Капельных инфекций
Цель: освоить методику контроля качества дезинфекции в очагах капельных инфекций.
Задания:
1. Провести дезинфекцию поверхностей 0,5% раствором хлорамина;
2. Проконтролировать качество дезинфекции.
Материалы: 0,5% раствор хлорамина; трафарет 10×10 см, поверхность лабораторного стола, взвесь суточной 1 млрд. культуры S. aureus, ватные тампоны для контаминации, стерильные тампоны, смонтированные в пробирке с 1 мл 1% тиосульфата натрия, среды: 6,5% солевой бульон, чашки с ЖСА, скошенный МПА, плазма кроличья, реактивы для окраски по Граму.
Методика:
1. Ограничить площадь лабораторного стола или иной поверхности трафаретом 10х10 см;
2. Контаминировать её тампоном, смоченным взвесью стафилококка (дважды по 1 мин); дать высохнуть;
3. Тщательно в течение 10 минут протереть тампоном, смоченным раствором хлорамина (не ниже 20оС), ограниченную трафаретом и контаминированную стафилококком поверхность.
Методика контроля качества дезинфекции:
1. Проводится не позднее 30-45 минут после дезинфекции;
2. Смыть стерильным ватным тампоном, смоченным в растворе тиосульфата натрия, продезинфицированную площадь (не выходя за границы трафарета);
3. Тампон опустить в пробирку с солевым бульоном;
4. Через 24 часа инкубации в термостате при 37оС из бульона сделать высев на ЖСА;
5. После 48-часовой инкубации в при 37оС подозрительные колонии высеять из ЖСА на скошенный МПА, поместить МПА в термостат на 24 часа при 37оС;
6. Сделать мазки с окраской по Граму из культуры на МПА и поставить пробу на плазмокоагулазу;
7. Ответ об обнаружении золотистого стафилококка дают на основании характера роста на питательных средах, характерной морфологии и положительного теста на плазмокоагулазу;
8. Заключение: дезинфекция считается качественной, если в посевах смывов не выделен золотистый стафилококк.
Рекомендации по выполнению задания:
1. В первый день провести дезинфекцию, сделать смыв и посеять его в солевой бульон; на второй день из солевого бульона сделать высев на среду ЖСА; на четвёртый день отсеять подозрительные колонии на скошенный МПА; на пятый день определить морфологию, поставить тест на плазмокоагулазу и дать заключение.
2. Выполнение задания оформляется в виде протокола в альбоме.
Контаминация поверхности стола 10×10 см 1 млрд. взвесью стафилококка | Дезинфекция поверхности стола 0,5% раствором хлорамина | Контроль качества дезинфекции (смыв с поверхности стола) |
по Граму
плазма МПА ЖСА солевой бульон
37оС – 24 ч. 37оС – 48 ч. 37оС – 24 ч.
Рис. 6. Общая схема исследования по контролю качества дезинфекции поверхностей в очаге капельных инфекций