Тема. Визначення азоту аміаку, нітритів, нітратів і хлоридів
Приготування водної витяжки з ґрунту. Внаслідок біохімічних процесів самоочищення ґрунту органічні речовини, що потрапили в нього, поступово розкладаються, а потім перетворюються на мінеральні солі. Більша частина мінеральних солей, що утворюються у ґрунті під час мінералізації, розчиняється у воді, тому для визначення готують водну витяжку з ґрунту. Приготування водної витяжки залежить не лише від того, які речовини слід визначити, але й від ступеня здрібнювання ґрунту, температури, часу устоювання, співвідношення маси ґрунту й води.
Для визначення азоту аміаку, нітритів, нітратів і хлоридів, а також окисності водну витяжку готують у день проведення аналізів, змішуючи наважку ґрунту (50-100 г) з п'ятикратним об'ємом дистильованої води. Суміш збовтують 3-5 хв і фільтрують декілька разів через щільний фільтр. Якщо проведення аналізів переноситься на більш пізній строк, то приготовану витяжку консервують додаванням 0,2 г оксиду ртуті і зберігають у темному місці в закритому посуді.
Визначення окисності водної витяжки. Окисність ґрунту визначається кількістю кисню, витраченого на окислення органічних речовин водної витяжки зі 100 г ґрунту. Метод визначення окисності ґрунтується на здатності марганцевокислого калію виділяти у кислому середовищі в присутності органічних речовин атомарний кисень, що витрачається на їх окислення.
У колбу місткістю 250 мл наливають 10 мл водної витяжки, що відповідає 2 г ґрунту, доливають 90 мл дистильованої води. До отриманих 100 мл вихідного розчину додають піпеткою 5 мл 25% розчину сірчаної кислоти, із бюретки - 10 мл 0,01 н. розчину марганцевокислого калію. Рідину нагрівають і кип'ятять 10 хв (від часу закипання). Знявши колбу з вогню, в гарячий розчин доливають із бюретки 10 мл 0,01 н. розчину щавлевої кислоти. Знебарвлену рідину титрують марганцевокислим калієм до появи блідо-рожевого забарвлення. Підраховують об'єм розчину КMnO4, долитого в колбу до і після кип'ятіння (V1).
Для визначення поправкового коефіцієнта в колбу з відтитрованою до блідо-рожевого кольору рідиною знову доливають 10 мл 0,01 н. щавлевої кислоти і титрують марганцевокислим калієм до появи такого ж забарвлення. Отримують об'єм 0,01 н. розчину КМnO4 (мл), витрачений на титрування 10 мл 0,01 н. розчину щавлевої кислоти. Поправковий коефіцієнт К обчислюють за формулою
Виходячи з того, що 1 мл 0,01 н. розчину КМnO4 виділяє 0,08 мг кисню, а 1 мл 0,01 н. розчину С2Н2O4 потребує на окислення 0,08 мг кисню, знаходять окисність у міліграмах кисню, який пішов на окислення органічних речовин, що містяться у 10 мл водної витяжки з 2 г ґрунту:
,
де V1 - загальний об'єм 0,01 н. розчину КМnO4, що пішов на окислення 100 мл вихідного розчину і на 10 мл 0,01 н. розчину С2Н2O4, мл;
V2 - об'єм 0,01 н. розчину КМnO4, витраченого на окислення 10 мл 0,01 н. розчину С2Н2O4, мл;
К - поправковий коефіцієнт 0,01 н. розчину КМnO4;
0,08 - кількість кисню, який виділився з 0,01 н. розчину КМnO4 при нагріванні, мг;
V - кількість аналізованого ґрунту (2г).
Отримане значення необхідно помножити на 50, щоб одержати окисність 100 г ґрунту.
Визначення хлоридів у водній витяжці. Хлористі солі у вигляді хлористого натрію у водній витяжці з ґрунту осаджуються титрованим розчином азотнокислого срібла в присутності індикатора хромовокислого калію, який після осадження сріблом усіх хлоридів вступає в реакцію з азотнокислим сріблом, змінюючи забарвлення із зеленкувато-жовтого на цеглясто-червоне внаслідок утворення хромовокислого срібла:
NaCl + AgNO3 = AgCl + NaNO3;
2AgNO3 + K2CrO4 = Ag2CrO4 + 2KNO3.
За кількістю витраченого на осадження хлористих солей азотнокислого срібла обчислюють вміст хлоридів у водній витяжці.
У колбу місткістю 200 мл наливають 50 мл водної витяжки з ґрунту, додають 10 крапель хромовокислого калію і титрують розчином азотнокислого срібла до появи цеглясто-червоного забарвлення. Оскільки в 50 мл водної витяжки містяться хлориди із 10 г ґрунту, то для визначення кількості хлоридів у 100 г ґрунту кількість азотнокислого срібла, витрачену на титрування водної витяжки з 10 г ґрунту, множать на 10.
Визначення аміаку у водній витяжці ґрунту. Принцип визначення азоту аміачних сполук ґрунтується на їх здатності утворювати забарвлені сполуки з реактивом Несслера, який являє собою подвійну сіль йодистої ртуті та йодистого калію, розчинених у їдкому калі. Цей реактив із аміаком дає жовте забарвлення внаслідок утворення йодистого меркурамонію за реакцією
NH3 + [2(HgJ2·2KJ) + 3 KOH] = NH2Hg2JO + 7KJ + 2H2O.
