Техника и механизм окраски по Грамму (дифференцировка грам-положительных и грамотрицательных бактерий в зависимости от строения клеточной стенки)
Этапы окраски по Граму | Происходящие при окраске процессы | Микроскопическая картинка |
1. На мазок наносят краситель генцианвиолет (кристаллический фиолетовый) на 1-2 мин | Генцианвиолет проникает в клеточную стенку и фиксируется в пептидогликане | |
2. Генцианвиолет сливают, а на мазок наносят раствор Люголя - до почернения мазка (10 - 20 сек) | Молекулы йода способствуют созданию прочной структуры генцианвиолет-пептидогликан | |
3. Действие дифференцирующей жидкости - 96° этанол - мазок промывают до прекращения отхождения струек синей краски. 4. Мазок промывают водой. | Спирт вымывает генцианвиолет из тонкослойного пептидогликана грам- бактерий, обесцвечивая их | |
5. На мазок наносят раствор фуксина на 2-3 мин | Фуксин проникает в обесцвеченные спиртом грам- бактерии, окрашивая их в красный цвет. Цвет грам+ бактерий не изменяется, так как их пептидогликан прочно удерживает генцианвиолет |
Таблица 5