Увеличение возможностей микроскопии при использовании явления флуоресценции
| Виды микроскопии | Пространственное разрешение | Исследуемые параметры | Возможность иденти-фикации на уровне вида |
| Световая | ³ 0,2 мкм | только морфологические | нет |
| Флуоресцент-ная | ³ 0,05 мкм | морфологические и функциональные (например, жизнеспособность, синтез белка, нуклеиновых кислот и проч.) - за счет имеющихся природных и синтетических флуоресцирующих красителей, избирательно связывающихся с разными веществами (ДНК,РНК) и структурами клетки.
Рисунок 1. Препарат окрашен акридиновым оранжевым: живые микробы с высоким уровнем синтеза НК - зеленого цвета, погибшие микробы - оранжевые
| да,
при использовании иммунофлуоресцентного метода (флуорохром связан с антителами, специфичными исследуемому микробу. В этом случае визуализи-руются только связавшие метку микробы).
Рисунок 2. Препарат (аналогичный изображенному на рис.1) обработан антителами к E.coli, меченными ФИТЦ (флуорохром). Эти антитела связались только соответствующи-ми бактерииями, кокки и палочки др. вида не визуализируются. В пре-парате идентифицированы E.coli
|
В большинстве случаев микроскопические препараты из бактерий подвергают сложным методам окраски. К таким методам относятся метод Грама, Циля-Нильсена, Ожешко, Гинса-Бурри и другие (табл.4,5). Сложные методы основаны на различиях избирательности прокрашивания разных клеточных структур, что позволяет идетифицировать разные группы микробов по тому или иному признаку.
Таблица 4.