Для якісного визначення аміаку у пробірку наливають 5 мл досліджуваної водної витяжки, додають 5-6 крапель реактиву Несслера, збовтують, залишають на 5 хв і, розглядаючи вміст пробірки зверху вниз на білому тлі, спостерігають появу жовтого забарвлення. Відсутність забарвлення свідчить про відсутність аміаку.
Для визначення вмісту аміаку в ґрунті в один циліндр Геннера наливають 100 мл досліджуваної водної витяжки, а в інший — 1 мл розчину хлористого амонію, який містить 0,01 мг аміачного азоту, а потім — 100 мл безаміачної дистильованої води. Вміст останнього циліндра ретельно перемішують скляною паличкою. Після цього в обидва циліндри додають по 2 мл 50% розчину сегнетової солі, потім — по 2 мл реактиву Несслера. Вміст обидвох циліндрів перемішують і-через 10 хв розглядають зверху вниз на білому тлі. Якщо в одному з них забарвлення інтенсивніше, обережно відливаючи частину вмісту, досягають однакового забарвлення в обидвох циліндрах.
Вміст азоту амонійних солей (мг/л) в досліджуваній водній витяжці з ґрунту визначають за формулою
де а - вміст азоту в розчині хлористого амонію, мг/мл;
V1 - об'єм водної витяжки, взятої для визначення, мл (100 мл);
V2 - об'єм розчину хлористого амонію, взятого для приготування еталонного розчину, мл;
h1, - висота стовпчика рідини у циліндрі з досліджуваною пробою, см;
h2 - висота стовпчика рідини в циліндрі з еталонним розчином, см.
Визначення солей азотистої кислоти (нітритів). Якісну пробу та кількісне визначення здійснюють за допомогою реактиву Грісса, який утворює з азотистою кислотою сполуку рожевого кольору. Реактив Грісса складається з нафтиламіну і сульфанілової кислоти, розчинених в оцтовій кислоті, які реагують із азотистою кислотою за рівнянням
C10H7NH2 + NH2C6H4SO3H + HNO3 = NH2 – C10H6 – N = N – C6H4SO3H + 2H2S
Для якісного визначення нітритів до 10 мл досліджуваної витяжки додають 5-6 крапель реактиву Грісса, добре перемішують і залишають на 5-7 хв. Поява рожевого забарвлення свідчить про наявність нітритів, при відсутності останніх колір вмісту, пробірки не змінюється.
Для кількісного визначення нітритів в одну колбу наливають 100 мл водної витяжки, в іншу - 1-10 мл (залежно від кількості нітритів) стандартного розчину азотистого натрію, що містить в 1 мл 0,01 мг азоту, і до 100 мл додають дистильованої води. В обидві колби доливають по 5 мл реактиву Грісса і обережно нагрівають на водяній бані при температурі 50-60°С упродовж 10 хв. Вміст колб переносять у циліндри Геннера і здійснюють колориметрування, відливаючи частину вмісту з одного циліндра, в якому забарвлення інтенсивніше, до однакового забарвлення в обидвох циліндрах. Вміст азоту нітритів у досліджуваній пробі (мг / л) визначають за формулою
,
де а - вміст азоту нітритів у розчині, взятому для приготування еталонного розчину мг/мл;
h1 - висота стовпчика рідини в циліндрі з досліджуваною пробою, см;
h2 - висота рідини в циліндрі з еталонним розчином, см;
V1 - об'єм водної витяжки, мл;
V2 - об'єм розчину, взятого для приготування еталонного розчину, мл.
Визначення солей азотної кислоти (нітратів). Наявність у водній витяжці з ґрунту азотнокислих сполук свідчить про те, що азотововмісні речовини повністю мінералізувалися.
Для якісного визначення нітратів у пробірку наливають 1 мл водної витяжки, додають кристалик бруцину й 2 мл концентрованої сірчаної кислоти. Якщо у водній витяжці присутній азот нітратів, з'являється рожеве забарвлення, яке згодом перетворюється на жовте.
При кількісному визначенні азоту нітратів у водній витяжці з ґрунту в порцелянову чашку наливають 100 мл витяжки і випарюють насухо на водяній бані. Дають чашці охолонути, а потім додають 1 мл дифеніл сульфокислоти й ретельно розтирають з осадом. Через 10 хв у чашку додають 10 мл дистильованої води і 3 мл їдкого калі. При наявності нітратів утворюється жовте забарвлення, яке порівнюють у циліндрах Геннера із забарвленням розчину нітрату калію. Для цього вміст порцелянової чашки переносять у циліндр Геннера й доводять дистильованою водою до 100 мл.
Вміст азоту нітратів у досліджуваній витяжці (мг/л) знаходять за формулою
,
де а - вміст азоту нітратів у розчині азотнокислого калію, мг/мл;
h1 - висота стовпчика рідини в циліндрі Геннера з водною витяжкою, см;
h2- висота стовпчика рідини в циліндрі Геннера з еталонним розчином нітрату калію, см;
V1 - об'єм досліджуваної витяжки, мл;
V2 - об'єм розчину азотнокислого калію, взятого для приготування еталонного розчину, мл.
За даними Фодора, в 100 г незабрудненого ґрунту міститься 6,8 мг загального азоту, 5,7 мг аміаку та 12,6 мг азотної кислоти.
Лабораторна робота № 4