Изучение секционного материала
Проведение вскрытия
Анализ секционных данных позволяет наметить план дальнейшего исследования. Многолетний опыт расследования летальных исходов показал, что гистологическое исследование является основным в постановке диагноза и установлении причин смерти. Поэтому взятие материала на гистологическое исследование должно быть как можно более полным и включать органы, которые обычно не берут для микроскопии (органы эндокринной системы, костный мозг, лимфоузлы, в т. ч. регионарные к месту введения, миндалины, кожа и подкожная клетчатка с прилежащей мышцей в месте введения препарата, все отделы органов пищеварения, в т.ч. червеобразный отросток, главные отделы ЦНС. включая эпендиму и сосудистые сплетения третьего желудочка, центральной части и нижнего рога боковых желудочков; последнее особенно важно при расследовании случаев, связанных с вакцинацией против кори и паротита для исключения специфических для этих инфекций эпендиматитов и плекситов.
Таблица 6.3 Органы, исследуемые на наличие вирусного антигена
Гистологическое исследование
Фиксация. Оптимальные размеры кусочков - 1,5x1,5 см, фиксатор - 10% раствор формалина. Головной и спинной мозг фиксируется отдельно, соотношение объема кусочков количеству фиксатора не меньше, чем 1:2. Фиксированные кусочки органов, направляемые для повторного исследования в ГИСК им. Л.А. Тарасевича, должны быть пронумерованы и промаркированы, число и виды органов должны быть отмечены в сопроводительной документации.
Приготовление гистологических препаратов. Парафиновые или целлоидиновые срезы окрашивают гематоксилин-эозином, при поражении ЦНС окрашивают также по Нисслю, при необходимости используют другие и методики.
6.Мониторинг и расследование ПВО
Вирусологическое исследование (ИФА). Для проведения иммунофлюоресцент-ного исследования (ИФА) сразу после вскрытия берут кусочки нефиксированных органов. Препараты для ИФА представляют собой отпечатки или мазки органов на чистом хорошо обезжиренном предметном стекле. Наличие вирусного антигена в тканях говорит о возможности инфицирования, результаты ИФА сопоставляются с патомор-фологическими данными для оформления окончательного диагноза. При возможности, берут также материал для производства ПЦР и других доступных методик.
Для дифференциальной диагностики бешенства дополнительно исследуют ткани аммонова рога, тройничный ганглий (расположенный под твердой мозговой оболочкой на пирамиде височной кости), подчелюстную слюнную железу. Фиксация и обработка материала изложены в особой инструкции. Обязательно проведение ИФА-экспресс-диагностики: антиген вируса бешенства обнаруживается как при прямом, так и при непрямом методе окраски, лучше на криостатных срезах. Антиген обнаруживается в цитоплазме нейронов и вне клеток по ходу проводящих путей. В других клеточных элементах: глии, сосудах и т.д. свечение отсутствует.
Оформление документации для экспертизы в ГИСК им. Л. А. Тарасевича
Гистологическое изучение препаратов, постановка диагноза, оформление эпикриза проводятся в отделении, где проводилось вскрытие. Копия протокола вскрытия, результаты гистологического и вирусологического исследования, формалиновый архив, парафиновые блоки, готовые гистологические препараты направляют в ГИСК им. Л. А. Тарасевича (119002, Москва, пер. Сивцев Вражек, д. 41, телефон (499) 241-39-22, e-mail gisk@list.ru), который высылает заключение о проведенных исследованиях в учреждение, где проводилось вскрытие и в Центр Роспотребнадзора в субъекте РФ.
Контроль рекламационных серий
Решение о дальнейшем применении рекламационной серии МИБП или о ее повторном контроле, принимает ГИСК им. Л. А. Тарасевича. Дтя контроля препарат серии, вызвавшей ПВО, в ГИСК направляют инактивированные вакцины и анатоксины - 50 ампул; коревую и паротитную вакцины - 120 ампул; полиомиелитную вакцину - 4 флакона; антирабическую вакцину - 40 ампул, вакцину БЦЖ - 60 ампул; туберкулин -10-20 ампул; противостолбнячную, противодифтерийную и др. сыворотки - 30 мл.
Окончательное заключение по материалам расследования
Регистрацию ПВО, экспертизу материалов, запрос недостающих данных, представлению сводных данных по ПВО в Роспотребнадзор проводит ГИСК им. Л. А. Тарасевича. Окончательное заключение по каждому случаю, потребовавшему госпитализации или закончившегося летальным исходом, составляет комиссия по экспертизе ПВО при Роспотребнадзоре РФ, все материалы ГИСК им. Л. А. Тарасевича представляет в комиссию не позднее, чем через 15 дней после завершения расследования вне зависимости от наличия или отсутствия его связи с вакцинацией. Заключение комиссии Роспотребнадзор направляет в Федеральный орган социальной защиты населения, а по зарубежным препаратам - в представительства фирм.
ПРИЛОЖЕНИЯ
Приложение 1