2-гидроксианилом) (ГБОА) образует окрашенное соединение. Интенсивность окраски раствора прямо пропорциональна концентрации кальция в сыворотке крови и определяется фотометрически.
ХОД РАБОТЫ: взять три пробирки.
| ВНЕСТИ | ОПЫТ | СТАНДАРТ | КОНТРОЛЬ |
| Н2О, мл | - | - | 0,01 |
| Сыворотка крови мл | 0,01 | - | - |
| Стандарт Са, мл | - | 0,01 | - |
| NaOH, мл | 0,75 | 0,75 | 0,75 |
Перемешать, инкубация 5-10 мин. Добавить в каждую пробирку по 1 мл раствора ГБОА и сразу же перемешать. Измерить оптическую плотность в интервале 5-12 мин при λ = 540 нм, кювета 0,5 см.
РЕЗУЛЬТАТ: Еоп =
Ест =
Еоп
РАСЧЁТЫ: Соп = ·25 = ммоль/л
Ест
Стандарт кальция = 25 ммоль/л.
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.
Содержание кальция в сыворотке крови у взрослых составляет в норме 2,2 - 2,75 ммоль/л, у новорожденных 2,25 – 2,45 ммоль/л, у детей 2-14 лет 2,5 – 2,87 ммоль/л.
Физиологическая гиперкальцемиябывает у новорожденных, у недоношенных, а также у некоторых лиц после принятия пищи.
Патологическая гиперкальцемиянаблюдается при гиперпаратиреозе (мобилизация ионов кальция из костей), акромегалии, злокачественных опухолях с поражением костей, миеломной болезни, саркоидозе, тиреотоксикозе, раке легкого, почки, поджелудочной железы, печени.
Гипокальцемияотмечается при дефиците витамина D, гипопаратиреозе, хронической почечной недостаточности, нефротическом синдроме, циррозе печени, остром панкреатите.
ВЫВОД:
Дата: ________________
ЗАНЯТИЕ № 35
РАБОТА: БИОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МОЧИ
ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ. К компонентам мочи, которые у здорового человека не обнаруживаются обычными качественными реакциями, относятся: белок, сахар, кетоновые тела, желчные пигменты, кровь. Они появляются в моче при нарушениях обмена веществ или нарушении функции органов. Поэтому их определение в моче используют для диагностики заболеваний и контроля за ходом лечения.
1. КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ НА БЕЛОК
ПРИНЦИП МЕТОДА: с помощью азотной (или сульфосалициловой) кислоты при наличии белка в моче образуется белый осадок (денатурированный белок).
ХОД РАБОТЫ: взять две пробирки - контроль и опыт.
| ОТМЕРИТЬ | КОНТРОЛЬ | О П Ы Т |
| М О Ч А Н2О Сульфосалициловая кислота 20% ------------------------------------- (или наслоение мочи на концентрированную азотную кислоту - НNО3) | - 1,0 мл 3 капли | 1,0 мл - 3 капли |
РЕЗУЛЬТАТ:
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.
Белок появляется в моче при нефрите, сердечной декомпенсации, воспалении мочевыводящих путей (цистите), повышении артериального давления, иногда при беременности, нефрозах.
В Ы В О Д: