Исходный уровень знаний и навыков. 1 Характеристику основных классов ЛП

 

Студент должен знать:

1 Характеристику основных классов ЛП.

2 Метаболизм ЛП в норме.

3 Пути передачи гормонального сигнала на клетку (аденилатциклазный, инозитолтрифосфатный).

4 ЦТК, его энергетический баланс.

5 Структуру и функцию полиферментных комплексов (на примере пируват-ДГ).

 

Студент должен уметь:

1 Проводить исследование на фотоэлектроколориметре.

 

Структура занятия

 

Теоретическая часть

1.1 Механизм мобилизации жира (роль гормонов, цАМФ и Ca2+).

1.2 Свойства и физиологическая роль свободных жирныхкислот (СЖК). Транспорт СЖК в крови.

1.3 Окисление ТГ в тканях, окисление глицерина, его энергетический баланс.

1.4 Этапы b-окисления насыщенных жирных кислот. Механизм активации и транспорта жирных кислот через митохондриальную мембрану. Роль карнитина. Особенности b-окисленияненасыщенных жирных кислот и жирных кислот с нечетным числом атомов. Энергетический баланс окисления C16, C15, C18:2.

1.5 Энергетический баланс окисления тристеарата. Физиологическая роль СЖК при стрессе.

1.6 Обмен ацетил-КоА (пути образования и утилизации).

1.7 Кетоновые тела – биосинтез, утилизация, физиологическая роль.

 

Практическая часть

2.1 Решение задач.

2.2 Лабораторная работа.

 

Задачи

1 Жирная кислота C15 будет вступать в ЦТК в виде:

а) цитрата; б) сукцинил КоА; в) ацетил КоА; г) a-кетоглутарата; д) сукцината; е) малонил КоА?

2 Мембрана митохондрий проницаема для:

а) ацил-АПБ; б) ацил-КоА; в) малонил-КоА; г) ацетил-КоА; д) ни одного из названных соединений; е) всех названных соединений?

3 Гормончувствительная липаза обеспечивает:

а) гидролиз эфирных связей в гормонах;

б) адреналин-зависимый гидролиз пищевых липидов;

в) мобилизацию ТГ жировой ткани;

г) гидролиз ТГ впечени;

д) гидролиз ТГ в мозге?

4 Главным энергетическим субстратом для мозга в нормальных условиях является:

а) глюкоза; б) аминокислоты; в) кетоновыетела; г) жирные кислоты; д) молочная кислота; е) ТГ?

5 При голодании окисление СЖК или кетоновых тел приводит к торможению гликолиза в мышцах, потому что:

а) ацетил-КоА подавляет активность пируват-ДГ;

б)увеличение отношения АТФ/АДФ лимитирует гексокиназу;

в) гипоинсулинемия ограничивает потребление глюкозы мышцей;

г) увеличение отношения NADH/NAD+ лимитирует 3-ФГА-ДГ;

д) жирные кислоты обладают контринсулярным эффектом;

е) активируется ГНГ?

6 Кофакторы, общие как для b-окисления СЖК, так и для аэробного гликолиза, включают:

а) витамин B12; б) NAD+; в) АДФ; г) HS-KoA; д) аскорбат; е) биотин?

7 Мобилизация липидов из депо происходит при:

а) уменьшении концентрации цАМФ;

б) увеличении концентрации цАМФ;

в) увеличении концентрации инсулина;

г) уменьшении концентрации инсулина;

д) увеличенииконцентрацииадреналина;

е) увеличении концентрации ионизированного Ca2+ в крови?

8 Для транспорта CH3CO-SКоА из митохондрии в цитоплазму при биосинтезе пальмитиновой кислоты необходимо наличие:

а) карнитин-ацилтрансферазы; б) ацетил-КоА-карбоксилазы; в) КоА-гидролазы; г) АТФ-цитратлиазы; д) цитратсинтетазы; е) малонил КоА?

9 Что является ключевым метаболитом при биосинтезе кетоновых тел в печени?

а) ацетил-КоА; б) малонил-КоА; в) ацетоацетил-КоА; г) b-окси-метилглютарил-КоА; д) цитрат; е) NADH?

10 Какие из следующих ферментов необходимы дляпревращения ПВК в ацетил-КоА:

а) пируват ДГ; б) цитратсинтетаза; в) пируваткарбоксилаза; г) ФЕПКК; д) АТФ-цитрат-лиаза; е) дигидролипоат ДГ?

 

Лабораторная работа. Определение общих липидов в сыворотке крови сульфофосфованилиновым методом

Принцип метода. Продукты распада ненасыщенных липидов образуют с реактивом, состоящим из серной, ортофосфорной кислот и ванилина, соединение, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию общих липидов в сыворотке крови.

ВНИМАНИЕ! Соблюдать меры безопасности при работе с концентрированной серной кислотой и кипячением на водяной бане. (Проводится дополнительный инструктаж по технике безопасности.)

Ход работы. Готовят опытную и контрольную пробы по схеме:

Проба H2SO4 Сыворотка крови Вода дистиллированная
Опытная 5 мл 0,1 мл -
Контрольная 5 мл - 0,1 мл

 

Пробы тщательно перемешивают и помещают в кипящую водяную баню на 10 мин. Затем охлаждают водопроводной водой до комнатной температуры. Отбирают пипеткой из опытной и контрольнойпроб по 0,2 мл гидролизата и переносят в сухие пробирки. Добавляют в каждую пробирку по 3 млфосфорно-ванилиновой смеси, тщательно перемешивают и оставляют стоять 45 мин при комнатной температуре.

Интенсивность окраски измеряют на фотометре против контроля при зеленом светофильтре (длина волны 500–560 нм) в кювете шириной5 мм. Расчет производят по калибровочному графику. Результат выражают в миллиграммах на 100 мл сыворотки крови (мг%) или граммах на литр (г/л).

Норма. Содержание общих липидов в сывороткекровиздоровых людей составляет 48 г/л, или 400–800 мг%.

Клинико-диагностическое значение. Как физиологическое явление гиперлипемия наступает через 1–4 часа после приема пищи.

Патологическая гиперлипемия наблюдается при сахарном диабете (иногда до 10–20 г/л), при липоидном нефрозе (до 50 г/л), билиарном циррозе печени, остром гепатите (особенно впериод желтухи), остром или хроническом нефрите.

Содержание общих липидов в крови возрастает также при эссенциальной гиперлипидемии, ожирении, атеросклерозе (часто у больных ИБС), гипотиреозе, панкреатите, злоупотреблении алкоголем.

Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагности­ческую оценку.

Рекомендуемая литература

Основная

1 Материал лекций.

2 Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1990, С. 292–300; 1998. С. 370–381.

3 Николаев А. Я. Биологическая химия. М.: Высшая школа, 1989. С. 263–266, 270–273, 280–281.

Дополнительная

4 Филиппович Ю. Б. Основы биохимии. М.: Высшая школа, 1993. С. 380–402.

5 Марри Р. и др. Биохимия человека. М.: Мир, 1993. Т. 1. С. 274–297.

6 Климов А. Н., Никульчева Н. Г. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. СПб, 1995.[AK1]

7 Рецепторы ЛПНП в развитии атеросклеротических изменений сосудов // В мире науки. 1988. № 12.[AK2]

 

 

Занятие 15

Биосинтез липидов. Регуляция и патология липидного обмена

 

Цель занятия: изучить основные типы и механизмынарушений липидного обмена. Научиться определять уровень общего холестерина в крови.